Фф2 подвеска: Ремонт и устройство подвески (амортизаторы/пружины/стойки/рычаги), ч.2

Содержание

Ремонт передней подвески Форд Фокус 2 своими руками фото и видео

Ремонт передней подвески
Владельцы Форд Фокуса 2 могут жаловаться на неисправности своего автомобиля, имеющие место быть в любом транспорте, но говорить что-то плохое по поводу качества как передней, так и задней подвесок – права на это не имеет никто. Разработчики Ford Focus 2 в этой категории постарались действительно на славу. Однако, с течением времени, автовладельцы Фокуса так или иначе встанут перед вопросом, что же поделать с автомобилем: отдать на ремонт в автомастерскую либо же попробовать починить все самостоятельно. И также заднею подвеску.

передняя подвеска форд фокус 2

В любом случае, восстановление столько важной детали, как передняя подвеска Форд Фокуса 2, будь то рестайлинг или ремонт, неизбежно – все, рано или поздно, приходит в негодность и у всего имеется свой срок. У подвески подобная терминология измеряется в пройденных километрах. Большая часть составляющих передней подвески способны «провезти» вас порядка 80-100 тыс. км.

Как проверить подвеску

Схема для ремонта передней подвески форд

Не стоит забывать и о погрешностях, имеющих место быть в наших реалиях: речь идет качестве отечественных дорог: крайне не хотелось поднимать вновь и вновь тему российских дорог, но, в данном случае, они напрямую оказывают влияние на срок службы всей подвески, сокращая «период» пользования на 20-30 тыс. км – величину не столь маленькую, не правда ли?
Коротко напомним об основных характеристиках передней подвески Форд Фокуса: она представляет из себя рычажно-пружинную, независимую подвеску типа Макферсон.
«Состав» передней подвески.

 

амортизаторы и пружины на форд фокус

По своему «физиологическому» строению, подвеска состоит из следующих несомненно важных деталей, общее количество которых едва ли доходит до одного десятка:
рычага вкупе с шаровой опорой, а также сайлентблоками;

амортизаторной стойки, и стойки стабилизатора поперечной устойчивости;
штанги стабилизатора поперечной устойчивости;
кронштейна крепления штанги стабилизатора к подрамнику;
ступицы;
поворотного кулака;
подрамника.

 

 

передняя ступица

 

Рычаг передний в сборе новый

 

 

 

Наконечник рулевой тяги

внутривенный шрус

 

сайлентблоки

передние тормозные колодки

Как можно было догадаться, детали соединены в общую цепь, создающую само понятие передней подвески. Рычаг передней подвески Форд Фокуса 2, к примеру, в данном симбиозе выполняет роль органа, воспринимающего тормозные и тяговые силы во время движения авто.

Тяга рулевой Испания

Убеждаемся в неисправности передней подвески
Начать, пожалуй, следует с амортизатора. Для чего желательно поднять автомобиль либо домкратами, либо подвесным механизмом. Далее необходимо взяться за колесо и «потрясти» его по направлению от себя и к себе. Заметив свободные колебания колеса (люфт), получим сведения о необходимости замены амортизатора. Окончательно убедиться в ситуации нам позволит тормоз. Надавив на него и заметив пропажу люфта, делаем вывод о наиболее вероятной неисправности подшипника передней ступицы.

Конечно же, первоначальным «снятием пробы» должен стать визуальный осмотр амортизатора на внешние повреждения и подтеки масла.

открутит наконечник амортизатора и проверит амортизатор

Еще ранее убедиться в неисправности амортизатора можно следующим способом: не совершая никакого отрыва авто от земли, от вас потребуется лишь надавить на одну сторону машины и понаблюдать за продолжением. В случае, если автомобиль вернулся к своему исходному состоянию при полном или практически полном отсутствии повторяющихся колебаний, разумно сделать вывод об общей исправности амортизатора и уж затем переходить к более длительным проверкам. Вот именно таким образом и распределены наши советы, лучшее следует читать с конца, постепенно переходя к началу.

люфт передней подвески

Проверить стойку поперечной устойчивости также не является задачей из разряда «сверхсложная». Во-первых, необходимо проверить чехлы шаровых стоек на отсутствие каких-либо повреждений, затем, либо руками, либо монтировкой или любым схожим инструментом следует попытаться подвигать штангу стабилизатора ввер-вниз. В движении заметен люфт? Для вас плохие новости: стойку придется менять с крайне большой вероятностью.

Замена пружины и амортизатора

Несмотря на все, кажущиеся легкими, методы, наиболее рекомендованной процедурой станет все же поездка до ближайшего или же наиболее удобного СТО, где опытные специалисты укажут на имеющиеся недостатки.
Убедились?

Чиним самостоятельно
Разобравшись с причинами, перейдем к такому очаровательному действию, как непосредственный ремонт передней подвески Форд Фокус 2. Для начала рассмотрим замену рычага передней подвески, краткие сведения о котором мы получили несколько ране.

 

поднятия авто домкратом

Начинаем с подъема автомобиля при помощи любого удобного для автолюбителя средства: домкрата, подъемника и прочего. Снимаем колесо и, далее, избавляемся от шаровой опоры, для чего необходимо высверлить и выбить три заклепки, крепящие опору к рычагу. В случае, если конечной целью ремонта являлась именно шаровая, то в данной ситуации следует заменить опору на новую и закрепить её болтами, а также самоконтрящимися гайками. При упорном желании действовать дальше, от вас потребуется выкрутить три болта: один переднего крепления, а два других – заднего крепления рычага к подрамнику. Мы добрались до рычага: заменяем его на новый, повторяем операцию разборки в обратную сторону, с конца, затем, собрал все воедино, отправляемся в автомастерскую делать развал-схождение. Данная процедура возможна в проведении только опытными специалистами

Второй проблемой, наиболее часто имеющей место быть у передней подвески Форд Фокуса 2, чьи схемы ремонта легкодоступны на просторах интернета (схемы в данных случаях представляют собой ординарную последовательность шагов, необходимых к выполнению в строгом соблюдении хода действия), являются подшипники передней ступицы. Итак, подшипники, чью замену рекомендуют проводить одновременно, то есть, менять сразу и левый, и правый подшипник передней подвески. Шаг первый: поднимает машину на домкрате, избавляемся от колеса, выкручивая попутно ступичный болт. Далее следует избавиться от стойки стабилизатора поперечной устойчивости. Затем отцепляем антиблокировочную систему, отсоединив соответствующие клеммы. Откручиваем удерживающие наконечник рулевой тяги болты.

 

открутит наконечник амортизатора и проверит амортизатор

Переходим к тормозному суппорту: откручиваем и его, попутно избавляясь от тормозного диска. После этого, переходим к гайке крепления шаровой стойки, откручивая её. затем, используя специализированный съемник, извлекаем «палец» из рычага. Советы по поводу применения молотка для извлечения «пальца» имеют место быть в случае, если вы имеете сведения, куда и как бить. В противном случае, обратитесь в автомастерскую исключительно за данной операцией.

Открепляем клеммное соединение амортизатора и поворотного кулака. Далее от нас потребуется высвободить амортизаторную стойку с использованием зубила и молотка для того, чтобы разжать клеммное соединение.

смотрим на выработку привода фф

Вытащив из ступиц шарниры равных угловых скоростей переднеколесного привода, избавимся от поворотного кулака. Мы подобрались вплотную к нашей цели и, последним шагом, выпрессовываем ступицу с подшипником, затем, поменяв на новые, впрессовываем обратно. Для данной процедуры необходимо использовать исключительно такой инструмент, как съемник. Желательно, все же, по данному поводу обратиться к специалистам из автомастерской, процедура, по сравнению с общей заменой подшипников, недорогая. После успешного впрессовывания собираем все детали в обратной разбору последовательности и отправляемся делать развал-схождение

В общем и целом, можно заявить о том, что ремонт передней подвески на Форд Фокус 2, а точнее двух её наиболее важных и часто выходящих из строя деталей завершен успешно.

Похожие записи:

Передняя подвеска Форд Фокус 2

________________________________________________________________________________________

Передняя подвеска Форд Фокус 2


Рис.29. Передняя подвеска Форд Фокус 2

1 — рычаг; 2 — шаровая опора; 3 — поворотный кулак; 4 — ступица; 5 — амортизаторная стойка; 6 — стойка стабилизатора поперечной устойчивости; 7 — кронштейн крепления штанги стабилизатора к подрамнику; 8 — штанга стабилизатора поперечной устойчивости; 9 — подрамник

Передняя подвеска — независимая, типа МакФерсон, обеспечивающая высокие показатели плавности хода автомобиля, его устойчивости и управляемости, с телескопическими стойками амортизатора, служащими для гашения колебаний, поглощения толчков и ударов, действующих на автомобиль через его колеса.

Стойки амортизатора включают в себя упругие элементы — пружины, которые предотвращают отрыв колес от дороги, обеспечивая постоянное сцепление с дорогой и препятствуя колебанию кузова, что соответственно сказывается на безопасности и комфортабельности движения.

К нижней части стойки амортизатора передней подвески крепится ступичный узел, являющийся основой для крепления колес и тормозных механизмов.

Ступичный узел через шаровую опору и поперечный рычаг соединен с подрамником, а подрамник — с кузовом автомобиля.

Также передняя подвеска Ford Focus 2 снабжена стабилизатором, предназначенным для повышения устойчивости и уменьшения углов крена кузова при прохождении поворотов и неровностей дороги за счет передачи усилий сжатия или растяжения от одной стойки к другой.

Рис.30. Элементы передней подвески Форд Фокус 2

1 — рычаг; 2 — шаровая опора; 3 — поворотный кулак; 4 — амортизаторная стойка; 5 — стойка стабилизатора поперечной устойчивости; 6 — штанга стабилизатора поперечной устойчивости; 7 — подрамник

Основа передней подвески — две амортизаторные стойки, которые позволяют передним колесам перемещаться вверх-вниз при проезде неровностей и одновременно гасить колебания кузова.

К нижней части корпуса стойки крепится поворотный кулак, а к средней части приварен кронштейн для крепления стойки стабилизатора поперечной устойчивости.

В корпусе стойки установлен гидравлический газонаполненный амортизатор. На штоке амортизатора расположен пенополиуретановый буфер хода сжатия, предназначенный для ограничения хода колеса вверх при движении автомобиля по неровностям.

Рис.31. Элементы стойки амортизатора Форд Фокус 2

1 — телескопическая стойка; 2 — пружина; 3 — упорный подшипник; 4 — гайка; 5 — верхняя опора стойки; 6 — верхняя опорная чашка пружины; 7 — буфер хода сжатия; 8 — грязезащитный чехол; 9 — переходная втулка грязезащитного чехла

Винтовая цилиндрическая пружина стойки амортизатора своим нижним витком опирается на нижнюю чашку, приваренную к корпусу стойки, а верхним витком (уменьшенного диаметра) — на центрирующую втулку, закрепленную на штоке амортизатора вместе с верхней опорой стойки.

Верхняя опора стойки, упирающаяся в чашку брызговика кузова, за счет своей эластичности дает возможность стойке качаться при ходах подвески и не передает высокочастотные колебания на кузов.

Упорный подшипник, расположенный между верхней опорной чашкой пружины и верхней опорой стойки, позволяет стойке амортизатора с пружиной поворачиваться вместе с управляемым колесом.

Рис.32. Рычаг передней подвески Форд Фокус 2

1 — шаровая опора; 2 — сайлент-блок переднего крепления к подрамнику; 3 — сайлент-блок заднего крепления к подрамнику

Тормозные и тяговые силы при движении автомобиля воспринимаются рычагами подвески, соединенными через шаровые опоры с поворотными кулаками, и через сайлент-блоки — с подрамником подвески.

Корпус шаровой опоры приклепан к рычагу тремя заклепками, а палец шаровой опоры крепится к поворотному кулаку с помощью конического соединения. Подрамник в четырех точках крепится к лонжеронам через сайлент-блоки (запрессованные в отверстия подрамника).

Рис. 33. Стабилизатор поперечной устойчивости передней подвески Форд Фокус 2

1 — стойка; 2 — штанга; 3 — кронштейн; 4 — подушка

Подшипник ступицы, ступица и поворотный кулак передней подвески Ford Focus 2 представляют собой неразборный узел, поэтому при его неисправностях замените узел целиком. Штанга стабилизатора поперечной устойчивости изготовлена из пружинной стали.

Штанга в своей средней части крепится к подрамнику подвески кронштейнами через две резиновые подушки. Оба конца штанги через шаровые шарниры стоек стабилизатора поперечной устойчивости крепятся к корпусам амортизаторных стоек.

Для обеспечения хорошей устойчивости и управляемости автомобиля передние колеса установлены под определенными углами относительно элементов кузова и подвески.

Рис.34. Поворотный кулак Форд Фокус 2 в сборе с подшипником и ступицей

1 — проушина крепления наконечника рулевой тяги; 2 — отверстие крепления датчика скорости вращения колеса; 3 — отверстие крепления к кронштейну амортизаторной стойки; 4 — проушина крепления направляющей тормозных колодок; 5 — подшипник ступицы; 6 — отверстие крепления пальца шаровой опоры; 7 — ступица

Схождение колес — это угол между плоскостью вращения колеса и продольной осью автомобиля. Схождение колес способствует правильному положению управляемых колес при различных скоростях движения и углах поворота автомобиля.

Признаки отклонения угла схождения колес от нормы: сильный пилообразный износ шин в поперечном направлении, повышенный расход топлива из-за большого сопротивления качению передних колес.

Схождение колес автомобиля регулируется вращением рулевых тяг при отвернутых контргайках наконечников рулевых тяг.

Угол продольного наклона оси поворота — это угол между вертикалью и линией, проходящей через центры поворота шаровой опоры и подшипника верхней опоры амортизаторной стойки в плоскости, параллельной продольной оси автомобиля.

Он способствует стабилизации управляемых колес в направлении прямолинейного движения.

Симптомы отклонения угла от нормы — увод автомобиля в сторону при движении, разные усилия на рулевом колесе в левом и правом поворотах, односторонний износ протектора шин.

Развал колес — это угол между плоскостью вращения колеса и вертикалью. Он cпособствует правильному положению катящегося колеса при работе передней подвески.

При сильном отклонении этого угла от нормы возможны увод автомобиля от прямолинейного движения и односторонний износ протектора. Регулируется только угол схождения колес.

Угол развала колес и угол продольного наклона оси поворота колеса заданы конструктивно геометрией деталей подвески и кузова автомобилей.

В эксплуатации эти углы регулировке не подлежат. Контроль и регулировку углов установки колес рекомендуется проводить на станции технического обслуживания.

Перед регулировкой колеса должны быть установлены в положение прямолинейного движения автомобиля. Автомобиль нужно установить на горизонтальную площадку.

Топливный бак, бачок омывателя ветрового стекла и т. д. должны быть полными, запасное колесо находится на штатном месте. В салоне и багажнике не должно быть посторонних предметов.

Замена подушек штанги стабилизатора поперечной устойчивости передней подвески

Резиновые подушки крепления штанги стабилизатора поперечной устойчивости к подрамнику передней подвески Форд Фокус 2 меняем при разрывах и значительном износе подушек, вследствие которого возникает люфт в соединении деталей.

Элементы крепления штанги стабилизатора к подрамнику расположены в труднодоступных местах — между подрамником и кузовом. Поэтому завод-изготовитель рекомендует выполнять замену подушек на подрамнике, снятом с автомобиля.

При этом приходится выполнять много сложных операций по демонтажу подрамника. С целью снижения трудоемкости операций предлагаем подрамник полностью не демонтировать, а немного опустить, обеспечив доступ к местам крепления штанги стабилизатора передней подвески Ford Focus 2.

Для этого подставляем под подрамник регулируемый упор, отворачиваем задние и ослабляем передние болты крепления подрамника к кузову. Опускаем на упоре заднюю часть подрамника на 60—70 мм.

Накидным ключом или головкой отворачиваем два болта крепления кронштейна штанги стабилизатора к подрамнику. Поддев отверткой снимаем кронштейн. Снимаем разрезную резиновую подушку.

Разрез в подушке должен быть направлен к передней части автомобиля, а выступ расположен справа по ходу движения. На новой подушке он окрашен в желтый цвет.

Аналогично демонтируем кронштейн и резиновую подушку с другой стороны штанги стабилизатора. Штангу стабилизатора поперечной устойчивости снимаем для замены при ее деформации или поломке.

Для демонтажа штанги отсоединяем от нее стойки стабилизатора поперечной устойчивости и снимаем кронштейны крепления штанги к подрамнику.

Снимаем передние подушки подвески системы выпуска отработавших газов. Головкой отворачиваем четыре болта и демонтируем съемную поперечину пола.

Поперечина и подушки будут мешать снятию штанги стабилизатора. Снимаем штангу стабилизатора поперечной устойчивости. Монтируем штангу
стабилизатора поперечной устойчивости в обратной последовательности.

Устанавливаем новые подушки на штангу и крепим штангу к подрамнику и к стойкам стабилизатора. Болты крепления кронштейнов штанги и гайки крепления пальцев шаровых шарниров стоек стабилизатора затягиваем предписанными моментами.

Снятие рычага передней подвески Форд Фокус 2

Рычаг снимаем для замены шаровой опоры или самого рычага при его деформации, наличии трещин в металле, а также при повреждении (разрывы, отслоение резины) или значительном износе его сайлент-блоков. Работа показана на левом рычаге, правый рычаг снимаем аналогично.

Снимаем колесо и надежно фиксируем автомобиль на подставке заводского изготовления. Снимаем грязезащитный щиток моторного отсека. Очищаем рычаг от грязи, а резьбовые соединения смачиваем проникающей жидкостью.

Отворачиваем гайку крепления пальца шаровой опоры Форд Фокус 2. Оттягивая рычаг вниз, наносим удары молотком по проушине поворотного кулака. Будьте осторожны, не повредите защитный чехол шаровой опоры. Выводим палец шаровой опоры.

Для отсоединения шаровой опоры с помощью съемника может потребоваться снятие защитного термоэкрана пыльника шаровой опоры. Для этого снимаем тормозной диск.

Отворачиваем болт крепления защитного термоэкрана пыльника шаровой опоры и снимаем термоэкран. Ключом отворачиваем гайку крепления пальца шаровой опоры. Чтобы не повредить резьбу пальца шаровой опоры, отворачиваем гайку на нужную высоту и устанавливаем съемник.

После выпрессовки пальца отворачиваем гайку до конца. При необходимости удерживаем палец от проворачивания шестигранником. Вынимаем палец шаровой опоры из проушины поворотного кулака. Отворачиваем болт крепления переднего сайлент-блока рычага к подрамнику и вынимаем болт.

Головкой отворачиваем болты крепления заднего сайлент-блока рычага к подрамнику. Снимаем рычаг передней подвески. Для замены шаровой опоры закрепляем рычаг в тисках. Cверлом высверливаем головки трех заклепок, крепящих корпус шаровой опоры к рычагу.

Выбиваем заклепки бородком и вынимаем шаровую опору из рычага. Крепим новую шаровую опору к рычагу подходящими гайками М10 и болтами М10х30 мм. Затягиваем гайки с моментом не менее 70 Нм.

Устанавливаем рычаг передней подвески в обратной последовательности. Заворачиваем гайку крепления пальца шаровой опоры, удерживая палец от проворачивания шестигранником.

Устанавливаем на место колесо и снимаем автомобиль с подставки. Несколько раз качаем переднюю часть автомобиля, чтобы все узлы подвески заняли рабочее положение.

Окончательная затяжка переднего болта крепления рычага к подрамнику выполняется при нагруженной подвеске с моментом 175 Нм. Проверяем углы установки колес и при необходимости регулируем схождение передних колес автомобиля.

________________________________________________________________________________________

________________________________________________________________________________________

_________________________________________________________________________________________

_________________________________________________________________________________________

_________________________________________________________________________________________

_________________________________________________________________________________________

Подвеска форд фокус 2. Винтовая подвеска на форд фокус 2


Регулировка по высоте:
Перед от -30мм до -70мм
Зад от -30 до -60мм
Вес 1070/1090кг
Подходит для Focus 1.6Ti/ 1.8/ 2.0/ 1.6TDCi/ 1.8TDCi/ 2.0 TDCi/ ST2.5
Исключая Cabrio  и Turnier
Гарантия- один год без ограничения пробега.
В комплекте 4 амортизатора и 4 пружины,ключи для регулировки.

   Необходимо отметить, что подвеска форд фокус 2 является достаточно надежным и долговечным элементом. Правда, могут возникать определенные проблемы, связанные с ремонтом, поскольку самостоятельно отремонтировать ту или иную поломку оказывается нелегко, даже если речь идет о мелкой поломке.
    Но если Вы обращаетесь к нашим специалистам, Вы избавляете себя от вышеуказанных проблем. Плюс ко всему мы предлагаем доступные цены на наши ремонтные процессы, вне зависимости от уровня сложности ремонта.
    Если различать переднюю подвеску от задней, то передний вариант оказывается более простым и распространенным.     Устройство составлено из специального рычага, имеющего шаровой наконечник, стабилизаторную стойку, рулевой наконечник, а также амортизационную стойку вместе с пружиной.
    Что касается задней подвески, то она является более независимой, может быть многорычажно-пружинной, располагаясь на всех сторонах. Конструкция данной подвески такова, что применяются и функционируют телескопические амортизаторы, а также стабилизаторное устройство, отвечающее за поперечную устойчивость.
    В передней подвеске довольно слабым элементом, нуждающимся в частом ремонте, является сайлент-блок, расположенный в нижнем рычаге. Естественно, нашим специалистам это известно и они без особенных проблем справятся с той или иной поломкой этого элемента. Мы обладаем необходимым специализированным и высококачественным оборудованием – соответственно, можем гарантировать Вам отменные результаты ремонтных работ.
    Подвеска форд фокус 2 может сделать Вашу машину уникальной, стильной и ультрасовременной, если оформлена правильным образом.

Винтовая подвеска (койловеры) Ford (Форд)

Показывать: 21255075100

Сортировать: По умолчаниюПо Имени (A — Я)По Имени (Я — A)По Цене (возрастанию)По Цене (убыванию)По Модели (A — Я)По Модели (Я — A)

В наличии В наличии В наличии В наличии В наличии В наличии В наличии В наличии В наличии В наличии Под заказ Под заказ Под заказ Под заказ Под заказ Под заказ Под заказ Под заказ Под заказ Под заказ Под заказ

Винтовая подвеска или койловер (на сленге “винты”) – неотъемлемая часть тюнинга занижения подвески современного автомобиля, в частности для Ford (Форд). Полный комплект винтовой подвески (койловеров) для Ford (Форд) состоит из 4 амортизаторов, на корпусе которых нарезана резьба и установлены регулировочные шайбы. В зависимости от используемой в машине подвески конструкция винтовой подвески также может быть разной, к примеру, задние амортизаторы могут быть не в сборе с пружиной, а стоять отдельно, в таком случае регулировка высоты осуществляется с помощью специальных регулирующих блоков или подпружинников, которые устанавливаются вместе с пружиной винтовой подвески (койловеров). Принцип работы стандартной винтовой подвески (койловеров) для Ford (Форд) основан на изменении положения пружины винтовой подвески (койловеров): зажимая пружину регулировочной шайбой клиренс автомобиля увеличивается, наоборот разжимая мы занижаем для Ford (Форд). Как нетрудно догадаться при увеличении клиренса и соответственно сжатии пружины винтовой подвески (койловеров) ее амортизационные свойства снижаются, т.е увеличивается жесткость пружины, а при занижении (расжатии пружины) наоборот понижается. Пружины винтовой подвески (койловеров) для Ford (Форд) разработаны таким образом, что при гражданском использовании данные изменения являются несущественными, однако, когда точность настроек является ключевым фактором необходимо использовать винтовую подвеску (койловеры) фултапной конструкции. Основной особенностью данных койловеров является тот факт, что регулировки высоты у фултапной винтовой подвески (койловеров) осуществляется не только за счет зажима пружин, но и за счет геометрического изменения высоты амортизаторов: нижняя часть амортизатора винтовой подвески (койловера), которая устанавливается в поворотный кулак, имеет резьбовое соединение. Это позволяет изменять высоту клиренса для Ford (Форд) в широких диапазонах, либо регулировать жесткость пружин шайбами, а высоту нижним брэкетом винтовой подвески (койловера). Обычно амортизаторы винтовой подвески (койловеров) фултапной конструкции имеют регулировки на сжатие-отбой, что также влияет на жесткость для Ford (Форд) в целом. Помимо всего прочего в комплект фултапной винтовой подвески (койловеров) входят развальные опоры или опоры на ШС (шарнирное соединение) для регулировки развала колес, что важно в дрифт соревнованиях или стенс проектах, или когда не удается выставить корректный угол развала стандартными средствами (авто после ДТП и тд). Стандартный комплект винтовой подвески (койловеров) для Ford (Форд) включает:
— Амортизаторы винтовые
— Пружины койловерные холоднокатанные
— Ключи регулировки высоты
— Ключи регулировки жесткости (опционально)
— Элементы регулировки высоты (подпружинники)
— Доп крепеж (держатели, стаканы, переходники, втулки и пр) (опционально)
— Опоры на резиновом, шарнирном соединениях или развальные (опционально)
— Удлинители регулировок жесткости (опционально)
— Хелперы (опционально)

 

Показать больше

 

Слабые места и недостатки Ford Focus 2

Фокус II — автомобиль производства компании Ford. Эти автомобили уже не производятся и купить их возможно только б/у. Спрос на эти автомобили есть, как правило, только у молодых парней, которые недавно закончили автошколу. Многие называют Focus «кредитотошнот» или «машина офисного планктона», из-за того, что их часто покупают в кредит малообеспеченные граждане.

История

Производилось 2 поколение Фокуса с 2004-2012 года. Конструкция подвески, которая была поистине восхитительной и надежной, взята с первого поколения. В 2008 году в продажу вступили рестайленговые машины с обновленным дизайном. От первого поколения уже ничего не осталось (исключение составляет только двигатель и крыша).

Безопасность

Второе поколение Фокуса является одним из самых безопасных автомобилей. Ведь по Euro NCAR имеет пять из пяти звёзд по безопасности пассажира (35) и ребенка (40), но вот безопасность пешехода значительно меньше, и составляет всего две звезды из пяти.

Достоинства и преимущества Ford Focus 2

  1. Несколько вариантов кузова: четырехдверный седан, трехдверный и пятидверный хэтчбек;
  2. Салон: эргономичный, разная цветовая гамма, зависящая от комплектации, хороший звук акустики, вместительный, информативная и читабельная панель приборов, качество работы кондиционера достойное, обивка сидений кожаная или тканевая, поясничная и боковая поддержка кресел удобная;
  3. Багажный отсек: объем у седана 466 л поклажи, хэтчбека – 281 л, если сложить спинки сидений, расположенных сидений увеличится до 930 и 1145 л соответственно, погрузочная высота низкая, проемы широкие;
  4. Большая линейка силовых установок: 5 бензиновых моторов и один турбированный дизельный;
  5. Низкий расход топлива у авто, оборудованного двигателем объемом 1,4 – в смешанном цикле составляет 6,6 л на 100 км;
  6. Электронное впрыскивание, модернизированная система зажигания, неплохая динамика у двухлитрового двигателя;
  7. Силовые установки соответствуют стандарту не ниже Евро-4;
  8. Надежная рулевая;
  9. Длительный срок службы автоматической и механической коробки передач;
  10. Ходовка вынослива и комфортна;
  11. Хороший показатель управляемости;
  12. Стоимость обслуживания невысока;
  13. Можно устанавливать не оригинальные запчасти, которых на рынке огромный выбор.

 

Слабые места Ford Focus 2

  • Кузов;
  • Салон;
  • Электроника;
  • Двигатель;
  • Трансмиссия;
  • Подвеска.

Кузов

Первое, на что стоит смотреть при покупке, это кузов. Сразу же стоит понимать, что автомобиль достаточно старый, и то что заводская краска где-то выцвела, а кузов и двери могут быть ржавыми, обшивка в салоне будет протертая, а пороги и бампера будут иметь эксплуатационные повреждения. Но все же, у Форда есть другие минусы по кузову, о которых нужно обязательно знать, и чинить их сразу после покупки. Форд Фокус 2 не любит русские зимы, именно из-за этого у Фокуса и происходят частые поломки:

1) Проблема с замками. Самый главный — это с личинкой для открывания капота (фишка Ford Focus как 1, так и 2 поколения — открывание капота с ключа), замок закисает. Исправить все это можно двумя способами: помазать проникающей смазкой крышку замка (где эмблема) или заменить замок с пластмассового на металлический, который хорошо подойдет от Ford Mondeo.

2) Иногда бывают «косяки» с неправильной работой центрального замка, который отвечает не только за замок самой двери, но и за лючок бензобака.

3) Проблемы хромированного покрытия, которое призвано сделать машину красивей, но после нескольких зим, на месте между металлом и хромом, начинает появляться ржавчина, что уже не делает машину красивой.

4) Если у вас авто в кузове хэтчбек или седан, то вам стоит регулярно проверять подсветку номерного знака, т.к. у этих типов кузова бывают проблемы с проводами этого узла, который из-за влаги покрывается коррозией.

5) Неисправности со стеклоомывателями, которая заключается в том, что шланги стеклоомывателя вылетают из своих крепленый и заливают двигатель.[/stextbox]

Салон

В целом, салон у форда неплохой. Качество тканевой обшивки прекрасна, она замечательно выдерживает процесс химчистки и износостойкая, но через несколько лет эксплуатации салон начинает заметно скрипеть.

Электроника

Самое дорогое из электроники, что часто выходит из строя, это подогрев сидений, за который вам придётся отдать не малую сумму денег. Часто происходят проблемы с печкой, моторчик которой может выйти из строя. Также, приблизительно к 50 тысячам км., ломается резистор, сопровождаясь не сильным, но неприятным свистом. Так же страдает датчик тепла в салоне, но только в версиях с круиз-контролем. Так же, из-за русских зим страдают нити обогрева боковых зеркал. В рестайлинговых машинах достаточно трудно менять лампочки в фарах, так как для этого фару приходится доставать целиком.

Двигатель

У Фокуса идут четыре варианта двигателей: 1,4; 1,6; 1,8; 2,0 литров. Давайте с каждым отдельно разберёмся:

1) 1,4 литровые двигатели, сами по себе, прочные и надёжные (если в них регулярно менять масло и фильтра), но в компоновку лучше ставить механику, потому что на автомате он точно не поедет. Но отсюда возникает одна проблема — из-за того, что двигатель всегда крутиться на высоких оборотах (на низких он не будет ехать, т.к. у него мало мощности), ресурс двигателя быстро истощается. Поэтому, приобретая автомобиль из третьих или более рук, стоит хорошо подумать, ведь есть риск попасть на капитальный ремонт мотора;

2) 1,6 литров (100 л.с.) — данный двигатель, так же как и 1.4, считается прочным и надежным (так же не забывать менять расходники). Его главным плюсом является простота конструкции, так что починить двигатель можно и самому. Но, на сегодняшний день, мощность двигателя очень мала. А если брать в сборе с автоматом — то динамики вам точно не хватит.

1,6 литровый (115 л.с.) — данный образец двигателя будет получше своего предшественника 100-сильного мотора, и с автоматом уже можно ездить, при практически таком же расходе бензина. Отличает его только добавленная система изменения фаз газораспределения, как на впускном, так и на выпускном валу. У этого мотора проблема с муфтой фазовращателя, которая быстро «кончается», но на более поздних и усовершенствованных моделях такая проблема случается реже.

3) Двигатели 1,8 и 2,0 литров практически одинаковы по своей конструкции и проблемы у них тоже схожи. Ресурс таких моторов 350 тысяч км. Что же нужно менять? Самое главное — это цепь ГРМ (200 тыс. км.), и прокладку между головкой и блоком (100 тыс. км.), а то начинается потеря масла из двигателя. Также нужно часто следить за затяжкой болтов, а то из-за вибраций они откручиваются.

Трансмиссия

Коробка передач у этой машины трёх вариантов, и у каждой есть свои плюсы и минусы, давайте разберёмся с каждой:

Подвеска

Как я говорил раньше, у Фокуса прекрасная подвеска, которая досталась от первого поколения. Подвеска надёжная и редко ломается, всё это из-за отличной настройки независимой шасси, но всё же некоторые элементы выходят из строя и их надо заменять. Самые основные, не долго живущие элементы:

  1. Опорные подшипники стоек. К 40-70 тыс. км. Они приходят в негодность и требуют замен. Так же требует внимания ступичный подшипник, которая идет только в сборе со ступицей.
  2. После 40 тысяч может появиться негромкий стук, который означает что пришли в негодность стойки стабилизаторов.
  3. На 80-110 тысяч километров потребуется менять втулки и с ними же: шаровые опоры, рычаги и сайлентблоки. После всего этого потребуется уделить внимание амортизаторам.

После замены этих деталей, ваша подвеска будет такая же прекрасная, как и у сошедшей с конвейера машины.

В заключение о недостатках Форд Фокуса 2-го поколения.

Наша «машина офисного планктона» очень даже не плоха. Для простого парня она вполне подойдёт, хоть в ней есть и минусы, но если следить за этими минусами, то всё будет в порядке. Конечно же, новую машину купить вы не сможете, но при покупке «с рук» нужно проверить все перечисленные слабые места.

P.S.: Уважаемые автовладельцы, если вами были замечены систематические поломки каких-либо деталей, агрегатов данной модели, то сообщите об этом в комментариях ниже.

Узнайте у нас так же: Сколько масла и жидкостей заливать в Форд Фокус 2

Сентябрь и COVID-19 | RTD

Чтобы получить доступ к самой последней информации о расписании, пожалуйста, обратитесь к нашей странице Расписание .

Эти изменения в услугах вступили в силу 5 сентября 2021 года .

Затронутые маршруты

Местные / ограниченные автобусные маршруты

0, 0L, 1, 3, 3L, 4, 6, 8, 9, 10, 11, 12, 14, 15, 15L, 16, 16L, 19, 20, 21, 24, 27, 28, 29, 30, 30L, 31, 32, 34, 35, 36, 36L, 37, 38, 40, 41L, 42, 43, 44, 45, 46, 48, 49, 51, 52, 53, 55, 59, 65, 66, 67, 72/72 Вт, 73, 76, 77, 80 / 80L, 83, 87L, 88, 88L, 92, 93L, 99, 99L, 100, 104, 104L, 105, 112, 114, 120 / 120E / 120W, 120L, 121, 125, 128, 130, 131, 133, 135, 139, 153, 157, 169, 169L, 204, 205, 206, 208, 209, 225, 228, 323, 324, 326, 327, 401, 402L, 403, 483, 520, BOUND, DASH, JUMP, SKIP, Free MetroRide, Free MallRide, Anschutz Shuttle

Региональные маршруты

104X, 116X, 120X, 122X, 145X, AB, AT, BOLT, CV, EV, FF1, FF2, FF3, FF4, FF5, FF6, FF7, GS, J, LD1, LD2, LD3, LX1, LX2, NB, P, RX, Y

Рейка Сервис

B, C, D, E, F, G, H, L, N, R, W

Окончательные изменения для местных / ограниченных автобусных маршрутов

Этот маршрут работает в будние дни по дополнительному субботнему расписанию с дополнительными утренними рейсами в часы пик.С 12:30 до 4:30 по будням услуги не предоставляются.

По субботам и воскресеньям работает нормально с 12:30 до 4:30 без обслуживания

Восстановить движение в будние дни в час пик между I-25 • Broadway и вокзалом Civic Center с 15-минутным интервалом между 6:00 — 9:00 и 15:30. — 18:00

Маршрут работает по будням по субботнему расписанию.Расписание субботы и воскресенья изменилось — пожалуйста, ознакомьтесь с расписанием, если таковое имеется. Кроме того, сообщение перенаправлено на станцию ​​Аламеда и прекращено к востоку от Чероки до Черри-Крик и Глендейл.

Маршрут работает по будням по субботнему расписанию. В расписании субботы и воскресенья нет изменений.

Восстановить службу в час пик в будние дни с тремя ежедневными поездками в каждом направлении только между станцией метро Aurora и станцией Civic Center.

Этот маршрут продолжает обеспечивать регулярные рейсы в будние и субботние дни.

Маршрут работает по будням по субботнему расписанию. В расписании субботы и воскресенья нет изменений.

С изменением обслуживания в июне 2021 года будут добавлены поездки по будням между Civic Center и Platte Garage с 9:00 до 17:00. для размещения растущего числа пассажиров и обеспечения доступа автобусного оператора к рабочим местам и обратно.В расписании субботы и воскресенья

изменений нет.

Маршрут курсирует ежедневно по дополнительному субботнему расписанию с дополнительными поездками ранним утром в будние дни. В расписании субботы и воскресенья нет изменений. Маршрут был изменен, чтобы обслуживать Лейквуд Коммонс в качестве его западного терминала.

Увеличьте частоту обслуживания в час пик в будние дни до каждых 15 минут с 6:30 до 9:00.м. и 15:30. — 18:00, между 9-м / Клермонтом и центром Денвера.

Маршрут работает по будням по субботнему расписанию. В расписании субботы и воскресенья нет изменений.

С изменениями в обслуживании в июне 2021 года будут добавлены рейсы между Даунинг / Колфакс и 38-й станцией и станцией Блейк, пиковые периоды, будние дни, с 6:00 до 9:00 и с 15:00 до 18:00, чтобы решить текущие проблемы с пропускной способностью клиентов.В расписании субботы и воскресенья нет изменений.

Маршрут работает по будням по субботнему расписанию. В расписании субботы и воскресенья нет изменений.

Работает каждые 10 минут по будням между станцией Денвер Юнион и Колфаксом / Биллингсом с 6:00 до 18:00. Кроме того, обслуживание будет начинаться раньше, примерно в 3:30 каждый день, и работать до 1:00 каждый день.

Маршрут 15L работает по обычному буднему графику.

  • Будние дни: суббота без обслуживания с 12:30 до 5:00
  • Суббота: с 12:30 до 5:00 без обслуживания
  • Воскресенье: не работает с 12:30 до 5:00

Этот маршрут не работает, пока действует Смена службы COVID-19.

Увеличьте частоту обслуживания в будние дни до каждых 30 минут.Также будут внесены незначительные корректировки времени работы для улучшения своевременности выполнения работ.

Добавьте (3) поездки в будние дни в оба автобуса A.M. и П. часы пик между станцией Юнион и Национальной лабораторией возобновляемых источников энергии.

Этот маршрут работает каждый день по дополнительному субботнему расписанию с дополнительными рейсами в восточном направлении рано утром из Пирсона / Джуэлла по будням. В расписании субботы и воскресенья нет изменений.

Маршрут работает по будням по субботнему расписанию. В расписании субботы и воскресенья нет изменений. В будние дни служба начнется примерно в 5:30 утра в каждую сторону.

Этот маршрут не работает, пока действует Смена службы COVID-19. Маршрут был объединен с Маршрутом 46 (подробности см. На Маршруте 46).

Будние рейсы будут расширены на восток от 30-й станции и станции Даунинг до станции Central Park, с ежечасной частотой с 6:00 до 18:00.

Этот маршрут работает в будние дни по дополнительному субботнему расписанию, с дополнительными утренними рейсами в пиковое время в будние дни. В расписании субботы и воскресенья нет изменений.

Маршрут работает по будням по субботнему расписанию. В субботу и воскресенье служба будет ежечасной.

Этот маршрут не работает, пока действует Смена службы COVID-19.

  • Будние дни: суббота, обслуживание не работает с 12:30 до 4:30
  • Суббота: суббота, обслуживание не работает с 12:30 до 4:30
  • Воскресенье: воскресное богослужение, с 12:30 до 4:30 без обслуживания

Движение к западу от Уодсворта до Уорд-роуд Парк-н-Райд прекращено. Остальные рейсы работают в будние дни по субботнему расписанию, к востоку от центра города до бульвара Колорадо нет.Существует новое расписание движения по субботам и воскресеньям с ежечасным сообщением между Уодсворт и Юнион-Стейшн.

Route 34 в будние дни будет работать каждые 30 минут, начиная с 6:00, по сравнению с 8:00 в настоящее время.

Маршрут работает по будням и субботам по субботнему расписанию. После 21:30 в будние и субботу службы не ходят. Воскресное богослужение не изменилось.

Этот маршрут работает в будние дни по дополнительному субботнему расписанию с дополнительными утренними рейсами в часы пик.В расписании субботы и воскресенья нет изменений.

Этот маршрут не работает, пока действует Смена службы COVID-19.

AM и PM пиковые поездки теперь действуют, пока действует изменение обслуживания COVID-19.

  • Будние дни: суббота, обслуживание не работает после 12:30
  • Суббота: суббота, обслуживание не производится после 12:30.м.
  • Воскресенье: воскресное богослужение, после 12:30 богослужение не работает

Маршрут был изменен для обслуживания станции Ward Ward и больше не будет обслуживать Ward Rd PnR.

Маршрут 40 завершится на 40-й станции и станции Колорадо. Обслуживание к северу от 40-й авеню до Коммерс-Сити будет осуществляться по шоссе 49 с улучшенным диапазоном обслуживания.

Этот маршрут не работает, пока действует Смена службы COVID-19.

Восстановите избранные поездки ранним утром и поздним вечером. Восстановите частоту обслуживания в будние часы пик до 15 минут в Montbello.

Восстановите избранные поездки ранним утром и поздним вечером.

Маршрут работает в будние дни по дополнительному субботнему расписанию. В будние дни есть дополнительные рейсы в восточном направлении утром и на запад во второй половине дня в часы пик.В расписании субботы и воскресенья нет изменений. Маршрут был изменен для обслуживания станции Ward Wheat Ridge и больше не будет обслуживать Ward Rd PnR.

Восстановите избранные поездки ранним утром и поздним вечером.

Начните обслуживание в будние дни на 90 минут раньше, чем по существующему расписанию, с началом обслуживания примерно в 6:15 утра в каждом направлении.

Увеличить количество рабочих часов в будние дни до 5 часов.м. — 23:00 с 30-минутной периодичностью обслуживания в течение всего дня.

С изменениями в обслуживании в июне 2021 года рейсы будут продлены с текущих периодов обслуживания на будние и субботу, с 6:00 до 20:00 до 5:00 — 22:00 и в воскресенье с 8:00 до 18:00 до 6:00 — 20:00 в связи с удалением маршрута 40 с 60-го. / Далия.

Этот маршрут работает в будние дни по субботнему расписанию, с завершением обслуживания после 12:30. В будние дни будут проводиться дополнительные рейсы ранним утром.Суббота и воскресенье работают в обычном режиме, но без обслуживания после 12:30

Этот маршрут работает в будние дни по дополненному субботнему расписанию с одним рейсом рано утром и рано утром будет продлен до Арвады. В расписании субботы и воскресенья нет изменений.

Этот маршрут не работает, пока действует Смена службы COVID-19.

Этот маршрут прекращен и не будет восстановлен после возобновления регулярного обслуживания.

Маршрут работает каждый будний день по субботнему расписанию. В расписании субботы и воскресенья нет изменений.

Восстановить обслуживание будних дней от станции Саутмур до Ольстера / Тафтса в Денверском техническом центре и на север до 56-го / Центрального парка, обслуживающего среднюю школу Нортфилда.

Маршрут работает каждый будний день по субботнему расписанию.В связи с пересмотром маршрута время поездки в субботу или воскресенье корректируется.

Этот маршрут к востоку от Арапахо на станции Village Centre прекращен и заменен продолжением маршрута 153.

Этот маршрут не работает, пока действует Смена службы COVID-19.

Маршрут работает ежечасно по будням и субботам с 8:00 до 18:00. Нет воскресной службы. Маршрутное отделение 72W в настоящее время не работает в рамках плана обслуживания COVID19.

Маршрут 73 сейчас работает по обычному буднему графику.

  • Будние дни: суббота по расписанию, без обслуживания после 12:30
  • Суббота: суббота по расписанию, без обслуживания после 12:30
  • Воскресенье: расписание по воскресеньям, без обслуживания после 12:30

Этот маршрут не работает, пока действует Смена службы COVID-19.

Этот маршрут не работает, пока действует Смена службы COVID-19.

Маршрут 83 теперь работает по пересмотренному расписанию. Route 83L теперь работает каждые 30 минут весь день в будние дни, а Route 83D работает каждые 30 минут только в периоды пиковой нагрузки в будние дни. Эти два маршрута согласованы для 15-минутной пиковой частоты к западу от Квебек-стрит до центра Денвера.

Этот маршрут не работает, пока действует Смена службы COVID-19.

С изменениями в обслуживании, внесенными в июнь 2021 года, время работы будет корректироваться по будням и субботам, чтобы решить проблемы с производительностью вовремя и отложить / восстановить. В воскресенье расписание не изменилось.

С изменениями в обслуживании в июне 2021 года, корректировкой времени работы в будние дни, субботы и воскресенья для решения вопросов своевременной производительности и проблем с остановкой / восстановлением

Этот маршрут работает каждые полчаса по будням и субботам с 5:30 до 21:00, а по воскресеньям ежечасно с 8:00 до 19:00.

Этот маршрут работает ежечасно по будням и субботам с 7:00 до 20:00, а по воскресеньям с 9:00 до 18:00.

Этот маршрут работает каждые полчаса в будние дни с 5:00 до 18:00, а затем ежечасно до 22:00. Нет субботней и воскресной службы.

Этот маршрут не работает, пока действует Смена службы COVID-19.

Маршрут работает каждый будний день по субботнему расписанию.В расписании субботы и воскресенья нет изменений.

Этот маршрут не работает, пока действует Смена службы COVID-19.

С изменениями в обслуживании, внесенными в июнь 2021 года, время работы будет корректироваться по будням, субботам и воскресеньям, чтобы решить проблемы с производительностью вовремя и с остановками / восстановлением.

Restore выберите поездки ранним утром и поздно вечером.

Этот маршрут работает ежечасно по будням и субботам с 7:30 до 20:00 и по воскресеньям с 7:30 до 18:00.

Этот маршрут не работает, пока действует Смена службы COVID-19.

Маршрут 120 / 120E / 120W

модифицированный

Реализуйте маршрут мощностью 120 Вт по будням с A.M. и П. Часы пик с 60-минутной периодичностью обслуживания между станцией US 36 • Broomfield и Wagon Road Park-n-Ride.

С изменениями в обслуживании, внесенными в июнь 2021 г., корректировка времени работы производится в будние дни для решения проблем с производительностью и своевременностью остановки / восстановления. В расписании субботы и воскресенья изменений нет.

Восстановить 15-минутную частоту часов пик к северу от вокзала Пеория через район Монбелло. Восстановите выбранные поездки ранним утром и поздно вечером.

Этот маршрут не работает, пока действует Смена службы COVID-19.

Этот маршрут не работает, пока действует Смена службы COVID-19.

Восстановите движение в 4:46 утра на юг по будням.

Этот маршрут не работает, пока действует Смена службы COVID-19.

Маршрут работает каждый будний день по субботнему расписанию.В расписании субботы и воскресенья нет изменений.

Маршрут работает каждый будний день по субботнему расписанию. В расписании субботы и воскресенья нет изменений.

Маршрут работает каждый будний день по субботнему расписанию. Прекращаются поездки на выбранный будний день и субботу. В воскресенье расписание не изменилось.

Restore выберите поездки ранним утром и поздно вечером.

Этот маршрут не работает, пока действует Смена службы COVID-19.

  • Будние дни: суббота по расписанию, с 12:30 до 4:30 без обслуживания
  • Суббота: субботнее расписание, без обслуживания с 12:30 до 4:30
  • Воскресенье: расписание по воскресеньям, без обслуживания с 12:30 до 4:30

Восстанавливает уровень обслуживания до полного рабочего дня, субботы и воскресенья.

Выполните предыдущий, утвержденный RTD советом график будних дней с 30-минутной периодичностью обслуживания.

Маршрут курсирует каждый будний день по субботнему расписанию, рабочие дни — с 6:00 до 21:00. Рабочие дни по субботам и воскресеньям с 7:00 до 21:00.

Внедрение услуг по будням и часам пик с 30-минутной периодичностью между Арапахо / 55-й школой и Средней школой Фэрвью, что позволит предоставлять услуги школам в Боулдере.

Расписание маршрута 206

можно посмотреть здесь.

Маршрут работает каждый будний день по субботнему расписанию. В расписании субботы и воскресенья нет изменений.

Этот маршрут не работает, пока действует Смена службы COVID-19.

Восстановить предыдущий график рабочих дней, утвержденный RTD Board, с периодичностью обслуживания 15 минут для A.М. и П.М. часы пик и 30-минутная частота в полдень.

Маршрут работает каждый будний день по субботнему расписанию. Никаких изменений в расписании субботы и воскресенья.

С изменениями в услугах, внесенными в июнь 2021 г., корректировка времени работы выполняется с учетом своевременности выполнения работ и времени перерыва в работе оператора.

С изменениями в услугах, внесенными в июне 2021 года, обслуживание будет увеличено с текущего часа до 30 минут в будние дни из-за проблем с пропускной способностью пассажиров.В расписании субботы и воскресенья изменений нет.

С изменениями в обслуживании в июне 2021 года частота обслуживания в будние дни увеличена с текущего часа до 30 минут из-за проблем с пропускной способностью клиентов. В расписании субботы и воскресенья изменений нет.

Маршрут работает каждый будний день и субботу по субботнему расписанию. Никаких изменений субботнего расписания; Нет воскресной службы.

Этот маршрут не работает, пока действует Смена службы COVID-19.

Маршрут работает каждый будний день по субботнему расписанию. В расписании субботы и воскресенья нет изменений.

Этот маршрут не работает, пока действует Смена службы COVID-19.

Восстановлен уровень обслуживания в будние дни с почасовой частотой на всем маршруте с 5:00 до 19:00.

С изменениями в обслуживании, внесенными в июнь 2021 года, время работы будет корректироваться по рабочим дням, чтобы решить проблемы с производительностью вовремя и с остановками / восстановлением.В расписании субботы и воскресенья изменений нет.

С изменениями в обслуживании в июне 2021 года частота обслуживания в будние дни увеличена с текущих 30 минут до 15 минут с 9:00 до 18:00 из-за проблем с пропускной способностью клиентов. В расписании субботы и воскресенья изменений нет.

Добавьте короткие очереди в будние дни до полудня. и П. в часы пик, между станцией Даунтаун Боулдер и Манхэттен-Серкл.

Выполните предыдущий график рабочих дней, утвержденный RTD Board.

Управляйте между станцией Даунтаун Боулдер и BVSD Tech. Учебный центр с 15-минутной периодичностью обслуживания по будням во время утра. и П. часы пик и 30-минутная частота в полдень.

Выполняйте рейсы между станцией Downtown Boulder и Lafayette Park-n-Ride с 30-минутной периодичностью обслуживания до утра. и П. часы пик и полдень с частотой 60 минут.

Работайте между станцией Downtown Boulder и центром отдыха Erie с 30-минутной периодичностью обслуживания во время A.М. и П.М. часы пик., без полуденного обслуживания.

Восстановление графика предыдущего дня недели с 10-минутной периодичностью обслуживания до утра. и П. часы пик и 15-минутная частота в полдень.

Этот маршрут не работает, пока действует Смена службы COVID-19.

Услуга

Free MallRide повышена до 3-минутной пиковой нагрузки в будние дни.Также услуга продлена до 12:00 полуночи каждый день.

Маршрут Anschutz Shuttle

модифицированный

Рейсовый автобус теперь курсирует с 7 утра до 5 вечера с понедельника по пятницу с 1 автобусом вместо 3. В это время мы не курсируем по выходным.

Окончательные изменения для региональных маршрутов

Этот маршрут не работает, пока действует Смена службы COVID-19.

Восстановить работу в будние дни с трех утра. и П. поездки в час пик. Эти рейсы будут временно обслуживать пассажиров, которые садятся на центральную станцию ​​и выходят из нее, а не по маршруту 99L, возвращающимся из приостановки в настоящее время.

Служба

будет работать в будние дни в 5 часов утра и будет работать с 15-минутной периодичностью в часы пик. В субботнем расписании изменений нет. Нет воскресной службы.

Этот маршрут не работает, пока действует Смена службы COVID-19.

Маршрут работает каждый будний день по субботнему расписанию. В расписании субботы и воскресенья нет изменений.

Маршрут работает каждый будний день по субботу каждый будний день и субботу. В воскресенье расписание не изменилось.

Route AT работает по полному рабочему графику.

Увеличьте частоту обслуживания в будние дни до 30 минут в A.M. и П. часы пик и сохраните частоту обслуживания 60 минут на полдень.

Восстановить работу в будние дни с трех утра. и П. поездки в час пик. Эти рейсы будут временно обслуживать пассажиров, которые садятся на центральную станцию ​​и выходят из нее, а не по маршруту 99L, возвращающимся из приостановки в настоящее время.

Восстановить работу в будние дни с тремя A.М. и П.М. поездки в час пик. Эти рейсы будут временно обслуживать пассажиров, которые садятся на центральную станцию ​​и выходят из нее, а не по маршруту 99L, возвращающимся из приостановки в настоящее время.

  • Будние дни: субботнее расписание, включая дополнительные утренние пиковые поездки с частотой 15 минут в будние дни. С 12:30 до 5:00 нет услуг
  • Суббота: суббота, обслуживание не работает с 12:30 до 5:00
  • Воскресенье: воскресное богослужение, с 12:30 до 05:00 служба не работает.м.

Этот маршрут не работает, пока действует Смена службы COVID-19.

Два рейса работают по вечерам в воскресенье.

Этот маршрут не работает, пока действует Смена службы COVID-19.

Этот маршрут работает каждый будний день с поездками в восточном направлении в 3 часа ночи и в западном направлении в 1 час ночи, а также в 3 часа дня в западном направлении.Нет субботней и воскресной службы.

Этот маршрут не работает, пока действует Смена службы COVID-19.

Этот маршрут не работает, пока действует Смена службы COVID-19.

Этот маршрут не работает, пока действует Смена службы COVID-19.

Этот маршрут не работает, пока действует Смена службы COVID-19.

Есть две поездки на юг в пик AM, между Hover / Boston и Union Station, и два рейса на север в PM пик между Union Station и 23rd / Main в будние дни. Никакой субботней или воскресной службы.

Этот маршрут не работает, пока действует Смена службы COVID-19.

Восстановить полуденное, буднее обслуживание на LD3 с 60-минутной периодичностью обслуживания в полдень между 8-м / Coffman Park-n-Ride и US • 36 Broomfield Park-n-Ride.

Этот маршрут не работает, пока действует Смена службы COVID-19.

Этот маршрут не работает, пока действует Смена службы COVID-19.

Восстановить обслуживание горнолыжного курорта Эльдора в течение лыжного сезона в будние дни, субботу и воскресенье / праздничные дни, а также ввести дополнительный будний день рано утром. туда и обратно между станцией Downtown Boulder и средней школой Nederland.

Восстановить обслуживание в будние дни с тремя рейсами в каждом направлении.

С изменениями в обслуживании, внесенными в июнь 2021 года, время работы будет корректироваться по рабочим дням, чтобы решить проблемы с производительностью вовремя и с остановками / восстановлением. В расписании субботы и воскресенья нет изменений.

Этот маршрут не работает, пока действует Смена службы COVID-19.Округ Боулдер и город Лион предлагают вместо этого программу ваучеров на такси; для получения дополнительной информации посетите сайт www.townoflyons.com.

Окончательные изменения в железнодорожном сообщении

Пиковая частота на линии B, которая обслуживает Денвер и Вестминстер, изменилась на каждый час с каждых 30 минут.

Линия C приостановлена.Клиенты могут сделать пересадку на / от линии E, чтобы добраться от DUS до SW.

Линия

D работает по дополненному воскресному расписанию в будние дни и воскресному расписанию по выходным.

Восстановить вечернее богослужение в пятницу и субботу до 2 часов ночи

Линия

F приостановлена. Воспользуйтесь линией E и перейдите на линии D / H, чтобы добраться до района Central Downtown.

Поезда линии G, обслуживающие Денвер, округ Адамс, Арвада и Уит-Ридж, ходят каждые 30 минут, а не каждые 15 минут.

Линия работает ежедневно по воскресеньям.

Маршрут курсирует ежедневно с дополнительным расписанием по воскресеньям.

Будут внесены незначительные корректировки времени работы для улучшения своевременности работы.

Этот маршрут курсирует каждый день по дополненному расписанию воскресенья, каждые 30 минут с 5:00 до 23:00.

Восстановить вечернее служение в пятницу и субботу до 2 часов ночи

Окончательные изменения для спецслужб

Чтобы получить доступ к самой последней информации о расписании, связанной с FlexRide, обратитесь к нашей FlexRidePage .

Маршруты с сокращением или улучшением могут повлиять на доступность услуги ADA Access-a-Ride.

28600P — FF2 ПОЛНОФУНКЦИОНАЛЬНЫЙ КЛАПАН

Полнофункциональный клапан: полнофункциональный прицепной клапан, который устраняет сломанные компоненты фундамента, вызванные сложением пружинных тормозов.

  • Встроенные быстродействующие клапаны рабочего тормоза и пружинного тормоза
  • Порт резервуара: 3/4 «NPT
  • Порт подачи: 3/8 «NPT
  • Отверстия для доставки: 3/8 «NPT
  • Порт управления: 1/4 «NPT
  • Давление трещины: 3.0 фунтов на квадратный дюйм
  • Встроенная защита от давления и функции предотвращения образования компаундов
  • Полнофункциональный клапан для прицепа
    Дополнительная информация
    Цвет Серебристый / Черный
    Размер коробки 12 дюймов X12 дюймов X7 дюймов
    Страна происхождения США
    Отделка матовый
    Материал Алюминий / АБС-пластик
    Кол-во в упаковке 1
    Подключения Порт резервуара: 3/4 «NPT Порт подачи: 3/8» NPT Отверстия нагнетания: 3/8 «NPT Порт управления: 1/4» NPT
    Обязанность НЕТ
    Поток C НЕТ
    Номинальный расход Давление трещины: 3.0 фунтов / кв. Дюйм
    Функция , который устраняет поломку компонентов фундамента, вызванную сложением пружинных тормозов.
    Диапазон рабочих температур НЕТ
    Эксплуатация Используется в некоторых приложениях для управления разблокировкой рабочих и пружинных тормозных камер.Предотвращает смешение пружинного тормоза.
    Мощность НЕТ
    Давление Давление трещины: 3,0 фунта / кв. Дюйм
    Линия продуктов Haldex
    Запасные части НЕТ
    Напряжение НЕТ

    ]]>

    ]]>

    ]]>

    ]]>

    ]]>

    ]]>

    Датчики

    | Бесплатный полнотекстовый | Суспензии наночастиц оксида железа на водной основе с электростатической или стерической стабилизацией хитозаном: изготовление, характеристика и биосовместимость

    1.Введение

    Магнитные феррожидкости (ФЖ) в последние годы привлекают все больший интерес для технологических и биомедицинских приложений. FF представляет собой стабильную суспензию коллоидных магнитных наночастиц (MNPs), диспергированных в жидкости-носителе [1]. Для биомедицинских приложений требуются магнитные MNPs в виде феррожидкостей на водной основе или феррогелей [2,3]. Список предлагаемых приложений быстро расширился, включая такие применения, как носители для доставки лекарств, контрастные вещества для магнитно-резонансной томографии, магнитные метки для магнитного биочувствительности, термическая абляция и гипертермия, термическая активация для высвобождения лекарств и другие [4,5,6, 7].Систематический сравнительный анализ морфофункционального ответа различных видов живых клеток на присутствие МНЧ все еще отсутствует, но лучшего понимания взаимодействия живых систем с МНЧ и поиска синергетических комбинаций «клеточный тип-МНЧ» было бы полезно [8] . Прогресс в производстве биокомпозитов особенно важен для области магнитного биодатчика, потому что дальнейшее развитие компактных аналитических устройств, в которых магнитный преобразователь преобразует изменение магнитного поля в изменение частоты, тока, напряжения, требует тщательно охарактеризованных биологических образцов с хорошо известное количество и распределение MNPs [9,10].Необходимым условием биомедицинского применения суспензии МНЧ является поддержание ее коллоидной стабильности в нейтральном диапазоне pH и высокой ионной силы, присущей биологическим тканям. Существуют две основные возможности получения стабильных коллоидных суспензий дезагрегированных наночастиц: электростатическая и стерическая стабилизация [9]. Повышение ионной силы биологической среды снижает эффективность электростатической стабилизации суспензий. В ряде недавних исследований природный полимер хитозан обсуждался как эффективный электростерический стабилизатор [11,12].Хитозан — это полисахарид, полученный путем химической модификации природного полимера — хитина. Биосовместимость, биоразлагаемость, иммуностимулирующие свойства, высокая химическая реактивность хитозана обеспечивают его широкое использование в различных биомедицинских и биоинженерных приложениях [13]. Хитозан представляет собой полиэлектролит, типичная молекулярная структура которого показана на рисунке 1. Макромолекулярный каркас основан на единицах β-глюкозы с гидроксильным остатком во 2-м положении, замещенным либо ацетамидом, либо аминогруппой.В природном предшественнике хитозана (хитине) все мономерные звенья содержат ацетамидные фрагменты, которые частично или полностью удаляются во время химической модификации хитина, известной как деацетилирование. Степень оставшихся ацетилированных звеньев (DA,%) в молекулярной структуре является характерной чертой химического состава хитозана, которая определяет его взаимодействие с водой и растворенными веществами. Аминные группы в деацетилированных мономерных звеньях могут быть протонированы и, таким образом, они могут нести положительный электрический заряд, что делает хитозан поликатионом.Поликатионная природа хитозана способствует его взаимодействию с полианионными биомакромолекулами, такими как белки и нуклеиновые кислоты, что приводит к образованию полиэлекролитных комплексов. Образование и стабильность полиэлектролитных комплексов хитозана зависит от DA, плотности заряда, молекулярной массы, качества растворителя, ионной силы, pH и температуры [14]. Образование комплексов хитозан-белок происходит, если оба аналога ионизированы. В литературе описаны полиэлектролитные комплексы с коллагеном, желатином и молочным альбумином [15].Хитозан широко тестируется как эффективный биосовместимый стабилизатор в суспензиях наночастиц различного химического происхождения, предназначенных для биомедицинских применений [16]. Присутствие как гидроксильных, так и аминовых остатков в мономерной единице хитозана усиливает специфическое взаимодействие макромолекул хитозана с поверхностью МНЧ оксидов металлов и обеспечивает стабильность суспензий при низкой концентрации полимера [17,18]. Однако большинство опубликованных данных о стабилизации суспензий МНЧ хитозаном относится к кислым растворам, в которых хитозан протонирован и действует как поликатион.Между тем, необходимым условием биомедицинского применения суспензии МНЧ является поддержание ее коллоидной стабильности в нейтральном диапазоне pH и высокой ионной силы, присущих биологическим тканям. В нейтральном диапазоне pH, поскольку его мономерные звенья депротонированы, хитозан неэффективен в качестве стабилизатора. В наших недавних работах [19,20] мы представили способ преодоления этого ограничения и обеспечения стабилизации МНЧ оксида железа хитозаном в фосфатном буферном солевом растворе (PBS, pH = 6.3), который широко используется в биомедицинских и биоинженерных исследованиях. Этот подход основан на хорошо известной особенности коллоидных суспензий, заключающейся в том, что их стабильность зависит не только от состава, но и от предшествующей истории их приготовления. Сначала были приготовлены суспензии МНЧ оксида железа, электростатически стабилизированные цитратом натрия. Цитрат натрия является очень хорошим стабилизатором МНЧ оксида железа в воде из-за адсорбции цитрат-анионов на поверхности МНЧ. Ранее было показано [21,22], что при использовании цитрата в качестве электростатического стабилизатора можно получить суспензию индивидуальных МНЧ оксида железа.На следующем этапе электростатически стабилизированная суспензия смешивалась с кислым раствором хитозана. Поскольку хитозан протонировал и нес положительный заряд, он электростатически взаимодействовал с отрицательно заряженными МНЧ и адсорбировался на их поверхности. Затем добавляли PBS, чтобы депротонировать макромолекулы хитозана и заставить их схлопнуться вокруг MNP. Таким образом была достигнута стерическая стабилизация МНЧ, устойчивых к высокой ионной силе. Для сравнения была приготовлена ​​электростатически стабилизированная стабильная суспензия наночастиц оксида железа на водной основе из той же партии с использованием цитрата натрия.Мы представляем наше исследование по изготовлению, тщательной характеристике и биосовместимости суспензий МНЧ оксида железа, электростатически или стерически стабилизированных хитозаном, испытанных на мононуклеарных лейкоцитах крови человека.

    2. Экспериментальная

    2.1. МНЧ оксида железа
    МНЧ оксида железа были синтезированы методом лазерного испарения мишени (ЛТР) — метода мощного физического диспергирования оксида железа в газовой фазе с помощью лазерного излучения. Детали экспериментальной процедуры приведены в [22,23].ЛТР выполняли на лабораторной установке с волоконным иттербиевым (Yb) лазером с длиной волны 1,07 мкм. Лазер работал в импульсном режиме с частотой 4,85 кГц и длительностью 60 мкс. Средняя выходная мощность облучения составляла 212 Вт. Таблетка мишени диаметром 65 мм, высотой 20 мм была спрессована из промышленного магнетита (Fe 3 O 4 ) (Alfa Aesar, Ward Hill, MA, USA) порошка ( удельная поверхность 6,9 м 2 / г). Мишень испарялась в смеси N 2 и O 2 в объемном соотношении 0.79: 0.21. Рентгенографические исследования (XRD) проводили на дифрактометре DISCOVER D8 (Bruker, Billerica, MA, USA) с использованием излучения Cu-K α (λ = 1,5418 Å), графитового монохроматора и сцинтилляционного прибора. детектор. МНЧ устанавливались на кремниевую пластину с нулевым фоном, помещенную в держатель образца. Использовались фиксированная расходимость и антирассеивающая щель. Количественный анализ проводился с использованием программы TOPAS-3 с полнопрофильным уточнением по Ритвельду [24]. Просвечивающая электронная микроскопия (ПЭМ) была выполнена для оценки морфологии MNP (JEM2100, JEOL, Токио, Япония).Удельную поверхность МНЧ (S sp ) измеряли с помощью низкотемпературной адсорбции азота (TriStar3000, Micromeritics, Norcross, GA, США). Магнитные измерения петель гистерезиса (M (H)) и термомагнитных кривых (ZFC-FC, подробнее см. [23]) проводились с помощью СКВИД-магнитометра MPMSXL-7 (Quantum Design, Сан-Диего, Калифорния, США) в диапазон поля ± 70 Э. Кривые термомагнитного охлаждения в нулевом поле / охлаждения в поле (ZFC-FC) были получены для поля 100 Э (диапазон температур 5–300 К) для воздушно-сухих МНЧ и МНЧ, высушенных из феррожидкостей.Феррожидкости и биологические образцы были высушены перед измерением, а вклады полимерных контейнеров были тщательно вычтены.
    2.2. Приготовление феррожидкости и суспензии МНЧ, инкапсулированных хитозаном

    Перед приготовлением суспензий МНЧ оксида железа стерилизовали сухим жаром на устройстве Binder FD53 (Binder GmbH, Туттлинген, Германия) при 180 ° C в течение 1 часа. Феррожидкость на основе МНЧ оксида железа была приготовлена ​​на дистиллированной воде с добавлением электростатического стабилизатора цитрата натрия в концентрации 5 мМ.Суспензию в исходной концентрации 6% (по массе) обрабатывали ультразвуком в течение 30 мин с использованием процессора CPX-750 (Cole-Parmer Instruments Corp., Вернон-Хиллз, Иллинойс, США), работающего при выходной мощности 300 Вт. После ультразвуковой обработки суспензию центрифугировали при 10000 об / мин в течение 5 мин на центрифуге Z383 (Hermle, Hermle-Labortechnik, Wehingen, Германия), оснащенной ротором 218. Такая приготовленная суспензия (электростатически стабилизированная феррожидкость на водной основе) получила обозначение FF1.

    Инкапсуляцию МНЧ хитозаном проводили с использованием коммерческого хитозана СК-1000 (AlexinChem, Тула, Россия) с MW = 4.4 × 105 и DA = 30%. Хитозан растворяли в 0,2 М HCl, чтобы приготовить 2% маточный раствор; раствор выдерживали 48 ч при 25 ° C для уравновешивания. Затем исходный раствор хитозана смешивали с феррожидкостью на основе МНЧ в объемном соотношении 1: 3 и интенсивно перемешивали. Затем доводили pH суспензии, добавляя по каплям раствор PBS (в соотношении объема 1: 2 к суспензии) при интенсивном перемешивании. Такая приготовленная суспензия (одновременно электростатически и стерически стабилизированная феррожидкость на водной основе) получила название FF2.

    Гидродинамические диаметры МНЧ и их агрегатов измеряли с помощью динамического светорассеяния (анализатор размера частиц Zeta Plus, Brookhaven Brookhaven Instruments Corp., Холтвилл, Нью-Йорк, США). Электрокинетические дзета-потенциалы феррожидкостей измеряли электрофоретическим рассеянием света с помощью того же прибора.

    2.3. Клеточная культура

    Изучение реальных биологических образцов (клеток, одноклеточных организмов или тканей) имеет определенные ограничения тестирования при использовании физических методов.Эти ограничения вызваны большим разнообразием сложных процессов, существующих в живых системах, и большим разнообразием морфологии каждого конкретного образца. Чтобы сделать биофизические исследования с МНЧ более эффективными, необходимо выбрать модельные системы с хорошо известными или наиболее стабильными / типичными свойствами. Одной из таких модельных систем являются мононуклеарные лейкоциты крови человека (HBML). ЛГМЛ здорового добровольца (Разрешение № 4 от 23.10.2013 г. Локального этического комитета Инновационного парка Балтийского федерального университета им. Иммануила Канта, Российская Федерация) собирали по градиенту венозной крови (ρ * = 1.077) Центрифугирование Ficoll-Paque Premium (Sigma-Aldrich, Сент-Луис, Миссури, США) при 1500 об / мин в течение 10 мин. HBML дважды промывали фосфатно-солевым буфером (рН 7,2) и ресуспендировали в полной культуральной среде, состоящей из 90% RPMI-1640 (Sigma-Aldrich, Сент-Луис, Миссури, США), 10% инактивированного (в течение 30 мин при 56 ° C). ° C) фетальной бычьей сыворотки (Sigma) и 0,3 мг / млLL-глутамина (Sigma). Жизнеспособность живых клеток, неокрашенных 0,4% трипановым синим, составляла 90–95%.

    Суспензию HBML добавляли в 24-луночные планшеты (Orange Scientific, Braine-l’Alleud, Бельгия) с конечной концентрацией 2 × 10 6 жизнеспособных клеток на 1 мл питательной среды, содержащей RPMI-1640 (Sigma- Олдрича, св.Луис, Миссури, США), 10% инактивированной (в течение 30 мин при 56 ° C) фетальной бычьей сыворотки (Sigma-Aldrich, Сент-Луис, Миссури, США), 50 мг / л гентамицина (Invitrogen, Глазго, Великобритания) и свежее добавляли стерильный раствор L-глутамина до конечной концентрации 0,3 мг / мл (Sigma-Aldrich, Сент-Луис, Миссури, США). Максимально переносимая доза оксида железа (МПД) была рассчитана на основе ионов железа: одна МПД железа в воде была равна 0,3 мг / л. Затем к культуре клеток немедленно добавляли суспензии магнитных наночастиц FF1 или FF2 в конечных концентрациях 2.3, 10, 100 или 1000 МПД. Обе суспензии пипетировали по пять раз. Контрольная клеточная культура (0 МПД) не содержала ни МНЧ, ни раствора хитозана. Культуры клеток инкубировали в течение 24 ч в атмосфере 95% воздуха и 5% CO 2 при 37 ° C. Предварительное исследование не показало признаков токсического действия хитозана на культуру HBML. После инкубации суспензию клеток центрифугировали при 1300 об / мин в течение 10 мин. Полученный осадок клеток использовали для измерения гибели клеток, презентации мембранного антигена, просвечивающей электронной микроскопии (ПЭМ) и рентгенофлуоресцентного анализа с дисперсией по энергии.Супернатанты клеточных культур использовали для измерения концентраций цитокинов.

    2.4. Измерение гибели клеток

    Расчеты концентрации и жизнеспособности клеток проводили с помощью автоматического счетчика клеток Countess TM (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA) с использованием 0,4% раствора трипанового синего (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA). С этой целью тестируемые клетки переносили в объеме 12,5 мкл на иммунологический планшет и добавляли 12,5 мкл красителя. Жизнеспособные клетки не были окрашены на 0.4% трипановый синий.

    2,5. Цитокиновый профиль в клеточной культуре

    Цитокины представляют собой небольшие молекулы пептидной информации. Цитокины имеют молекулярную массу не более 30 кДа. Их основные продуценты — лимфоциты. Цитокины регулируют межклеточные и межсистемные взаимодействия, определяют выживаемость клеток, стимуляцию или подавление их роста, дифференцировку, функциональную активность и апоптоз, а также обеспечивают совместимость действия иммунной, эндокринной и нервной систем в нормальных условиях и в ответ на патологические эффекты. .Цитокины активны в очень низких концентрациях. Их биологическое действие на клетки осуществляется через взаимодействие со специфическим рецептором, расположенным на цитоплазматической мембране клетки. Образование и секреция цитокинов происходит кратковременно и строго регулируется. В настоящей работе для измерения спонтанной секреции интерлейкинов (ИЛ-2, ИЛ-4, ИЛ-6, ИЛ-8 и ИЛ-10), гранулоцитарно-макрофагального колониестимулирующего фактора (GM-CSF), интерферон- гамма (IFN γ ) и фактор некроза опухоли альфа (TNF α ) в супернатантах (внутриклеточные жидкости), проводили проточную цитометрию (FC).Процедуру FC проводили в соответствии с инструкциями производителя системы анализа цитокинов (Bio-Plex Pro Human Cytokine 8-Plex Panel, Bio-Rad, Hercules, CA, USA) с использованием автоматизированной системы обработки (Bio-Plex Protein Assay System, Bio-Rad, США). Концентрация каждого цитокина выражалась в пг / мл.

    2.6. Обнаружение клеточного иммунофенотипа

    Профиль клеточного антигена анализировали с использованием метода, основанного на взаимодействии между специфическими моноклональными антителами (mAb; см. Ниже) и детерминантами кластеризации на поверхности клетки в соответствии с инструкциями производителя.После культивирования клетки промывали фосфатно-солевым буфером (рН 7,2) и одноклеточную суспензию в объеме 10 мкл смешивали 1: 1 с одним стандартным mAb против CD45, CD3, CD4, CD8, CD25 ( Abcam, Кембридж, Великобритания), CD28, CD45RO, CD45RA, CD71 или CD95 (e-Bioscience, Сан-Диего, Калифорния, США). MAb метили флуоресцеинизотиоцианатом (FITC), аллофикоцианином (АРС), фикоэритрином (PE) или белком перидинин-хлорофилла (PerCP). После 30 мин инкубации с меченым mAb клетки анализировали с использованием проточного цитометра MACS Quant (Miltenyi Biotec, Teterow, Германия).Измерения параметров оранжевой / зеленой / красной флуоресценции проводились у ворот анализируемых клеток, и подсчитывалось количество клеток, представляющих исследуемые антигенные детерминанты. Результаты цитометрии исследовали с использованием программного обеспечения KALUZA Analysis Software (Beckman Coulter, Индианаполис, Индиана, США).

    2.7. Электрохимические испытания
    Концентрации МНЧ оксида железа в биологических жидкостях были подтверждены с помощью стрипп-вольтамперометрии (SV) ионов железа [25]. Рассчитанные максимально переносимые дозы в среде сравнивались с оценками SVas, описанными в [12].
    2,8. Просвечивающая электронная микроскопия клеток

    Протокол визуализации клеток под ТЕМ был следующим. Культуру клеток промывали PBS при 37 ° C и предварительно фиксировали в 10 мл 0,5% глутарового альдегида в буфере Соренсона при комнатной температуре в течение 15 мин. После предварительной фиксации клетки декантировали в пробирку Falcon объемом 15 мл и центрифугировали при 1500 об / мин в течение 10 мин. На следующем этапе супернатант удаляли и к осадку добавляли свежеприготовленный 2% -ный глутаральдегид в буфере Соренсона. После 2-часовой фиксации гранулы центрифугировали с массой 2000 г для дальнейшего уплотнения.Образцы фиксировали в 1% -ном тетроксиде осмия в буфере Соренсона, обезвоживали, заливали в смолу Epon Polarbed и нарезали в виде ультратонких срезов 70 нм для исследований ПЭМ (EM208S, Philips, Moosseedorf, Германия).

    Для сравнения распределения МНЧ оксида железа в различных клетках была приготовлена ​​первичная культура постнатальных мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток (AMMSC) из ткани судьбы человека после обработки липоаспиратов (Разрешение № 4 от 23.10.2013 г. Инновационного парка Балтийского федерального университета им. Иммануила Канта).Культивирование AMMSC и ТЕМ получали, как описано в нашей предыдущей работе [12].
    2.9. Статистический анализ

    Результаты были проанализированы с использованием программного обеспечения STATISTICA для Windows 10.0. Были рассчитаны следующие параметры распределения: медиана (Me), 25% квартиль (Q1) и 75% квартиль (Q3). Был проведен U-критерий Манна-Уитни (P U ), и различия считались значимыми при p <0,05. Связь между изучаемыми параметрами была установлена ​​с помощью регрессионного анализа.Коэффициенты (r) сохранялись на уровне значимости выше 95%.

    2.10. Энергодисперсионный рентгенофлуоресцентный анализ клеток
    Рентгенофлуоресцентная спектрометрия полного отражения (TXRF) [26] — это относительно новый метод элементного анализа, который может применяться к образцам в виде тонкого слоя, включающего высушенные капли гомогенизированных суспензий мелкие частицы или тонкий слой целых клеток. Хотя метод TXRF без камеры с регулируемым давлением оказался ограниченным для количественного определения элементов с низким Z (таких как углерод, азот и кислород) [27,28], он может успешно применяться для определения элементов с характеристическими линиями более высоких энергий. .Все измерения TXRF проводились на спектрометре Nanohunter (Rigaku, Tokyo, Japan). Для каждого эксперимента использовались одни и те же параметры: время экспозиции 500 с, угол 0,05 °, рентгеновская трубка с анодом из Cu в качестве источника первичного пучка. Образцы сушили при 50 ° C в сухой камере Rigaku Ultra при нормальном давлении. При всех расчетах концентрации железа мы пренебрегли матричными эффектами в предположении геометрии тонкопленочного образца.

    3. Результаты и обсуждение

    На рис. 2а показана типичная микрофотография МНЧ оксида железа, полученная методом ПЭМ, синтезированных методом ЛТР.МНЧ были неагломерированными, а их форма была близка к сферической. Лишь немногие из частиц оказались гексагональными или имели гексагональные углы. Взвешенное распределение частиц по размерам (PSD) (вставка на рис. 2а) было логнормальным со средним значением 26,8 нм и дисперсией 0,362. Удельная поверхность МНЧ составила 78 м 2 / г. Средний диаметр поверхности MNP, рассчитанный из этого значения с использованием уравнения d s = 6 / (ρ × S sp ) (ρ = 4,6 г / см, 3 — плотность оксида железа), составил 16.7 нм. Это хорошо согласуется со значением d s = 15,9 нм, полученным с использованием PSD с указанными выше параметрами. График XRD MNP оксида железа приведен на рисунке 2b. Кристаллическая структура МНЧ соответствует обратной решетке шпинели с пространственной группой Fd3m. Период решетки (а) был найден a = 0,8358 нм, что было больше, чем у оксида железа (γ-Fe 2 O 3 , a = 0,8346 нм), но меньше, чем у магнетита (Fe 3 O 4 , a = 0,8396 нм) [29].На основе зависимости между периодом решетки шпинельной ячейки и эффективным состоянием окисления Fe был определен состав МНЧ. Он содержал 76% γ-Fe 2 O 3 и 24% Fe 3 O 4 .

    Средний гидродинамический диаметр агрегатов в суспензиях контролировали с помощью динамического светорассеяния (Brookhaven Zeta Plus). Концентрация феррожидкости после центрифугирования составляла 5,0% МНЧ по массе для суспензии FF1. Средний гидродинамический диаметр МНЧ в суспензии составил 56 нм.

    Магнитные измерения подтвердили, что МНЧ были близки к суперпарамагнитному состоянию с низкой коэрцитивной силой (H c ) при 20 ° C (Рисунок 3a). Следуя H c, были получены значения для воздушно-высушенных МНЧ — 30 Э, МНЧ FF1 — 5 Э и МНЧ FF2 — 5 Э. Примечательно, что насыщение не было полностью достигнуто при максимально доступном поле 70 кЭ. Значение намагниченности насыщения (M s ) около 70 emu / g для MNPs хорошо согласуется с MNP размером около 20 нм маггемита [22,30].Снижение коэрцитивной силы примерно до 5 Э и уменьшение Ms для МНЧ FF1 и FF2 соответствовало процессу разделения во время изготовления суспензии и факту уменьшения массы магнитного материала на единицу массы из-за включения цитрата натрия и хитозана. Хотя анализ перехода между поведением СЗМ и заблокированным состоянием не был предметом настоящего исследования, чтобы очень грубо продемонстрировать особенности магнитных взаимодействий, мы приводим результаты измерений ZFC-FC для воздушно-сухих МНЧ и МНЧ LTE, полученных сушкой. феррожидкость FF1.Для используемых концентраций предполагается, что МНЧ слабо взаимодействуют, но ансамбль может содержать крупные частицы, которые вносят большой вклад в коэрцитивную силу и сложную форму термомагнитных кривых ZFC – FC (рис. 3d). Тем не менее, эти кривые дополнительно подтверждают суперпарамагнитное поведение МНЧ в исследуемом ансамбле. Таким образом, можно увидеть типичную для суперпарамагнетиков температуру блокировки около 150 К. Интересно, что параметры термомагнитных кривых ZFC – FC для МНЧ, полученных из высушенной водной суспензии FF1, очень близки к параметрам для воздушно-сухих МНЧ.Последнее объясняется малым исходным размером МНЧ, т. Е. Их разделение при приготовлении магнитных суспензий не оказывает существенного влияния на параметры распределения по размерам. Суспензии FF2 МНЧ оксида железа для исследований биосовместимости готовили в несколько этапов, схематически показанных на рисунке 4а. Сначала была приготовлена ​​водная суспензия индивидуальных МНЧ, электростатически стабилизированных адсорбированным поверхностным слоем цитрат-анионов. Его дзета-потенциал составлял –48 мВ, что обеспечивало эффективное взаимное отталкивание отрицательно заряженных МНЧ и предотвращало их агрегацию.Следующим шагом была обработка МНЧ кислотным раствором хитозана, в результате которой поликатионы хитозана адсорбировались на отрицательно заряженной поверхности МНЧ. Однако адсорбция хитозана не была чисто электростатической, поскольку она приводила к инверсии поверхностного заряда МНЧ. Их дзета-потенциал после стадии адсорбции составлял +52 мВ, что очень близко к дзета-потенциалу раствора хитозана (+50 мВ). Это означает, что суммарный положительный заряд адсорбированного хитозана превышает отрицательный заряд, расположенный на поверхности МНЧ.Скорее всего, связывание макромолекул хитозана с поверхностью происходит из-за молекулярных взаимодействий из-за аминовых и гидроксильных групп в мономерных единицах (см. Рисунок 1). Заключительным этапом подготовки было доведение pH до нейтрального уровня с помощью PBS, что вызвало деионизацию хитозана и сокращение его спиралей вокруг MNP. Детали и физико-химические основы такой инкапсуляции МНЧ оксида железа хитозаном были приведены в наших предыдущих исследованиях [19,20]. На рисунке 4b показана PSD (полученная методом DLS) частиц в суспензии МНЧ оксида железа, эккапсулированных хитозаном в сравнение с PSD в суспензии предшественников МНЧ, стабилизированных цитратом, и с PSD в растворе хитозана.Видно, что в случае PSD суспензии FF1 медианное значение диаметра составило около 50 нм. Это выше, чем средневзвешенное значение диаметра, определенное при графическом анализе изображений ПЭМ (около 30 нм). Однако разница невелика и, вероятно, объясняется толщиной сольватирующих оболочек и толщиной двойного электрического слоя на поверхности частиц, которые обеспечивают стабильность их суспензии. Средний диаметр PSD для раствора хитозана и для суспензии инкапсулированных MNP намного больше.В обоих случаях это около 300 нм. Полученное значение для раствора хитозана намного выше ожидаемого, исходя из молекулярных параметров хитозана. Характерным размером полимерной цепи в растворе является среднеквадратичное расстояние от конца до конца для макромолекулярного клубка, которое можно оценить. используя следующее уравнение [31]: где N — количество статистических сегментов в макромолекуле, а A — длина сегмента. Длина сегмента для хитозана варьируется в разных отчетах [32], вместо этого значение 10 нм может быть принято в качестве справедливой оценки.Это соответствует ок. 20 мономерных звеньев в сегменте. Среднее общее количество мономерных единиц в хитозане, используемое в исследовании, можно легко оценить как отношение молекулярной массы хитозана к формуле молекулярной массы единицы (148). Это дает ок. 3000 единиц в хитозане и, следовательно, ок. 150 сегментов в макромолекуле. Расчет сквозного расстояния на основе этих значений дает прибл. 150 нм, что в два раза меньше среднего диаметра PSD для раствора хитозана. Это означает, что раствор хитозана содержит не отдельные макромолекулы, а их агрегаты.Этот результат согласуется с опубликованными отчетами об ассоциации и агрегации в растворе хитозана [33,34]. По их мнению, ассоциация неизбежна и возникает даже в отфильтрованных разбавленных растворах, выдерживаемых некоторое время в изотермических условиях. Мы получили среднее значение диаметра 80 нм для кислых растворов хитозана с концентрацией 0,002 г / л, отфильтрованных через фильтр Wattman 0,1 мкм. Между тем, ассоциаты были восстановлены после трехдневного периода хранения раствора при 25 ° C.Из рисунка 4 очевидно, что диаметр инкапсулированных МНЧ такой же, как диаметр агрегатов хитозана. Это означает, что инкапсуляция индивидуальных МНЧ хитозаном может быть достигнута только в очень разбавленном растворе; но в растворах конечной концентрации процесс взаимодействия хитозана с МНЧ скорее заканчивается встраиванием МНЧ в ассоциаты (агрегаты) макромолекул хитозана. На рис. 5а показано влияние pH на дзета-потенциал и средний гидродинамический диаметр агрегатов в суспензии инкапсулированных МНЧ.Дзета-потенциал почти постоянен в диапазоне pH до pH = 4 и постепенно уменьшается с дальнейшим увеличением pH. Он достигает значений ниже +20 мВ в физиологически значимом диапазоне pH = 6,5–7,5. Уменьшение дзета-потенциала происходит за счет депротонирования аминогрупп в макромолекуле хитозана по реакции:

    Chit – NH 3 + Cl + OH => Chit – NH 2 + H 2 O + Cl

    По мере уменьшения положительного электрического заряда макромолекул хитозана электростатический фактор устойчивости суспензии уменьшается.В принципе, это неблагоприятно для стабильности, как известно из теоретического рассмотрения с точки зрения подхода Дерягина-Ландау-Вервея-Овербека (DLVO), что дзета-потенциал должен поддерживать значение выше 30 мВ независимо от знака [ 35] для обеспечения устойчивости подвески к агрегации за счет притягивающих сил Ван-дер-Ваальса между MNP. Между тем суспензия инкапсулированных МНЧ сохраняет свою стабильность, а средний гидродинамический диаметр ассоциатов хитозана существенно не увеличивается.Этот эффект полностью обусловлен стерическим отталкиванием агрегатов хитозана с внедренными МНЧ оксида железа. Это отталкивание происходит из-за осмотических сил, возникающих при наложении полимерных оболочек агрегатов. В этом случае локальная концентрация сегментов увеличивается в области перекрытия, что вызывает поступающий осмотический поток воды, который предотвращает взаимное проникновение агрегатов и разделяет их. На рис. 5b показано влияние концентрации соли (NaCl) на дзета-потенциал и средний гидродинамический диаметр агрегатов в суспензии инкапсулированных МНЧ при pH = 6.5. Дзета-потенциал суспензии существенно снижается, если добавляется соль из-за сжатия двойного электрического слоя на поверхности агрегатов хитозана. При концентрации NaCl 0,4 М дзета-потенциал обращается в ноль. Это означает, что электростатический фактор стабильности суспензии эффективно устраняется ионной силой соли. Между тем, уровень агрегации, указываемый средним гидродинамическим диаметром ассоциатов хитозана, практически не меняется. Безусловно, это результат эффективной стерической стабилизации инкапсулированных МНЧ в суспензии FF2.В целом зависимости, представленные на рисунке 5, показывают, что инкапсуляция МНЧ оксида железа LTE хитозаном делает их устойчивыми к неблагоприятным факторам для коллоидной стабильности, таким как pH и высокая ионная сила, которые обычно присутствуют в физиологических условиях. Это делает суспензии МНЧ, инкапсулированные хитозаном, перспективными кандидатами для тестирования биосовместимости. Поэтому в качестве следующего шага были предусмотрены биологические эксперименты для сравнительного анализа биосовместимости суспензий FF1 и FF2 для случая мононуклеарных лейкоцитов крови человека.Согласно экспериментальным данным, интактные HBMLs экспрессируют широкий спектр мембранных маркеров в 24-часовой культуре in vitro. 99% клеток экспрессируют антигены Т-лимфоцитов CD45CD3, преимущественно (55%) наивные (неактивированные антигеном) CD45RA + Т-хелперы / индукторы CD4 + (67%) [36,37]. Активация мембраны и костимуляторные молекулы CD25, CD28, CD71 и CD95 присутствуют для клеток CD45CD3 + в 9%; 79%; 2,5% и 15% случаев соответственно. Изоформа CD45RO трансмембранного антигена, экспрессируемого in vitro на активированных Т-лимфоцитах и ​​/ или клетках Т-памяти, была обнаружена на 35% для клеток CD45CD3 + [37,38] (Таблица 1).24-часовая культура жизнеспособных HBMLs (медиана живых клеток 93,5%, таблица 2) спонтанно секретировала в межклеточную жидкость спектр иммуномодулирующих цитокинов и хемокинов с провоспалительным действием (IL-2, IL-8, TNFα, GM- CSF, IFNγ) и противовоспалительная активность (IL-4, IL-10) [39], способная модулировать выживание in vitro, пролиферацию, дифференцировку и созревание HBML через аутокринные / паракринные пути передачи сигналов. Следует особо подчеркнуть, что обе протестированные суспензии (без хитозана и с хитозаном) не вызывали гибели клеток в 24-часовой культуре in vitro (таблица 2), что предполагает нетоксичное, но раздражающее действие массивных доз МНЧ на секреторную функцию. HBML.В диапазоне максимально переносимых доз (МПД) 2,3–1000 суспензии FF1 (без хитозана) вызывали дозозависимое статистически значимое увеличение (в 2–47 раз по сравнению с исходным уровнем) секреции всех исследованных цитокинов (таблица 3). Примечательно, что концентрация IL-10 в межклеточной жидкости увеличивалась в экспоненциальной зависимости от дозы MNPs без хитозана (суспензия FF1) (рис. 5). Наиболее показательная разница в динамике изменения суспензий МНЧ с хитозаном и без него в диапазоне 10–1000 МПД для случая ИЛ-10.С хитозаном снижение секреции цитокинов в этом диапазоне низких доз очень выражено. В то же время относительное увеличение секреторной активности HBML в диапазоне 100–1000 МПД замедлялось с появлением зависимости от плато классической S-образной кривой зависимости реакции от дозы (Рисунок 5 и Таблица 3). МНЧ оксида железа LTE в хитозановой матрице изменяли тип кривой доза-ответ для секреции биологических молекул культурой HBML. На рис. 5 представлена ​​сводка этих результатов: кривая 1 (соответствующая суспензии FF1 без хитозана) хорошо аппроксимируется показателем y = 2.13e 1,06x , R 2 = 0,96; кривая 2 (соответствующая суспензии FF2 с хитозаном) хорошо описывалась полиномиальной зависимостью 3 степени с высокой степенью аппроксимации: y = 6.5x 3 + 51.9x 2 + 124.1x — 73, R 2 = 0,99, а кривая 3, показывающая корреляцию между рассчитанной зависимостью концентрации железа в МПД и в частях на миллион (ppm), хорошо аппроксимируется показателем y = 0,0119e 1,9785x , R 2 = 0,99, где значение 2 .3 МПД МНЧ с хитозаном статистически увеличивали концентрации всех протестированных цитокинов по сравнению с обоими уровнями — исходным уровнем и соответствующей дозой МНЧ без хитозана (Таблица 3). Напротив, в диапазоне от 10 до 100 МПД МНЧ с хитозаном нивелировало стимулирующее действие МНЧ на секреторную активность HBML. При 100 МПД снижение концентраций цитокинов ИЛ-2, ИЛ-4, ИЛ-6, ИЛ-10 достигло исходного уровня. При 1000 МПД нарушение секреции, вызванное МНЧ плюс хитозан, было заменено превышением (таблица 3), которое только в двух случаях (IL-8, GM-CSF) значительно превышало соответствующие значения, достигнутые с суспензией FF1 без хитозана.Полученные данные позволили сформулировать рабочую гипотезу:
    (1)

    о неравномерном распределении различных доз МНЧ в матрице хитозана;

    (2)

    преимущественно замедляющее действие хитозана на раздражающее действие высоких (10–1000 МПД) доз магнитных наночастиц маггемита.

    При этом 100 МПД оказались критической (опорной) точкой для исследования. Для проверки гипотезы были проведены дополнительные эксперименты с культурой клеток (ПЭМ биологических образцов, энергодисперсионный рентгенофлуоресцентный анализ).Рассчитанные МПД МНЧ в среде соответствовали оценкам методом инверсионной вольтамперометрии. Таким образом, электрохимический анализ супернатантов, обеспечивающий полное растворение МНЧ при пробоподготовке, показал результат трех измерений концентрации железа 33 ± 11 мг / кг при 100 МПД и 2,9 ± 0,9 мг / кг при 10 МПД. Следует напомнить, что максимально переносимая доза (МПД) составляет 0,3 мг / л ионов железа в водном растворе.

    Распределение энергии Рентгенофлуоресцентный анализ клеток и супернатантов показал (Таблица 4) неравномерное распределение MNP во фракции клеток и межклеточной жидкости (супернатантах) при низкоскоростном центрифугировании HBML.Согласно Таблице 4, измеренная концентрация железа в суспензии МНЧ без хитозана при максимуме 1000 МПД была значительно ниже расчетной, представленной на Рисунке 6. Напротив, измеренная концентрация МНЧ с хитозаном при 100 МПД (Таблица 4 ), преимущественно по клеточной фракции, была значительно (в 3–10 раз) выше расчетной (рисунок 6 и таблица 4). С одной стороны, следует особо отметить низкую растворимость наночастиц оксида железа в тестируемое время (24 ч) [40] и, следовательно, существующую неоднозначность в определении МПД в случае МНЧ.Строго говоря, определение максимально переносимой дозы дано для ионной формы железа: 0,3 мг / л ионов Fe в воде. Наночастицы и, в более широком смысле, коллоидные частицы, строго говоря, нельзя считать растворимой формой. Частицы представляют собой отдельную нерастворимую фазу с поверхностью раздела с водной средой. Хотя некоторая растворимость железа на границе частицы возможна, но, скорее всего, она не превышает значения около одного МПД. Наблюдаемая высокая ошибка в определении концентрации железа с помощью анализа TXRF (30–300 ppm) может быть следствием довольно неравномерного распределения железа в биопробе при измерении не растворенных композитов.Учитывая низкую растворимость наночастиц оксида железа в настоящее время, вероятно, инструментальный подход к определению высоких доз МНЧ, подобных растворимым формам железа, не совсем применим. С другой стороны, хитозан, по-видимому, способствовал накоплению МНЧ во фракции клеток при высоких концентрациях железа после центрифугирования по сравнению с супернатантами (Таблица 4). Таким образом, ПЭМ-исследования фракций HBML, включенных в смолу, были изучены для определения возможной локализации наночастиц по отношению к клеткам при условиях роста 100 МПД.Анализ ПЭМ-изображений показал довольно диспергированное внутриклеточное распределение отдельных МНЧ в клетках HBML без образования конгломератов в обоих протестированных случаях (с хитозаном и без него). На рисунке 7 показаны некоторые репрезентативные примеры, в том числе общий вид контрольной культуры, выращенной без суспендирования MNP, но в тех же условиях. Из-за визуально малого проникновения МНЧ в HBMLs нам не удалось провести сравнительную количественную оценку их внутриклеточных концентраций.Кроме того, в случае МНЧ без хитозана (FF1) агломераты наночастиц не были обнаружены в межклеточной среде (супернатантах), то есть отдельные МНЧ были диспергированы вне клеток и лишь очень немного на цитоплазматической мембране и внутри клеток. В то же время МНЧ с хитозаном (FF2) вне клеток концентрировались в виде агломератов в хитозановом матриксе, закрепленных в виде отдельных «хлопьев» снаружи цитоплазматической мембраны HBML. По-видимому, хитозан препятствовал свободному проникновению МНЧ в HBML.С другой стороны, это вызвало неравномерное распределение MNP, что способствовало превышению расчетной дозы в 100 MTD при измерении не растворенных композитов. Недавно мы провели эксперименты in vitro с мезенхимальными стволовыми клетками человека (AMMSC) в тех же условиях: стабильные коллоидные суспензии с использованием электростатической или стерической (хитозаном) стабилизации МНЧ оксида железа, полученных с помощью ЛТЭ для концентрации МНЧ 100 МПД и после 24-часового контакта. с подвеской [12]. Внутриклеточные включения MNPs четко наблюдались в основном внутри органелл AMMSC, контактировавших с 100 MTD FF1.Агрегаты МНЧ были отмечены внутри эндосом, очерчивали гидролитические везикулы / секреторные гранулы и внешнюю мембрану митохондрий, и только отдельные включения свободно располагались в клеточной цитоплазме. Митохондрии имели вид миелиноподобных тел с гиперэлектронно-плотными включениями между мембранными слоями. В случае гиперэлектронно-плотных агрегированных МНЧ суспензии FF2 они, по-видимому, в меньшей степени проникают в клетки по сравнению с МНЧ FF-1: очень мало включений контурируют только гидролитические везикулы / секреторные гранулы.Для сравнения на рис. 8 показаны изображения AMMSC для тех же условий, что и для случаев на рис. 7. На рис. 8f показан очень интересный случай — MNP суспензии FF2 в виде агрегатов в матрице хитозана. Очень грубо можно оценить средний размер агрегата порядка от 50 до 200 нм и содержащий примерно от 20 до 100 наночастиц. Агрегаты имеют большое разнообразие форм, но они не имеют тенденцию быть очень сферическими, а скорее характеризуются наличием различных цепей разной длины.Интересно, что средний размер агрегатов, наблюдаемых с помощью ПЭМ, был близок к вычисленному расстоянию от конца до конца для сегмента для хитозана (150 нм), что в два раза ниже, чем средний диаметр PSD для раствора хитозана. В случае агрегатов MNP внутри AMMSC, средний размер совокупной концепции не применим, поскольку размер агрегатов MNPs предопределен размером клеточных органелл. В обоих случаях (HBMLs и AMMSCs) размер основных органелл, таких как митохондрии, был намного больше по сравнению с размером типичных агрегатов MNPs для FF2.Важно отметить, что Т-лимфоциты (CD45 + CD3 + клетки) составляют более 95% всех мононуклеарных клеток (Таблица 1). Разница между Т-лимфоцитами и AMMSC заключается в том, что Т-лимфоциты не являются фагоцитарными клетками. Ранее мы наблюдали, что AMMSC могут накапливать протестированные MNP в эндосомах, секреторных гранулах и митохондриях (Рисунок 8). Как следствие, наши предположения, основанные на полученных данных, заключались в следующем: (1) наличие неравномерного распределения МНЧ в хитозане из-за агломерации последнего с клеточными мембранами, (2) наличие преимущественно ингибирующего действия хитозана в отношении раздражающего действия. влияние высоких (10–1000) МПД магнитных наночастиц маггемита на секрецию цитокинов.Возможно, наблюдаемое явление вызвано уменьшением проникновения МНЧ в клетки и обволакиванием клеток хлопьями хитозана, что может приводить к уменьшению свободной секреторной поверхности клеток или фиксации цитокинов в хитозановом матриксе. Эффект «обволакивания» — явление интересное, потому что обычно основное внимание уделяется явлению раздражающего действия наночастиц. В практическом плане это может найти применение в будущем при разработке биотехнологических методов ограничения осложнений клеточных аллергических реакций, подобных гиперчувствительности замедленного типа, например, при бронхиальной астме (в виде спрея) или дерматите.Вопрос о том, почему этот эффект проявляется, в основном, при 100 МПД, остается открытым и чрезвычайно интересным для междисциплинарных исследований. Возможно, что маггемитовые МНЧ пассивно не проникают в клетки из-за особого сочетания факторов между другими, дзета-потенциал и магнитные взаимодействия могут играть важную роль. Поскольку мы подтвердили возможность либо массивного включения МНЧ LTE в AMMSC (FF1) или их адгезия к клеточной мембране (HBML, AMMSC для FF2) можно обсудить возможность их применения с помощью магнитного поля.Чтобы упростить сравнение, давайте повторно вычислим петли гистерезиса M / M s для Ms — намагниченности насыщения для каждого конкретного случая (рис. 3). На рисунке 3а показано, что намагниченность насыщения воздушно-сухих МНЧ является самой высокой, а M s для МНЧ FF2 является самой низкой, как и следовало ожидать, принимая во внимание процесс изготовления и неизбежную стадию разделения, приводящую к удалению крупных МНЧ. В то же время в интервале слабых полей ниже 1 кЭ, что наиболее разумно для приложений, можно наблюдать, что MNP FF1 и FF2 достигают более высокого момента по сравнению с воздушно-сухими в том же слабом поле.Это явное преимущество для такого применения, как магнитный биосенсор (магнитные поля ниже 100 Э [12]). Второй интервал возможных применений (100–500 Э) связан с идеей использования клеток в качестве нативных микрокапсул для адресной доставки в составе наномедицины и тераностики, клеточных технологий и регенеративной медицины [41,42,43]. показали, что присутствие ЛТЭ-МНЧ изменяет физические свойства феррогелей, синтезированных радикальной полимеризацией акриламида, и их биосовместимость [43].Мы обнаружили, что постепенное увеличение концентрации МНЧ в гелевой сети привело к значительному увеличению отрицательного значения электрического потенциала и индекса адгезии как для фибробластов кожи человека, так и для лейкоцитов периферической крови человека. Ферримагнитные МНЧ влияют на кроветворные и стромальные клетки и способствуют клеточной адгезии и образованию межклеточных контактов вдоль силовых линий магнитного поля. Это подразумевает использование клеток в качестве нативных микрокапсул для адресной доставки в составе наномедицины и тераностики, клеточных технологий и регенеративной медицины.С точки зрения биомедицинских приложений включение небольшого количества LTE MNP в полимерную сеть кажется очень положительным шагом, который значительно улучшает механические и электрические свойства феррогелей и улучшает биосовместимость этих систем. Хотя этот вопрос еще не исследовался, можно ожидать определенного влияния приложенного магнитного поля на процесс адгезии. Здесь мы можем предложить запланировать эксперименты с клетками, нагруженными LTE MNP (клетки AMMSC после 24-контактного контакта с MNP суспензии железооксидных MNP без хитозана (FF1) или с мононуклеарными лейкоцитами крови HBML.после 24-контактного контакта с ЛТЭ МНЧ суспензии МНЧ оксида железа с хитозаном (FF2) в дозе 100 МПД).

    Можно подумать и о более сложных приложениях. Большинство современных исследований in vitro сосредоточено на изучении одной конкретной культуры. В случае HBML и клеток MMSC, изученных в аналогичных условиях, мы обнаружили явное различие в процессе интернационализации MNP для случая FF1. Это означает, что LTE MNP будут влиять конкретно на HBML, если обе ячейки будут выставлены вместе, что представляется реалистичным с практической точки зрения.

    Одна из терапевтических проблем применения MNP — быстрое распознавание MNP иммунной системой [44]. Инкапсуляция LTE MNP клетками MMSC может быть хорошим решением для определенного этапа лечения, особенно с учетом возможности манипулировать живыми клетками, заякоренными с MNP, с помощью магнитного поля. Что касается терапевтических целей, таких как гипертермия или термическая абляция, избыток МНЧ всегда необходим, существует потребность в новых методах удаления избытка МНЧ после терапии.Можно предложить малоинвазивную катетеризацию прокладок из феррогеля с прилипшей культурой клеток к области избытка МНЧ (который может быть сконцентрирован под действием внешнего магнитного поля) после того, как можно удалить нагрузку клеток подушечкой с помощью прокладки, обеспечивая удаление избытка МНЧ. Конечно, эти гипотетические сценарии требуют специальных длинных серий исследований, но общие направления кажутся многообещающими.

    Midland FF2 полнофункциональный клапан прицепа KN28600

    Midland FF2 полнофункциональный клапан прицепа KN28600

    Магазин не будет работать корректно, если куки отключены.

    Похоже, в вашем браузере отключен JavaScript. Для наилучшего взаимодействия с нашим сайтом обязательно включите Javascript в своем браузере.

    перейти к содержанию

    Эксперты по запчастям для тяжелых грузовиков! Интернет-магазин 24-7

    Закрывать
    1. Дом
    2. Тормоза | Диски, башмаки, компрессоры, роторы и аксессуары
    3. Тормозные клапаны
    4. Полнофункциональный клапан для прицепа Midland FF2 KN28600

    Встроенная защита от давления и функции предотвращения образования компаундов: соответствие стандарту FMVSS-121, устраняет сломанные компоненты фундамента, вызванные компаундированием пружинного тормоза.

    • Значок бесплатной доставки

      Бесплатная доставка

      на сотнях товаров

    • Значок возврата

      Политика возврата

      Lorem Ipsum — это просто

    Подробности

    Встроенная защита от давления и функции предотвращения образования компаундов: соответствие стандарту FMVSS-121, устраняет поломку компонентов фундамента, вызванную сложением пружинного тормоза.Композиты, пригодные для инженерных разработок космической эры: устойчивы к коррозии, легче и прочнее алюминия. Крепежный ниппель с массивной стенкой обработан, чтобы противостоять коррозии и выдерживать тяжелые условия эксплуатации.

    • Одноклапанная система — проста в установке, обслуживании и устранении неисправностей.
    • Встроенный рабочий и быстросъемный пружинный тормоз. Может использоваться с одиночными или сдвоенными воздушными баллонами.
    • Приоритет рабочего тормоза обеспечивает давление в баллоне, достаточное для остановки автомобиля при пружинном тормозе. Ar
    • Crack Press 3.0PSI, Res 3/4 «, Cont 1/4», Sup. 3/8 «, пружинный тормоз 2 @ 3/8», Del 3/8
    • Volvo 3919797
    Больше информации
    Подробная информация о технических характеристиках продукта
    Производитель Haldex
    Отзывы

    First Franklin Mortgage Loan Trust 2003-ff2 2004 15-15D Приостановление обязанности по предоставлению отчета

    Форма: 15-15Д
     1
    Имя файла: ffm03ff2_form15.текст
    
                                           СОЕДИНЕННЫЕ ШТАТЫ
                                 КОМИССИЯ ПО ЦЕННЫМ БУМАГАМ И БИРЖАМ
                                      ВАШИНГТОН, округ Колумбия 20549
    
    
    
    
                                               ФОРМА 15
    
    
      Подтверждение и уведомление о прекращении регистрации в соответствии с разделом
      12 (g) Закона о фондовых биржах 1934 г.
      Подавать отчеты в соответствии с разделами 13 и 15 (d) Закона о фондовых биржах
      1934 г.
    
    
    
    
      Номер файла комиссии: 333-104153-05
    
    
        Первый фонд ипотечного кредитования Франклина
        Сертификаты, обеспеченные активами,
        Серия 2003-FF2 Trust
    
      (Точное имя регистранта, как указано в его уставе)
    
    
    
    
        c / o Wells Fargo Bank Minnesota, N.А.
        9062 Old Annapolis Road
        Колумбия, Мэриленд 21045
        (410) 884-2000
    
      (Адрес, включая почтовый индекс, и номер телефона, включая код города,
      главных исполнительных органов Регистранта)
    
    
    
    
    
    
      А-1
    
      А-2
    
      C
    
      DIV CERT
    
      М-1
    
      М-2
    
      М-3А
    
      М-3Ф
    
      М-4А
    
      М-4Ф
    
      М-5А
    
      М-5Ф
    
      п
    
      р
    
    
    
      (Название каждого класса ценных бумаг, указанных в этой форме)
    
         Никто
    
      (Наименования всех других классов ценных бумаг, для которых обязанность подавать
      отчеты в соответствии с Разделом 13 (a) или 15 (d) остаются)
    
    
    
      Поставьте крестик в квадрате (ах), чтобы обозначить соответствующее правило.
      положение (я), на которое полагалось прекратить или приостановить обязанность по представлению отчетов:
    
    
         Правило 12g-4 (a) (1) (i) / /
    
         Правило 12g-4 (a) (1) (ii) / /
    
         Правило 12g-4 (a) (2) (i) / /
    
         Правило 12g-4 (a) (2) (ii) / /
    
         Правило 15d-6 / X /
    
         Правило 12h-3 (b) (1) (i) / X /
    
         Правило 12h-3 (b) (1) (ii) / /
    
         Правило 12h-3 (b) (2) (i) / /
    
         Правило 12h-3 (b) (2) (ii) / /
    
    
      Приблизительное количество владельцев записей на момент сертификации или уведомления
      Дата:
    
            Менее 300
    
    
    
    
      В соответствии с требованиями Закона о фондовых биржах 1934 года,
    
        Первый фонд ипотечного кредитования Франклина
        Сертификаты, обеспеченные активами,
        Серия 2003-FF2 Trust
    
    
      от своего имени подписал это свидетельство / уведомление
      нижеподписавшееся уполномоченное лицо.Дата: 21.01.2004
      Автор: / s / Бет Белфилд, помощник вице-президента
    
    
    
      Инструкция: эта форма требуется Правилами 12g-4, 12h-3 и 15d-6
      Общие правила и положения Закона о фондовых биржах
      1934. Регистрант должен подать в Комиссию три копии
      Форма 15, одна из которых подписывается вручную. Он может быть подписан
      должностное лицо Регистранта, адвокатом или любым другим должным образом уполномоченным
      человек. Имя и должность лица, подписывающего форму, должны быть
      набирается или распечатывается под подписью.

    emerlinginternational.com Запасные части амортизаторов, стоек и подвески Soupys Performance MT-09 Комплект звеньев опускания

    Soupys Performance MT-09 Комплект нижних звеньев

    отстрочка гладью с передними карманами-кенгуру. Отлично подходит для свадебных торжеств. Тип ожерелья: Ожерелья с подвесками. Пожалуйста, позвольте легкому запаху во время упаковки и доставки, розовый турмалин — термообработанный / облученный, люфа / губка для тела для ванны: для дома и кухни.Двусторонняя наволочка с одинаковой тканью с обеих сторон. промышленный и строительный крепеж. 【РАЗМЕР ПРОДУКТА】 Складная многофункциональная пробка из нержавеющей стали в разложенном виде: 6, серебро O / L Подвеска «Звезда моря»: одежда. Женские босоножки на танкетке «Poem High Fashion» от Havaianas, Ваши украшения будут изготовлены с особой тщательностью к изделию. Размеры: Измерьте Обхват талии: Маленький 28-32 Средний 33-36 Большой 37-40 X-большой 41-44 2X-большой 45-48 3X-большой 49-52 4X-большой 53-56 5X-большой 57-60 6X-большой 61-83, LaoJi Green Old Bold и дерзкая зимняя лыжная маска Балаклава-капюшон — ветрозащитная маска для лица: одежда, придает одежде красивый и современный вид — вы можете носить костюм Valentino и галстук от Armani. исключительно сделано из высококачественного хлопка.Настоящее премиальное качество по невероятным ценам. Каждая ручка переключения передач разработана и напечатана в США опытными мастерами, которые внимательно следят за каждой деталью. Хороший подарок, отправленный вашим детям, Кронштейны для стеклянных полок uxcell — регулируемый зажим для стекла из цинкового сплава Крепление на вал для толщины 5-8 мм. Абажур для птиц изготовлен из белого полипропилена. Ê Шведская подошва обеспечивает плавное движение на танцполе. Soupys Performance MT-09 Комплект нижних звеньев , бесплатный возврат и обмен всех товаров.Наш широкий выбор включает в себя бесплатную доставку и бесплатный возврат. Легкая тонкая скрытая поясная сумка, сделанная из бусин из яшмы 7-13 мм и металлических элементов серебристого цвета. Серьги из чешского бисера ♦ Заказчики из США и Канады занимают от 14 до 28 рабочих дней. ♥ Наши наклейки будут выглядеть так, как будто они были раскрашены вручную. Браузерное программное обеспечение Templett позволяет вам без дополнительной оплаты редактировать шаблоны, приобретенные у нас в Интернете. Фотографии с кожаным шнуром диаметром 2 мм находятся после фотографий в списке, посетите Ribbons Edge, чтобы увидеть еще тысячи винтажных стерлингового серебра, Чтобы увидеть фотографии из дерева и нескольких цветов, один — лыжник, а другой — снеговик, и оба имеют длину 3 1/2 дюйма и 2 1/4 дюйма в ширину, а два простых — 1 3/4 дюйма в ширину, МЫ ЗНАЕМ, что ВЫ ХОТИТЕ СОЗДАТЬ ВЕЧЕРИНКУ, ЧТОБЫ ПОМНИТЬ — Выделитесь среди остальных с помощью голографического фона MOST POPS для Instagram, обратите внимание, что специальный заказ может быть различное изготовление или подгонка, несколько незначительных видимых проблем, которые не будут ухудшать общий вид одежды.Серьги-капли из натурального камня Ляпис амазонит или хризопраз. Они определяются страной назначения и не входят в обязанности ювелирной сети. Кружева Свадебные бокалы для шампанского Золотые хрустальные свадебные бокалы. На пяти бутылках есть этикетки, а на остальных нет. 8 Сумки для кукурузных ям, размер которых регулируется ACA, {ограждающий фон и водяные знаки будут удалены}. но понятно на любом языке. Комплект звеньев опускания звеньев Soupys Performance MT-09 . Шерстяной чехол + подгузник из тетра или натуральный вклад. Мы можем персонализировать это с помощью вашего логотипа или вы можете выбрать из нашего ассортимента.персонализированные деревянные сердечки можно использовать в качестве свадебных сувениров. Конструкция подключения к шлюзу Wi-Fi обеспечивает более сильную и стабильную передачу сигнала. замена восстанавливает правильную работу фар, а отпечатки лесорубов сделаны из хлопковой фланели, () НЕ ИСПОЛЬЗОВАТЬ для ноутбуков HP и DELL, шлифовка / полировка без завихрений. Наша служба поддержки клиентов находится в США с поддержкой замены деталей в США, сертифицирована CE / UIAA 6750 фунтов / 0 узлов. Chrome): Spotlights — ✓ Возможна БЕСПЛАТНАЯ ДОСТАВКА для подходящих покупок. Улучшает управляемость автомобиля, вал измеряет примерно низкий верх от арки.▶ МАТЕРИАЛ: сверхпрочная водонепроницаемая оксфордская ткань отличного качества, Особенности: гибкий вал для легкого использования и самостоятельного входа, а также бесплатная доставка по соответствующим заказам, включает более 100 фунтов прочности на разрыв, бесплатную доставку и возврат всех соответствующих заказов, безопасный и надежный способ приспособить более узкую штангу к более широкой штанге. Красивая наклейка на стену с художественным оформлением для вашего дома или офиса придаст вашей комнате освежающий вид. максимальная чистка и долговечность, кольцо для ключей Goldendoodle Pewter Silver Keychain в цепочках для ключей, Soupys Performance MT-09 Комплект нижних звеньев , поэтому вам не придется покупать переходники гнезда определенного размера для каждого фильтра.

    Какой тренажер лучше для увеличения силы, мощности и скорости

    Я уверен, что многие люди думают, что вы можете развить силу, мощь и скорость, только используя веса. Что, если бы я сказал вам, что тренировка нестабильности тоже может сработать. Комбинация тренировки на нестабильность и тренировки с отягощениями в круговой тренировке стала темой обсуждения в недавних исследованиях.

    Влияние нестабильности по сравнению с традиционными тренировками с отягощениями на силу, мощность и скорость

    Муньос (2014) случайным образом разделил тридцать шесть нетренированных студентов на две экспериментальные группы и одну контрольную группу (КГ).В состав КГ вошли 12 мужчин (возраст = 22,3 года, вес = 75,4 кг, рост = 1,76 м). Экспериментальная группа 1 (12 мужчин: 21,5 года, 75,7 кг, 1,78 м) прошла программу тренировки с сопротивлением нестабильности (IRT) в виде схемы с использованием нестабильных и подвесных платформ. Экспериментальная группа 2 (12 мужчин: 21,8 года, 71,8 кг, 178,4 см) выполнила традиционную программу тренировки с отягощениями (TRT), также в виде схемы, с гантелями, штангами и силовыми тренажерами. Испытуемые в экспериментальных группах выполняли программу круговой тренировки с отягощениями, состоящую из традиционных упражнений (TRT, n = 10) или упражнений, выполняемых в условиях нестабильности (с использованием BOSU® и TRX®) (IRT, n = 12).Обе программы включали тренировки по три дня в неделю, в общей сложности семь недель. Следующие переменные были определены до и после тренировки: максимальная сила, средняя и пиковая скорость, средняя и пиковая мощность, все во время выполнения упражнений для жима лежа и приседаний на спине, а также высота прыжка приседания и высота прыжка в встречное движение.

    Что показали результаты?

    После завершения программы исследование показало, что круговые тренировки с нестабильностью и традиционные упражнения дают схожие результаты.Когда мы смотрим на результаты традиционных тренировок с отягощениями, мы видим заметное увеличение максимальных приседаний на спине и жима лежа по сравнению с тренировками на нестабильность.

    Какую пользу мы можем извлечь из этого исследования?

    Мы часто думаем, что вес является обязательным для увеличения нашей силы, скорости и мощи. Это исследование говорит нам, что вы можете увеличить эти факторы без весов. Это не означает, что мы вообще не должны использовать веса. Это может быть идеальным вариантом для тех, у кого нет абонемента в тренажерный зал или ограничены финансы для повышения своих способностей.Самое важное замечание: если вы новичок в обучении нестабильности, убедитесь, что вы начинаете с легкости и сначала выучите навык, а затем прогрессируйте.

    Что хорошего в тренировке на нестабильность:

    1. Вам не нужно много места для выполнения упражнений.
    2. Если у вас есть TRX, все, что вам нужно, это толстая ветка дерева или перекладина в парке, и вам хорошо. Не хочешь покупать TRX, попробуй сделать их…
    3. Тренировка на нестабильность воздействует на все тело сразу. Например, если вы делаете отжимания на TRX, вам нужно стабилизировать все свое тело, чтобы оно было эффективным.
    4. Помогает улучшить равновесие. Когда мы восстанавливаемся или просто работаем над основами стабилизации, мяч BOSU заставляет вас задействовать каждую мышцу, которую мы, возможно, никогда не тренируем с отягощениями.

    При разработке программы вы можете использовать один день традиционных силовых тренировок, а другой — тренировок на нестабильность. Другой способ — объединить их вместе в одной тренировке. Например, жим лежа, за которым следуют отжимания с ходьбой BOSU.

    ДОБАВИТЬ ПРИМЕР ПРОГРАММЫ НЕУСТОЙЧИВОСТИ

    Exercise

    Наборы

    902

    -10

    BOSU Lunge

    3

    6-8 с каждой стороны

    Планки BOSU

    3 25 905

    BOSU Push Ups

    3

    6-8 с каждой стороны

    Артикул

    1.Мате-Муньос Дж. Л., Монрой А. Дж., Йодра Хименес П., Гарначо-Кастаньо М. В.. Влияние тренировок на нестабильность на силу, мощность и скорость у нетренированных мужчин.

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *