Длина приора: Размеры кузова Lada Priora — Таблицы размеров

Содержание

Размеры кузова Lada Priora - Таблицы размеров

I 1.6 AT (2014 - н.в.)
Тип кузова:седан
Количество дверей:4
Количество мест:5
Колесная база:2492 (мм)
Колея передняя:1410 (мм)
Колея задняя:1380 (мм)
Дорожный просвет:170 (мм)
Ширина:1680 (мм)
Длина:4350 (мм)
Высота:1420 (мм)
I 1.6 MT (2013 - н.в.)
Тип кузова:седан
Количество дверей:4
Количество мест:5
Колесная база:2492 (мм)
Колея передняя:1410 (мм)
Колея задняя:1380 (мм)
Дорожный просвет:170 (мм)
Ширина:1680 (мм)
Длина:4350 (мм)
Высота:1420 (мм)
I 1.6 MT (2013 - 2014)
Тип кузова:седан
Количество дверей:4
Количество мест:5
Колесная база:2492 (мм)
Колея передняя:1410 (мм)
Колея задняя:1380 (мм)
Дорожный просвет:170 (мм)
Ширина:1680 (мм)
Длина:4350 (мм)
Высота:1420 (мм)
I 1.6 MT (2013 - н.в.)
Тип кузова:седан
Количество дверей:4
Количество мест:5
Колесная база:2492 (мм)
Колея передняя:1410 (мм)
Колея задняя:1380 (мм)
Дорожный просвет:170 (мм)
Ширина:1680 (мм)
Длина:4350 (мм)
Высота:1420 (мм)
I 1.8 MT (2014 - н.в.)
Тип кузова:седан
Количество дверей:4
Количество мест:5
Колесная база:2492 (мм)
Колея передняя:1410 (мм)
Колея задняя:1380 (мм)
Дорожный просвет:170 (мм)
Ширина:1680 (мм)
Длина:4350 (мм)
Высота:1420 (мм)
I 1.6 AT (2014 - н.в.)
Тип кузова:хэтчбек
Количество дверей:5
Количество мест:5
Колесная база:2492 (мм)
Колея передняя:1410 (мм)
Колея задняя:1380 (мм)
Дорожный просвет:170 (мм)
Ширина:1680 (мм)
Длина:4240 (мм)
Высота:1435 (мм)
I 1.6 MT (2013 - н.в.)
Тип кузова:хэтчбек
Количество дверей:5
Количество мест:5
Колесная база:2492 (мм)
Колея передняя:1410 (мм)
Колея задняя:1380 (мм)
Дорожный просвет:170 (мм)
Ширина:1680 (мм)
Длина:4240 (мм)
Высота:1435 (мм)
I 1.6 MT (2013 - 2014)
Тип кузова:хэтчбек
Количество дверей:5
Количество мест:5
Колесная база:2492 (мм)
Колея передняя:1410 (мм)
Колея задняя:1380 (мм)
Дорожный просвет:170 (мм)
Ширина:1680 (мм)
Длина:4240 (мм)
Высота:1435 (мм)
I 1.6 MT (2013 - н.в.)
Тип кузова:хэтчбек
Количество дверей:5
Количество мест:5
Колесная база:2492 (мм)
Колея передняя:1410 (мм)
Колея задняя:1380 (мм)
Дорожный просвет:170 (мм)
Ширина:1680 (мм)
Длина:4240 (мм)
Высота:1435 (мм)
I 1.8 MT (2014 - н.в.)
Тип кузова:хэтчбек
Количество дверей:5
Количество мест:5
Колесная база:2492 (мм)
Колея передняя:1410 (мм)
Колея задняя:1380 (мм)
Дорожный просвет:170 (мм)
Ширина:1680 (мм)
Длина:4240 (мм)
Высота:1435 (мм)
I 1.6 MT (2013 - н.в.)
Тип кузова:хэтчбек
Количество дверей:3
Количество мест:5
Колесная база:2492 (мм)
Колея передняя:1410 (мм)
Колея задняя:1380 (мм)
Дорожный просвет:170 (мм)
Ширина:1680 (мм)
Длина:4210 (мм)
Высота:1435 (мм)
I 1.6 MT (2013 - н.в.)
Тип кузова:хэтчбек
Количество дверей:3
Количество мест:5
Колесная база:2492 (мм)
Колея передняя:1410 (мм)
Колея задняя:1380 (мм)
Дорожный просвет:170 (мм)
Ширина:1680 (мм)
Длина:4210 (мм)
Высота:1435 (мм)
I 1.6 AT (2014 - н.в.)
Тип кузова:универсал
Количество дверей:5
Количество мест:5
Колесная база:2492 (мм)
Колея передняя:1410 (мм)
Колея задняя:1380 (мм)
Дорожный просвет:170 (мм)
Ширина:1680 (мм)
Длина:4330 (мм)
Высота:1508 (мм)
I 1.6 MT (2013 - н.в.)
Тип кузова:универсал
Количество дверей:5
Количество мест:5
Колесная база:2492 (мм)
Колея передняя:1410 (мм)
Колея задняя:1380 (мм)
Дорожный просвет:170 (мм)
Ширина:1680 (мм)
Длина:4330 (мм)
Высота:1508 (мм)
I 1.6 MT (2013 - н.в.)
Тип кузова:универсал
Количество дверей:5
Количество мест:5
Колесная база:2492 (мм)
Колея передняя:1410 (мм)
Колея задняя:1380 (мм)
Дорожный просвет:170 (мм)
Ширина:1680 (мм)
Длина:4330 (мм)
Высота:1508 (мм)
I 1.8 MT (2014 - н.в.)
Тип кузова:универсал
Количество дверей:5
Количество мест:5
Колесная база:2492 (мм)
Колея передняя:1410 (мм)
Колея задняя:1380 (мм)
Дорожный просвет:170 (мм)
Ширина:1680 (мм)
Длина:4330 (мм)
Высота:1508 (мм)
I 1.6 MT (2010 - 2013)
Тип кузова:хэтчбек
Количество дверей:3
Количество мест:5
Колесная база:2492 (мм)
Колея передняя:1410 (мм)
Колея задняя:1380 (мм)
Дорожный просвет:170 (мм)
Ширина:1680 (мм)
Длина:4210 (мм)
Высота:1435 (мм)
I 1.6 MT (2009 - 2013)
Тип кузова:универсал
Количество дверей:5
Количество мест:5
Колесная база:2492 (мм)
Колея передняя:1410 (мм)
Колея задняя:1380 (мм)
Дорожный просвет:170 (мм)
Ширина:1680 (мм)
Длина:4330 (мм)
Высота:1508 (мм)
I 1.6 MT (2008 - 2013)
Тип кузова:хэтчбек
Количество дверей:5
Количество мест:5
Колесная база:2492 (мм)
Колея передняя:1410 (мм)
Колея задняя:1380 (мм)
Дорожный просвет:170 (мм)
Ширина:1680 (мм)
Длина:4240 (мм)
Высота:1435 (мм)
I 1.6 MT (2011 - 2013)
Тип кузова:хэтчбек
Количество дверей:5
Количество мест:5
Колесная база:2492 (мм)
Колея передняя:1410 (мм)
Колея задняя:1380 (мм)
Дорожный просвет:170 (мм)
Ширина:1680 (мм)
Длина:4240 (мм)
Высота:1435 (мм)
I 1.6 MT (2008 - 2013)
Тип кузова:хэтчбек
Количество дверей:5
Количество мест:5
Колесная база:2492 (мм)
Колея передняя:1410 (мм)
Колея задняя:1380 (мм)
Дорожный просвет:170 (мм)
Ширина:1680 (мм)
Длина:4240 (мм)
Высота:1435 (мм)
I 1.6 MT (2007 - 2013)
Тип кузова:седан
Количество дверей:4
Количество мест:5
Колесная база:2492 (мм)
Колея передняя:1410 (мм)
Колея задняя:1380 (мм)
Дорожный просвет:170 (мм)
Ширина:1680 (мм)
Длина:4350 (мм)
Высота:1420 (мм)
I 1.6 MT (2011 - 2013)
Тип кузова:седан
Количество дверей:4
Количество мест:5
Колесная база:2492 (мм)
Колея передняя:1410 (мм)
Колея задняя:1380 (мм)
Дорожный просвет:170 (мм)
Ширина:1680 (мм)
Длина:4350 (мм)
Высота:1420 (мм)
I 1.6 MT (2007 - 2013)
Тип кузова:седан
Количество дверей:4
Количество мест:5
Колесная база:2492 (мм)
Колея передняя:1410 (мм)
Колея задняя:1380 (мм)
Дорожный просвет:170 (мм)
Ширина:1680 (мм)
Длина:4350 (мм)
Высота:1420 (мм)
I Premier 1.6 MT (2008 - 2012)
Тип кузова:седан
Количество дверей:4
Количество мест:5
Колесная база:2667 (мм)
Колея передняя:1410 (мм)
Колея задняя:1380 (мм)
Дорожный просвет:130 (мм)
Ширина:1680 (мм)
Длина:4525 (мм)
Высота:1420 (мм)
I Premier 1.8 MT (2008 - 2012)
Тип кузова:седан
Количество дверей:4
Количество мест:5
Колесная база:2667 (мм)
Колея передняя:1410 (мм)
Колея задняя:1380 (мм)
Дорожный просвет:130 (мм)
Ширина:1680 (мм)
Длина:4525 (мм)
Высота:1420 (мм)

На LADA Priora установлена новая коробка передач

 

Автомобили LADA Priora теперь выпускаются с новой механической коробкой передач. Полная замена привода МКП и механизма выбора передач повысила четкость переключения и снизила усилия на рычаг.

В новом узле LADA Priora тяговый привод заменен на тросовый: это снизило вибрации на рычаге переключения передач, заметно улучшив виброакустический комфорт автомобиля. Поставщик тросового привода - японская фирма Atsumitec. Такие тросы применяются на большинстве иностранных моделей схожего класса.

Перенос механизма выбора передач нижней части коробки наверх позволил на 30% уменьшить количество заливаемого масла. Благодаря этому усовершенствованию загустевшее на морозе масло больше не будет создавать проблемы при переключении.

Модуль механизма выбора передач поставляет немецкая фирма Schaeffler - сегодня эта компания готовит локализацию производства на территории РФ. Среди особенностей механизма - так называемая 3D-гребенка, смоделированная на компьютере объемная деталь, по которой перемещается шарик фиксатора передач. Благодаря этому передачи переключаются четко; в конце хода присутствует легкий эффект «втягивания» рычага.

При подготовке модернизированной МКП для LADA Priora поставщик доработал модуль переключения; партнером по оптимизации системы переключения выступила английская фирма Ricardo. Снижены поперечный и продольный ходы рычага, оптимизировано соотношение между длиной и шириной хода - это повышает удобство пользования автомобилем. Аналогичные изменения в модуле переключения будут внедрены и на механических коробках передач LADA Kalina и Granta.

При освоении новой коробки передач для LADA Priora корректировки внесены в технологию литья картеров, механической обработки деталей и сборки узлов, сварки кузовов, сборки автомобилей; внедрено новое оборудование для мехобработки картеров. Модернизация производства началась в апреле, финальный этап и обучение персонала были проведены во время запланированной остановки конвейера в конце апреля - начале мая 2014 года.

На АВТОВАЗе работают два цеха по выпуску МКП для переднеприводных автомобилей LADA, мощность каждого цеха - 330 тыс. коробок передач в год. Первая очередь была модернизирована в 2012 году - тогда новую МКП получили LADA Granta и LADA Kalina. Теперь аналогичные конструктивные усовершенствования произведены в коробке передач LADA Priora. Дополнительно улучшено качество зацепления, модернизированы синхронизаторы, введен новый подшипник вторичного вала, что существенно снижает уровень шума МКП и является индикатором повышения долговечности и надежности. При этом МКП LADA Priora отличается усиленным вторичным валом с возросшим порогом пиковых нагрузок от двигателя, что также повышает надежность (в перспективе это пригодится при увеличении мощности моторов).

АВТОВАЗ (входит в Госкорпорацию Ростех) – один из крупнейших производителей легковых автомобилей в России и Восточной Европе. Предприятие является градообразующим для города Тольятти Самарской области. 

События, связанные с этим
16 мая 2014

На LADA Priora установлена новая коробка передач

Подпишитесь на новости

Запрашиваемая страница не найдена!

Модуль передней подвески 1117, 1118, 1119 со стойками SS20 комфорт и опорой SS20 GOLD (к-т 2 шт.) (SS99135)
15,500.00 р. 14,900.00 р.  
Модуль передней подвески 1117-1119, 2190-2194 со стойками SS20 комфорт и опорой SS20 мастер (к-т 2 шт.) (SS99137)
14,110.00 р. 13,930.00 р.  
Модуль передней подвески 2170, 2171, 2172 со стойками SS20 комфорт и опорой SS20 GOLD (к-т 2 шт.) (SS99133)
15,500.00 р. 14,900.00 р.  
Модуль передней подвески 2170, 2171, 2172 со стойками SS20 комфорт и опорой SS20 мастер (к-т 2 шт.) (SS99133)
14,110.00 р. 13,930.00 р.  
Модуль передней подвески 2190, 2191, 2192, 2194, Datsun on-DO, Datsun mi-DO со стойками SS20 комфорт и опорой SS20 GOLD (к-т 2 шт.) (SS99137)
15,500.00 р. 14,900.00 р.  
Амортизатор задний SS20 2110,1119,2170 комфорт (2 шт.)(SS20126)
4,650.00 р. 4,310.00 р.  
Амортизаторная стойка для кресла лодочного катера, лодки, яхты "СИТЕК Лидер" низкое для Волжанки.
13,500.00 р. 12,500.00 р.  
Амортизаторная стойка для кресла лодочного катера, лодки, яхты "СИТЕК" Престиж стандартное
13,500.00 р. 12,500.00 р.  
Модуль задней подвески 1117,1118, 1119,2108,2109, 21099,2110, 2111,2112, 2113,2114, 2115,2170, 2171,2172, 2190,2191, 2192,2194, Datsun on-DO , Datsun mi-DO SS20 RACING РЕЙСИНГ ( к-т 2 шт.)
12,400.00 р. 11,950.00 р.  
Модуль Передней подвески 1117, 1118, 1119, Калина SS20 RACING РЕЙСИНГ ( к-т 2 шт.)
17,650.00 р. 17,350.00 р.  
Модуль Передней подвески 2108, 2109, 21099, 2110, 2111, 2112, 2113, 2114, 2115 SS20 RACING РЕЙСИНГ ( к-т 2 шт.)
15,920.00 р. 15,600.00 р.  
Модуль Передней подвески 2170,2171,2172,Приора SS20 RACING РЕЙСИНГ ( к-т 2 шт.)
17,650.00 р. 17,350.00 р.  
Модуль Передней подвески 2190, 2191, 2192, 2194, Гранта, Калина-2, Datsun on-DO , Datsun mi-DO SS20 RACING РЕЙСИНГ ( к-т 2 шт.)
17,650.00 р. 17,350.00 р.  
Опора передней стойки SS20 2108 Стандарт ( 2 шт.) (SS10101)
3,500.00 р. 3,340.00 р.  
Опора передней стойки SS20 2170 Приора мастер (с фирменным подшипником SS20 ) ( 2 шт.) (SS10110)
3,850.00 р. 3,670.00 р.  
Опора передней стойки SS20 2190 мастер Гранта с ЭУР (с фирменным подшипником SS20 ) ( 2 шт.) (SS10123)
3,670.00 р. 3,390.00 р.  

Универсальный априор для целых чисел и оценки по минимальной длине описания в JSTOR

Abstract

Ранее введенный принцип оценки, который призывает к минимизации количества битов, необходимых для записи наблюдаемых данных, был переформулирован для расширения классического принципа максимального правдоподобия. Принцип позволяет оценивать количество параметров в статистических моделях в дополнение к их значениям и даже то, как параметры появляются в моделях; я.е. модельных конструкций. Принцип основан на новом способе интерпретации и построения универсального априорного распределения для целых чисел, которое имеет смысл, даже когда параметр является индивидуальным объектом. Усеченные параметры с действительным знаком преобразуются в целые числа путем деления на их точность, а их априорность определяется из универсального априорного значения для целых чисел путем оптимизации точности.

Информация журнала

The Annals of Statistics публикует научные статьи самого высокого уровня. качество, отражающее многие аспекты современной статистики.Основной упор придается значение и оригинальность, а не формализм. Дисциплина статистики имеет глубокие корни как в математике, так и в основные научные направления. Математика дает язык, на котором сформулированы модели и свойства статистических методов. Это важно за строгость, последовательность, ясность и понимание. Следовательно, наша политика будет продолжать играть особую роль в представлении исследований на переднем крае математической статистики, особенно теоретических достижений, которые, вероятно, оказывать значительное влияние на статистическую методологию или понимание.Основные области важны для сохранения жизнеспособности статистики, поскольку они обеспечивают мотивацию и направление для большинства будущих разработок в статистике. Таким образом, мы намерены также публиковать статьи, касающиеся роли статистики в междисциплинарных исследованиях во всех областях естественной, технические и социальные науки. Третья сила, меняющая статистику вычислительная революция, и Анналы также приветствуют разработки в этой области.

Информация об издателе

Целью Института математической статистики (IMS) является содействие развитие и распространение теории и приложений статистики и вероятность.Институт сформирован на встрече заинтересованных лиц. 12 сентября 1935 года в Анн-Арборе, штат Мичиган, вследствие чувства что теория статистики будет продвинута с образованием организации тех, кто особенно интересуется математическими аспектами предмета. Летопись статистики и Анналы вероятности (которые заменяют "Анналы математической статистики"), Статистические Наука и Анналы прикладной вероятности - это научные журналы института.Они и Бюллетень IMS включают официальные журналы института. Институт имеет индивидуальное и организационное членство. Сборы оплачиваются ежегодно и включают подписку на информационный бюллетень организации, Бюллетень IMS. Участники также получают приоритетные цены на все другие публикации IMS.

Проблемы, связанные с объединением данных о метке-повторной поимке до оценки длины остановки в пути для мигрирующих воробьиных

U.S. Forest Service
Забота о земле и обслуживание людей

Министерство сельского хозяйства США


  1. Проблемы, связанные с объединением данных о мечении и повторной поимке перед оценкой продолжительности остановки для мигрирующих воробьиных

    Автор (ы): Сара Р. Моррис; Эрика М. Тернер; Дэвид А. Либнер; Аманда М. Ларракуэнте; Х. Дэвид Шитс
    Дата: 2005
    Источник: В: Ральф, К. Джон; Рич, Террелл Д., редакторы 2005. Осуществление и интеграция по охране птиц в Северной и Южной Америке: Труды Третьей международной конференции «Партнеры в области полетов». 20-24 марта 2002 г .; Асиломар, Калифорния, Том 2 Gen. Tech. Реп. PSW-GTR-191. Олбани, Калифорния: Департамент сельского хозяйства США, Лесная служба, Тихоокеанская юго-западная исследовательская станция: стр. 673-679
    Серия публикаций: Общий технический отчет (GTR)
    Станция: Тихоокеанская Юго-Западная научно-исследовательская станция
    PDF: Скачать публикацию (186.0 KB)

    Описание Одним из показателей важности места остановки в пути является продолжительность времени, которое мигранты проводят в этом районе, однако измерение времени, которое птицы проводят на месте остановки, оказалось трудным. В большинстве исследований кольцевания представлена ​​только минимальная продолжительность остановки, основанная на разнице между первоначальной и окончательной повторной поимкой птиц, отловленных более одного раза. В моделях Кормака-Джолли-Себера (CJS) для оценки продолжительности остановок мигрантов использовались многократные повторные поимки, а недавно была предложена новая модель (анализ продолжительности остановки, SODA), включающая оценки пополнения.Используя данные полосатости красноглазых вирео ( Vireo olivaceous ), американских горихвосток ( Setophaga ruticilla ) и северных водорослей (Seiurus noveboracensis), пойманных во время осенней миграции на острове Эпплдор, штат Мэн, в 1999 и 2000 годах, мы оценили оценки остановок в пути. от минимальной остановки и методов SODA. В частности, мы исследовали влияние объединения данных для анализа на оценки остановок в пути. Результаты наших данных по группированию и моделирования показывают, что объединение может привести к смещенным оценкам остановок в пути за счет увеличения оценок с увеличением размеров интервалов объединения.Кроме того, объединение может также увеличить дисперсию оценки. Таким образом, объединение следует использовать с осторожностью и по возможности избегать.

    Примечания к публикации
    • Вы можете отправить электронное письмо по адресу [email protected], чтобы запросить печатную копию этой публикации.
    • (Пожалуйста, укажите именно , какую публикацию вы запрашиваете, и свой почтовый адрес.)
    • Мы рекомендуем вам также распечатать эту страницу и прикрепить ее к распечатке статьи, чтобы сохранить полную информацию о цитировании.
    • Эта статья была написана и подготовлена ​​служащими правительства США в официальное время и поэтому находится в открытом доступе.

    Цитирование Morris, Sara R .; Тернер, Эрика М .; Либнер, Дэвид А .; Larracuente, Amanda M .; Листы, Х. Дэвид. 2005. Проблемы, связанные с объединением данных о мечении и повторной поимке до оценки продолжительности остановки для мигрирующих воробьиных птиц. В: Ральф, К. Джон; Рич, Террелл Д., редакторы, 2005 г. Реализация и интеграция по охране птиц в Северной и Южной Америке: материалы третьей международной конференции «Партнеры в области полетов».20-24 марта 2002 г .; Асиломар, Калифорния, Том 2 Gen. Tech. Реп. PSW-GTR-191. Олбани, Калифорния: Департамент сельского хозяйства США, Лесная служба, Тихоокеанская юго-западная исследовательская станция: стр. 673-679

    Ключевые слова метка-повторная поимка, мигрирующие воробьиные, объединение, длина остановки

    Связанный поиск
    XML: Просмотр XML

Показать больше

Показать меньше

https://www.fs.usda.gov/treesearch/pubs/32043

Влияние предшествующего домашнего ухода на продолжительность пребывания в стационаре для австралийцев с деменцией

Реферат

Цели

Оценить влияние домашнего ухода уход в связи с продолжительностью пребывания в учреждении интернатного типа.

Дизайн

Ретроспективное исследование связи данных наблюдений.

Условия и участники

Всего 3151 участник исследования 45 лет и старше в Новом Южном Уэльсе, Австралия, с деменцией поступили в учреждение интернатного типа в период с 2010 по 2014 год.

Методы

Данные опроса, собранные за 2006–2009 годы, были связаны к административным данным за 2006–2016 гг. Самый высокий уровень домашнего ухода, к которому человек обращался до ухода в интернатное учреждение, определялся как отсутствие домашнего ухода, поддержка на дому, низкий уровень домашнего ухода и высокий уровень домашнего ухода.Полиномиальная логистическая регрессия и пропорциональные риски Кокса использовались для исследования различий в повседневной деятельности, поведенческих и сложных масштабах здравоохранения при поступлении в учреждения интернатного типа; и продолжительность пребывания в учреждении интернатного типа.

Результаты

Люди, ранее получавшие высокоуровневый уход на дому, попали в учреждения интернатного типа, нуждаясь в более высокой помощи по сравнению с группой без ухода на дому: повседневная деятельность [отношение шансов (ОШ) 3,41, 95% доверительный интервал (ДИ) 2,14–5,44] , поведение (ИЛИ 2.61, 95% ДИ 1,69–4,03) и комплексное здравоохранение (ОШ 2,02, 95% ДИ 1,06–3,84). У них был более высокий уровень смертности, что означало более короткую продолжительность пребывания в учреждениях интернатного типа (<2 лет после поступления: отношение рисков 1,12; 95% ДИ 0,89–1,42; 2-4 года: отношение рисков 1,49; 95% ДИ 1,01–2,21. ). Те, кто пользовался низкоуровневым домашним уходом, с меньшей вероятностью попали в интернатное учреждение, нуждающееся в серьезной помощи, по сравнению с группой без ухода на дому (повседневная деятельность: OR 0,61, 95% ДИ 0,45‒0,81; поведенческие: OR 0,72, 95% ДИ 0,54). 0,95; комплексное здравоохранение: OR 0.51, 95% ДИ 0,33-0,77). Не было разницы между группами поддержки на дому и группами ухода на дому.

Выводы

Уход на дому на высоком уровне до ухода в интернатное учреждение может помочь людям с деменцией оставаться дома дольше, но группа ухода на низком уровне попала в интернатное учреждение с низким уровнем помощи, что, возможно, сигнализирует об отсутствии неформального ухода и препятствиях для доступа домашний уход более высокого уровня.

Последствия

Лучшие варианты перехода от низкоуровневой помощи на дому, включая более своевременную доступность пакетов высокоуровневой помощи, могут помочь людям с деменцией дольше оставаться дома.

Ключевые слова

Деменция

Уход на дому

Поддержка на дому

Уход в интернатах

Долгосрочный уход

Дом престарелых

Рекомендуемые статьи Цитирующие статьи (0)

Полный текст

© 2019 AMDA - The Society for Post- Медицина неотложной и длительной помощи.

Рекомендуемые статьи

Ссылки на статьи

Блокада нерва перед восстановлением лучевой кости может снизить болевые ощущения и сократить продолжительность пребывания в стационаре

23 сентября 2020

1 мин чтения

Источник / Раскрытие информации
Опубликовано:

Раскрытие информации: Авторы не сообщают о раскрытии соответствующей финансовой информации.

ДОБАВИТЬ ТЕМУ В СООБЩЕНИЯ

Получать электронное письмо, когда новые статьи публикуются на

Укажите свой адрес электронной почты, чтобы получать сообщения о публикации новых статей. Подписаться Нам не удалось обработать ваш запрос.Пожалуйста, повторите попытку позже. Если у вас по-прежнему возникает эта проблема, обратитесь по адресу [email protected]

Вернуться в Healio

Согласно опубликованным результатам, использование блокады периферического нерва перед восстановлением дистального отдела лучевой кости позволило лучше контролировать боль и сократить продолжительность пребывания в стационаре по сравнению с использованием общей анестезии.

Исследователи из Медицинского колледжа Университета Аризоны провели последовательное обследование 80 пациентов, перенесших амбулаторное открытое репозицию и внутреннюю фиксацию дистального отдела лучевой кости с марта по август 2016 года.43 пациентам перед процедурой была проведена блокада периферического нерва без общей анестезии (группа нервной блокады). Тридцать семь пациентов получили только общую анестезию перед процедурой (группа без нервной блокады).

По шкале от 0 до 10 средний уровень боли при выписке составил 0,93 в группе нервной блокады по сравнению с 3,93 в группе без нервной блокады.

Нервные блокады были выполнены анестезиологами с использованием 0,5% бупивакаина с адреналином или без него или 0.5% ропивакаин с адреналином или без него. Согласно исследованию, показатели исхода включали продолжительность пребывания (LOS) в послеоперационной фазе 1, общую LOS, осложнения, связанные с блокадой нерва, и уровень боли, сообщаемый пациентом при выписке.

В группе нервной блокады исследователи обнаружили более короткую фазу 1 и общую LOS, а также «статистически значимое снижение» уровня боли, сообщаемой пациентом при выписке. Средняя общая LOS составила 72,12 минуты в группе нервной блокады по сравнению с 109,18 минут в группе без нервной блокады.По шкале от 0 до 10 средний уровень боли при выписке составил 0,93 в группе нервной блокады по сравнению с 3,93 в группе без нервной блокады.

Один пациент сообщил о кратковременном раздражении кожи в месте инъекции нервной блокады; однако это разрешилось перед выпиской. Согласно исследованию, о других осложнениях не сообщалось.

«Восстановление дистального отдела лучевой кости - одна из наиболее часто выполняемых операций в ортопедии. Тем не менее, до сих пор ведутся споры об оптимальной стратегии обезболивания для послеоперационного обезболивания », - пишут авторы в исследовании.«На основании этих результатов авторы рекомендуют использовать блокаду периферического нерва перед восстановлением дистального отдела лучевой кости в условиях центра амбулаторной хирургии, чтобы уменьшить послеоперационную боль и уменьшить LOS», - заключили они.

ДОБАВИТЬ ТЕМУ В СООБЩЕНИЯ

Получать электронное письмо, когда новые статьи публикуются на

Укажите свой адрес электронной почты, чтобы получать сообщения о публикации новых статей.Подписаться Нам не удалось обработать ваш запрос. Пожалуйста, повторите попытку позже. Если у вас по-прежнему возникает эта проблема, обратитесь по адресу [email protected]

Вернуться в Healio

Страница не найдена - Khoury College Development

В мире, где информатика (CS) присутствует повсюду, CS для всех.CS пересекает все дисциплины и отрасли.

Колледж компьютерных наук Хури стремится к созданию и развитию разнообразной инклюзивной среды.

Первый в стране колледж компьютерных наук, основанный в 1982 году, Khoury College вырос в размерах, разнообразии, образовательных программах и передовых исследовательских достижениях.

В наших региональных кампусах, расположенных в промышленных и технологических центрах, Khoury College предлагает сильные академические программы в ярких городах для жизни, работы и учебы.

Колледж Хури - это сообщество людей, посвятивших себя обучению, наставничеству, консультированию и поддержке студентов по каждой программе.

Программы награждения колледжей и университетов проливают свет на выдающихся преподавателей, студентов, выпускников и партнеров по отрасли.

Наши исследования в реальном мире, выдающиеся преподаватели, выдающиеся спикеры, динамичные выпускники и разнообразные студенты рассказывают свои истории и попадают в новости.

В колледже Хури обучение происходит в классе и за его пределами. Мероприятия в нашей сети кампусов обогащают образовательный опыт.

Информатика повсюду.Студенты колледжа Хури занимаются соответствующей работой, исследованиями, глобальными исследованиями и опытом оказания услуг, которые помогают им расти.

Студенты магистратуры углубляют свои знания благодаря проектной работе, профессиональному опыту работы и исследовательской работе.

Работа над исследованиями с преподавателями занимает центральное место в опыте докторантуры.Докторанты колледжа Хури также могут заниматься исследованиями вместе с партнерами по отрасли.

Преподаватели и студенты колледжа Хури проводят эффективную работу по различным дисциплинам. Обладая широтой областей исследований, мы каждый день решаем новые проблемы в сфере технологий.

Наши институты и исследовательские центры объединяют ведущих академических, промышленных и государственных партнеров, чтобы использовать возможности вычислений.

Исследовательские проекты, разработанные и возглавляемые преподавателями мирового класса Khoury College, привлекают студентов и других исследователей к получению новых знаний.

Исследовательские лаборатории и группы сосредотачиваются на наборе проблем в определенном контексте, предлагая исследования и сотрудничество.

Эта новая инициатива направлена ​​на устранение рисков для конфиденциальности и личных данных коллективными усилиями на низовом уровне с упором на прозрачность и подотчетность.

Современные помещения, бесшовные системы, инновационные лаборатории и помещения позволяют нашим преподавателям и студентам проводить передовые исследования.

Колледж Хури гордится нашим коллективным и инклюзивным сообществом. Каждый день мы стремимся создавать программы, которые приветствуют самых разных студентов в CS.

Более 20 компьютерных клубов в колледже Хури и Северо-Востоке предлагают что-то для каждого студента.Мы всегда рады новым членам на всех уровнях.

Студенты учатся в современных классах, конференц-залах для совместной работы, а также в ультрасовременных лабораториях и исследовательских центрах.

Сети обеспечивают безопасную и бесперебойную работу кода, современное и надежное оборудование, а наша квалифицированная системная команда управляет поддержкой и обновлениями.

Заинтригованы колледжем Хури и высшим образованием на северо-востоке? Начните здесь, чтобы увидеть общую картину - академические науки, экспериментальное обучение, студенческую жизнь и многое другое.

Готовы сделать следующий шаг в технической карьере? Наши магистерские программы сочетают академическую строгость, высокое качество исследований и значимые возможности для получения опыта.

Добро пожаловать в магистерскую программу Align, предназначенную для людей, готовых добавить информатику (CS) к своим навыкам или переключиться на новую карьеру в сфере технологий.

Будучи аспирантом Хури, вы погрузитесь в строгий учебный план, будете сотрудничать с известными преподавателями и окажете влияние в выбранной вами области исследования.

Где бы вы ни находились на пути бакалавриата Хури, у нас есть консультанты, ресурсы и возможности, которые помогут вам добиться успеха и сделать информатику для всех.

Где бы вы ни находились в аспирантуре Хури, наши консультанты, информационные ресурсы и возможности помогут вам выработать индивидуальный путь.

На любом этапе пути Align - и в любом из наших кампусов - консультанты, ресурсы и возможности Khoury поддержат ваш путь к карьере в сфере технологий.

Консультанты и преподаватели помогут вам сориентироваться в докторантуре в колледже Хури - от исследовательских пространств и междисциплинарных проектов до студенческой жизни и ресурсов.

Преподаватели и сотрудники вносят исключительный вклад в Колледж Хури - и в будущее информатики. Мы здесь, чтобы поддержать вас на каждом шагу.

Как оценивается длина трубки до назогастральной (НГ) интубации?

Автор

Гил З. Шламовиц, доктор медицины, FACEP Доцент кафедры неотложной клинической медицины Медицинской школы Кека Университета Южной Калифорнии; Главный специалист по медицинской информации, Keck Medicine, USC

Гил З. Шламовиц, доктор медицинских наук, FACEP является членом следующих медицинских обществ: Американского колледжа врачей скорой помощи, Американской ассоциации медицинской информатики

Раскрытие информации: не подлежит разглашению.

Соавтор (ы)

Нирав Р. Шах, доктор медицины, магистр здравоохранения Старший вице-президент и главный операционный директор, Kaiser Permanente Southern California

Нирав Р. Шах, доктор медицины, магистр здравоохранения является членом следующих медицинских обществ: Американского колледжа врачей, Нью-Йоркской медицинской академии, Общества генералов Внутренняя медицина

Раскрытие информации: нечего раскрывать.

Специальная редакционная коллегия

Мэри Л. Виндл, PharmD Адъюнкт-профессор, Фармацевтический колледж Медицинского центра Университета Небраски; Главный редактор Medscape Drug Reference

Раскрытие информации: нечего раскрывать.

Луис М. Ловато, доктор медицины Адъюнкт-профессор клинической медицины, Калифорнийский университет, Лос-Анджелес, медицинская школа Дэвида Геффена; Директор отделения интенсивной терапии, отделение неотложной медицины, Медицинский центр Olive View-UCLA

Луис М. Ловато, доктор медицины, является членом следующих медицинских обществ: Alpha Omega Alpha, Американский колледж врачей неотложной помощи, Общество академической неотложной медицины

Раскрытие информации : Нечего раскрывать.

Главный редактор

Викрам Кейт, MBBS, MS, PhD, FRCS, FACS, FACG, FRCS (Edin), FRCS (Glasg), FIMSA, MAMS, MASCRS, FFST (Ed) Профессор общей и желудочно-кишечной хирургии и старший консультант-хирург, Джавахарлал Институт последипломного медицинского образования и исследований (JIPMER), Индия

Викрам Кейт, MBBS, MS, PhD, FRCS, FACS, FACG, FRCS (Edin), FRCS (Glasg), FIMSA, MAMS, MASCRS, FFST (Ed) является член следующих медицинских обществ: Американский колледж гастроэнтерологии, Американский колледж хирургов, Американское общество хирургов толстой и прямой кишки, научный сотрудник факультета хирургических тренеров (RCSEd), Королевский колледж врачей и хирургов Глазго, Королевский колледж хирургов. Эдинбурга, Королевский колледж хирургов Англии, Общество хирургии пищеварительного тракта

Раскрытие информации: нечего раскрывать.

Дополнительные участники

Эндрю К. Чанг, доктор медицины, магистр медицины Винсент Вердайл, доктор медицины, заведующий кафедрой неотложной медицины, профессор неотложной медицины, заместитель председателя по исследованиям и академическим вопросам Медицинского колледжа Олбани; Доцент кафедры неотложной клинической медицины Медицинского колледжа Альберта Эйнштейна; Лечащий врач отделения неотложной медицины, Медицинский центр Монтефиоре

Эндрю К. Чанг, доктор медицинских наук, является членом следующих медицинских обществ: Американской академии неотложной медицины, Американской академии неврологии, Американской академии медицины боли, Американского колледжа неотложной помощи Врачи, Американское гериатрическое общество, Американское общество боли, Общество академической неотложной медицины

Раскрытие информации: нечего раскрывать.

Благодарности

Главный редактор хотел бы поблагодарить д-ра Мохсину Субаир, бывшего старшего ординатора хирургического отделения, за помощь; Д-р Арчана Элангован, бывший старший ординатор хирургического отделения; и д-р Эванджелин Мэри Кируба Самуэль, младший ординатор отделения хирургии Института последипломного медицинского образования и исследований им. Джавахарлала (JIPMER), Пондичерри, Индия, при обновлении обзора этой статьи.

Пренатальные таламические волны регулируют размер кортикальной области до сенсорной обработки

Штаммы мышей

Мышей дикого типа, содержащихся на фоне C57BL / 6, использовали для профилирования экспрессии микрочипов, тогда как мышей дикого типа, содержащихся на ICR / CD-1 фон были использованы для экспериментов in vivo , исследований отслеживания, визуализации Ca 2+ , органотипических и первичных культур нейронов.День, когда была обнаружена вагинальная пробка, был обозначен как E0.5. R26 tdTomato Cre-зависимая линия мыши 61 была получена от Jackson Laboratories (инвентарный номер 007908). Линия Cre-зависимых мышей R26 GCaMP6f Cre была получена от Jackson Laboratories (инвентарный номер 024105). Линия TCA-GFP Tg была описана ранее 27 . Линия мыши R26 Kir2.1-mCherry была создана путем вставки CAG-lox-STOP-lox-Kir2.Кассета 1-mCherry-WPRE-pA в локус гена Rosa26 , как описано ниже. Каждая из репортерных мышей R26 несет локус Rosa26 с флоксированной кассетой STOP, которая предотвращает экспрессию указанного гена. Репортерных мышей скрещивали с индуцибельной таламической специфической Gbx2 CreER линией 62 , чтобы получить Gbx2 CreER / + ; R26 X / + двойной мутант. эмбрионы.Линия Gbx2 CreER экспрессирует CreER (T2) -ires-eGfp под контролем промотора Gbx2. Индукция тамоксифеном рекомбинации Cre у двойных мутантных эмбрионов осуществлялась путем введения тамоксифена (5-7 мг, растворенного в кукурузном масле, Sigma) через желудочный зонд на ст. E14.5 для специфической нацеливания на таламическое ядро ​​MGv или на E10.5 для мечения всех основных таламических клеток. ядра. R26 tdTomato были скрещены с линией ганглиозных клеток сетчатки Brn3b Cre (любезно предоставлено Dr.Vann Bennett) для получения Brn3b Cre / + ; R26 tdTomato / + двойные мутантные эмбрионы. Мышь Rorβ - / - была описана ранее 63 . Мыши Rorβ fl были скрещены с линией Nestin Cre , описанной ранее 64 (любезно предоставлено Angel Barco; Jackson 003771) для условного удаления Rorβ из всех нейронов.Все трансгенные животные, использованные в этом исследовании, содержались на генетическом фоне ICR / CD-1 или C57BL / 6, и все животные были генотипированы с помощью ПЦР. Комитет по исследованиям на животных Университета Мигеля Эрнандеса одобрил все процедуры на животных, которые проводились в соответствии с правилами Испании и Европейского Союза.

Генерация

R26 Kir2.1-mCherry Линия мыши

Ген человека Kir2.1 был слит с mCherry путем удаления стоп-кодона и вставки mCherry в рамку с помощью линкера NotI с использованием TOPO (Invitrogen) и обычное клонирование.Полученный в результате гибридный ген Kir2.1-mCherry был затем введен в нацеленную конструкцию Rosa26-CAG-lox-STOP-lox (Ai27, подарок от Hongkui Zeng, плазмида Addgene # 34630 (ссылки 61, 65), заменив существующей вставки с помощью обычного клонирования.Полученная нацеленная конструкция была электропорирована в клетки E14 ES (129Sv Ola), и колонии с успешной вставкой были агрегированы с эмбрионами на стадии морулы, полученными от инбредных (C57BL / 6 × DBA / 2) мышей F1, для получения химерных мышей стандартными процедурами.Химерных мышей скрещивали с мышами C57BL / 6J для получения передачи по зародышевой линии мышам F1. Затем этих мышей проверяли на экспрессию репортера путем скрещивания с мышью Cre. Два животных были отобраны из одного и того же клона ES, которые успешно прошли конструкцию через зародышевую линию и показали ожидаемую Cre-активированную экспрессию. В исследованиях, представленных здесь, эта линия была выведена на фоне ICR, чтобы усилить ее устойчивость к лечению тамоксифеном, как описано выше.

Гистология

Для гибридизации in situ и иммуногистохимии на постнатальных стадиях мышей перфузировали 4% параформальдегидом (PFA) в PBS (0.01 M), и их мозг был извлечен и зафиксирован в том же фиксаторе в течение ночи. Для иммуногистохимии эмбриональной ткани мозг вырезали и немедленно фиксировали в 4% PFA в течение ночи. Окрашивание цитохромоксидазой проводили для маркировки соматосенсорного пути. Кортикальные полушария криозащищались сахарозой и разрезались по касательной на 80–100 мкм с помощью криотома (MICRON). Срезы инкубировали в течение ночи при 37 ° C в растворе цитохромоксидазы (0,03% цитохрома c (Sigma), 0.05% 3,3'-диаминобензидина (Sigma) и 4% сахарозы в 0,01 М PBS). Иммуногистохимию проводили на срезах мозга вибратома или криотома, которые сначала инкубировали в течение 1 ч при комнатной температуре в блокирующем растворе, содержащем 1% BSA (Sigma) и 0,3% Triton X-100 (Sigma) в 0,01 M PBS. Затем срезы инкубировали в течение ночи при 4 ° C с первичными антителами: кроличьи анти-vGlut2 (1: 500, Synaptic Systems, # 135402), куриные анти-GFP (1: 3000; Aves Labs, # GFP-1020) и крысиный анти-RFP (1: 1000 Chromotek, # 5F8).Затем срезы трижды промывали в 0,01 M PBS и инкубировали в течение 2 ч при комнатной температуре со вторичными антителами: ослиные антитела против кролика Alexa546 (1: 500, ThermoFisher, # A10040), козлиные антитела Alexa488 против цыплят (1: 500, ThermoFisher). , # A11039), Alexa594 против кроликов и ослов (1: 500, ThermoFisher, # A21209), Alexa488 против кроликов против ослов (1: 500, ThermoFisher, # A21206). Наконец, срезы контрастировали флуоресцентным красителем для ядер Dapi (Sigma-Aldrich).

Гибридизацию in situ проводили на срезах вибратома 60–100 мкм с использованием меченного дигоксигенином антисмыслового зонда для Rorβ, Crabp2 и Cck. Гибридизацию проводили в течение ночи при 65 ° C, и после гибридизации срезы промывали и инкубировали в течение ночи при 4 ° C с антителом к ​​дигоксигенину, конъюгированным с щелочной фосфатазой (1 / 2500-1 / 4000, Roche). Для визуализации связывания РНК-зонда колориметрическую реакцию проводили в течение 1-2 дней при комнатной температуре в растворе, содержащем NBT (нитро-синий тетразолий хлорид, Roche) и BCIP (5-бром-4-хлор-3'-индолифосфат. п-толуидиновая соль, Roche). После проявления срезы промывали и помещали в Glycerol Jelly (Merck Millipore).

Исследования с отслеживанием красителя

Для отслеживания аксонов на постнатальных стадиях животных перфузировали 4% PFA в 0,01 M PBS, и их мозг вырезали и фиксировали в течение ночи в том же фиксаторе. Небольшие кристаллы DiI (1,1'-диоктадецил 3,3,3 ', 3'-тетраметилиндокарбоцианина перхлорат; Invitrogen) или DiA (4- [4- (дигексадециламино) стирил] - N -метилпиридиния иодида) были вставлены в отдельные первичные области коры, таламус, глаза или глазные полости, ядро ​​тройничного нерва и нижний бугорок.Красителям давали диффундировать при 37 ° C в растворе PFA в течение 1–4 недель. Затем срезы вибратома (60–100 мкм) контрастировали флуоресцентным ядерным красителем Dapi (Sigma-Aldrich).

In utero электропорация и in utero энуклеация

Для in utero электропорация беременным самкам (E11.5) проводили глубокую анестезию изофлураном для выполнения лапаротомии. Эмбрионы были обнажены, и третьи желудочки эмбрионального мозга визуализировались через матку с помощью оптоволоконного источника света.Полноразмерный Rorβ (щедрый подарок от Джеффри Маклиса) или конструкция остова концентрировали до 1,5 мкг мкл -1 и смешивали вместе с плазмидой, кодирующей Gfp в концентрации 0,9 мкг мкл -1 и 1% Быстрый зеленый (сигма). Плазмиды вводили в третий желудочек мозга каждого эмбриона с помощью инжектора (Nanoliter 2010, WPI). Для электропорации отрицательные и положительные палитры помещали возле головы эмбриона, и 5 квадратных электрических импульсов 45 В и 50 мс подавали через матку с интервалами 950 мс с использованием электропоратора с прямоугольными импульсами (CUY21 Edit: NepaGene Co., Япония). Затем хирургический разрез закрывали и позволяли эмбрионам развиваться до E18.5 или P6. Для анализа мозга на E18.5 его извлекали и фиксировали непосредственно в 4% PFA, тогда как мышей P6 сначала перфузировали 4% PFA, а затем обрабатывали для дальнейшего анализа.

Для энуклеации in utero ту же хирургическую процедуру выполняли беременным самкам на ст. E14.5, но после обнажения матки у половины эмбрионов каждого помета прижигали оба глаза. Хирургический разрез закрывали, и эмбрионам позволяли развиваться до послеродовых стадий.

Послеродовая стрижка усов

Для выполнения послеродовой стрижки усов у энуклеированных и контрольных мышей все усы срезали до уровня остевых волос с обеих сторон лица ежедневно от P0 до P4. Щенкам перфузировали 4% PFA, и их мозг вырезали и фиксировали в течение ночи тем же фиксатором.

Измерение областей мозга и анализ данных

Программное обеспечение ImageJ использовалось для измерения размера ядер таламуса, отдельных стволов и областей PMBSF.Для PMBSF и отдельных площадей ствола данные были нормализованы. В случае отдельных стволов каждая площадь ствола из заданных условий эксперимента была нормализована к соответствующей средней площади ствола в контроле, которая считалась равной 1. Для обеспечения согласованного анализа мы выбираем строки B1-3, C1-3, D1-4 и E1-4 для мышей, анализируемых на P4, в то время как B1-4, C1-5, D1-5 и E1-5 были выбраны для анализа старых мышей. Эти бочки постоянно присутствовали в срезах, полученных после обработки мозга.Для количественной оценки площади индивидуального ствола в электропорациях in utero Rorβ были отобраны мозги с целевой электропорацией в ядре VPM. Электропорированная сторона была разрезана коронарно для таламуса и по касательной для анализа коры. Мышь TCA-GFP использовалась для измерения размера первичных областей коры, а также площади и объема отдельных ядер таламуса. Чтобы количественно определить размер кортикальных областей, мышей TCA-GFP (контроль, embBE и MGv Kir ) перфузировали и обрабатывали непосредственно для получения изображений под стереофлуоресцентным микроскопом (Leica MZ10 F).Корональные серийные срезы 80–100 мкм были получены из головного мозга TCA-GFP, а отдельные ядра таламуса были иммуно помечены Gfp и Vglut2 для лучшего обнаружения структур. Исследователь Neurolucida от MBF Bioscience использовался для количественной оценки объема таламических ядер dLGN, VPM и MGv.

Органотипические таламические культуры

Для анализа экспрессии Rorβ после обработки KCl ex vivo беременных мышей умерщвляли и их эмбрионы извлекали на E16.5. Органотипические срезы культур эмбрионального таламуса получали, как описано ранее 66 .Коронковые срезы таламуса помещали на 5 ч при 37 ° C с 5% CO 2 в поддерживающей среде (глутамакс 1 ×, 45% раствор глюкозы 50 мМ, пенициллин / стрептомицин 100 ЕД на микролитр, 2% B27 и 95% нейробазал) . Для условий эксперимента добавляли 20 мМ KCl. После инкубации и для проведения экстракции РНК и количественной ПЦР ядра VPM вырезали и собирали по трем эмбрионам.

Микродиссекция ядер таламуса

Для сбора ткани из ядра VPM на неонатальных стадиях животных умерщвляли и вырезали их мозг в условиях отсутствия РНКазы для предотвращения деградации РНК.Срезы вибратома (200 мкм) получали и собирали в ледяной оксигенированной aCSF (117 мМ NaCl, 4,7 мМ KCl, 1,2 мМ MgCl 2 , 2,5 мМ CaCl 2 , 1,2 мМ NaH 2 PO 4 , 25 мМ NaHCO 3 и 0,45% D-глюкозы), и ядро ​​таламуса быстро подвергали микродиссекции под микроскопом. Ткань выдерживали в течение ночи при 4 ° C в RNA-Later (Sigma) и хранили при -80 ° C для последующей экстракции РНК.

Affymetrix microarray

Для гибридизации микроматрицы РНК экстрагировали из ткани, собранной с использованием набора RNeasy Mini Kit (Qiagen), включая этап DNaseI.Дополнительные РНК (два раунда амплификации) гибридизовали с массивами генома мышей Affymetrix GeneChip 430 v2, и интенсивность сигналов анализировали с использованием наборов Partek Genomics (Partek, Сент-Луис, Мичиган, США) и Matlab (The MathWorks Inc, Натик, Массачусетс, США, США). США). Данные были нормализованы с использованием RMA, и изменения в экспрессии генов> 1,5 раза со значением P <0,05 считались отражающими значительную разницу в экспрессии.

Очистка тотальной РНК и количественная ПЦР в реальном времени.

VPM таламическое ядро ​​вырезали из корональных срезов 300 мкм на E16.5. Суммарную РНК выделяли с использованием набора NucleoSpin RNA (Macherey-Nagel, Düren, Германия), промывали рекомендованными буферами и элюировали водой, не содержащей РНКаз, центрифугированием. Количественную оценку проводили по оптической плотности с использованием спектрофотометра Nanodrop 2000 (Thermo Scientific, Уилмингтон, Делавэр, США), а чистоту оценивали путем измерения отношения оптической плотности при 260 и 280 нм. Комплементарная ДНК (кДНК) была получена из 1 мкг тотальной РНК с использованием специального протокола для синтеза первой цепи кДНК в двухэтапной обратной транскрипции - ПЦР (Thermo Scientific Random гексамер № SO142, обратная транскриптаза RevertAid № EP0441, ингибитор РНКазы RiboLock № EO0381 , dNTP Mix # R0191) и хранили при -20 ° C.Количественную ПЦР проводили в системе для ПЦР в реальном времени StepOnePlus (Applied Biosystems, Фостер-Сити, Калифорния, США) с использованием 96-луночного планшета для быстрой реакции MicroAmp (Applied Biosystems) и смеси Power SYBR Green PCR Master Mix (Applied Biosystems). Экспрессию целевого гена Rorβ (идентификатор гена: 225998) определяли с помощью праймеров 5'-TTGTGGCGATAAATCCTCCG-3 'и 5'-TGCTGGCTCCTCCTGAAGAAT-3'. В качестве контроля мы использовали ген домашнего хозяйства Gapdh (идентификатор гена 14433), определенный с помощью праймеров 5'-CGGTGCTGAGTATGTCGTGGAGT-3 'и 5'-CGTGGTTCACACCCATCACAAA-3'.Готовили мастер-микс для каждого набора праймеров, содержащего соответствующий объем SYBR Green, праймеры и матричную кДНК. Все реакции проводили в двух экземплярах следующим образом: 95 ° C в течение 30 секунд и 45 циклов, при 95 ° C в течение 5 секунд и 60 ° C в течение 35 секунд. Эффективность амплификации для каждой пары праймеров и порог цикла (Ct) определялись автоматически с помощью программного обеспечения StepOne, v2.2.2 (Applied Biosystems). Уровень транскрипта Rorβ был представлен относительно сигнала Gapdh с поправкой на вариабельность при приготовлении библиотеки кДНК.

Первичная культура таламических клеток и трансфекция

Для создания первичных культур таламических нейронов беременных мышей умерщвляли и их эмбрионы извлекали на E14.5. Таламус рассекали, собирали в растворе Кребса, обрабатывали трипсином и затем диссоциировали с помощью отполированной огнем пипетки Пастера. В целом, 200 000–300 000 клеток на лунку, наконец, помещали в среду для посева (пируват натрия 1 мМ, глутамакс 1 ×, 45% раствор глюкозы 50 мМ, пенициллин / стрептомицин 100 ЕД на микролитр, 10% FBS и 86% MEM).Таламические нейроны трансфицировали с использованием набора Amaxa Basic Nucleofector Kit (VPI-1003) с 1 мкг полноразмерной конструкции Rorβ вместе с 1 мкг плазмиды, кодирующей Gfp . Контроли трансфицировали 1 мкг конструкции остова вместе с 1 мкг Gfp. После трансфекции культуры помещали на 10 дней в поддерживающую среду (Glutamax 1 ×, 45% раствор глюкозы 50 мМ, пенициллин / стрептомицин 100 Ед на микролитр, 2% B27 и 95% нейробазал) при 37 ° C с 5% CO 2 .Поддерживающую среду осторожно заменяли каждые 2 дня.

Количественная оценка ветвей аксонов и длины аксонов

Программное обеспечение ImageJ (плагин NeuronJ) было использовано для анализа ветвления аксонов in vitro . Случайные поля были выбраны из трех независимых экспериментов. Измеряли аксональные ветви нейронов, трансфицированных i-Gfp или Rorβ-i-Gfp . Критерии порядка ветвлений определяли по количеству разветвлений нейритов от тела клетки.Общую длину нейритов определяли путем суммирования длин всех нейритов для каждого нейрона. Для реконструкции одиночного аксона VPM электропорированных нейронов in vivo , коронарные срезы 60 мкм были вырезаны на вибратоме, и отдельные терминалы соматосенсорных ТЦА были реконструированы в отдельном корпусе из PMBSF с использованием Neurolucida explorer от MBF Bioscience. Площадь, занимаемую терминалами TCA, измерялась путем выделения кончиков каждого афферента с помощью программного обеспечения ImageJ.

Визуализация кальция в таламокортикальных срезах

Беременных взрослых мышей умерщвляли декапитацией после введения изофлуорана, а их эмбрионы были быстро извлечены и декапитированы.Постнатальный (P0-P3) и эмбриональный (E13.5-E18.5) мозг мыши немедленно вырезали и помещали в ледяной газовый раствор для срезов (95% O 2 и 5% CO 2 ), содержащий ( в мМ): 2,5 KCl, 7 Mg SO 4 , 0,5 CaCl 2 , 1 NaH 2 PO 4 , 26 Na 2 HCO 3 , 11 глюкоза и 228 сахароза. Наклонные срезы вибратома (толщиной 300–350 мкм: VT1200 Leica Microsystems Germany) получали по двум осям: (1) 45 ± 2 ° для сохранения соматосенсорных (VB) и визуальных (dLGN) таламокортикальных ядер и их связи; и (2) -45 ± 2 ° для сохранения слухового (MGv) и соматосенсорного (VB) таламических ядер.Во время периода восстановления срезы помещали при комнатной температуре в стандартный aCSF (119 NaCl, 5 KCl, 1,3 Mg SO 4 , 2,4 CaCl 2 , 1 Nah3PO4, 26 Na 2 HCO 3 , 11 глюкоза ) насыщены газами 95% O 2 и 5% CO 2 .

Для нанесения красителя срезы инкубировали в течение 30–45 минут в 2 мл газированного aCSF (35–37 ° C) с 10 мкл кальциевого красителя Cal520 AM (AAT Bioquest) (1 мМ в ДМСО + 20% плуроновой кислоты) . Загруженные срезы оставляли на 1 ч при комнатной температуре в газированном CSF.Срезы мышей Gbx2 CreER / + ; R26 GCaMP6-EGFP / + не требовали инкубации. Затем срезы помещали в записывающую камеру вертикального столика Leica DM LFSA, перфузируемого (3,7 мл в минуту) нагретым (32 ° C) и насыщенным газом CSF. Интервальная запись динамики Ca 2+ была получена с помощью водных иммерсионных объективов (L 10 × /0,30 N.A. Leica, L 20x / 0,50 Leica) или сухих объективов (HCX PL FLUOTAR 5 × / 0,15 Leica, PL FLUOTAR 2.5 × /0,07) после возбуждения срезов на длине волны 492 нм ртутной дуговой лампой. Мы получали изображения с помощью цифровой камеры CCD (Hamamatsu ORCA R2 C10600 10B), используя межкадровый интервал 250 мс и время экспозиции 200 мс. Длина каждой интервальной записи составляла 3000 кадров.

Фармакологические эксперименты проводились с добавлением лекарств в нагретый (32 ° C), газированный (95% O 2 и 5% CO 2 ) и перфузированный (3,7 мл в минуту) aCSF в записывающей камере. Карбеноксолон (динатриевая соль карбеноксолона, Sigma) применяли в концентрации 50 мкМ.Тетродоксин (Abcam) получали в концентрации 1 мкМ, а мефлохин (Mefloquine Hydrochloride, Sigma-Aldrich) в концентрации 25 мкМ. Высокую концентрацию калия применяли путем добавления KCl к aCSF (содержащему 5 мМ KCl) для достижения концентраций 9, 10 и 12 мМ. Записи производились через 5 мин после начала применения препарата.

Анализ данных визуализации кальция

Данные были экспортированы из программного обеспечения сбора данных Leica MM Fluor 1.6.0 в виде покадровых последовательностей изображений в формате TIFF с длительностью 3000 кадров и проанализированы в ImageJ и Matlab.Следы флуоресценции отдельных клеток (записанные с объективом L 20 × /0,50) анализировали с помощью специально разработанных процедур в Matlab 67 , и события кальция были идентифицированы с использованием асимметричных наименьших квадратов базовых линий и порогов триггера Шмитта. Мы использовали 5% базового шума в качестве верхнего порога и 2% в качестве нижнего порога. Идентификация начала и смещения позволила создать растровые графики и оценить степень сетевой корреляции. Мы определяем «совместную активность» как означающие переходные процессы, возникающие одновременно в пределах временного окна ± 1 кадр (500 мс).Корреляционный тест выявил случаи, когда значительная часть ячеек сети была активна синхронно. Минимальный размер этих групп для каждого сеанса записи определялся соответствующими смоделированными случайными наборами. Для каждого из 1000 наборов случайных данных мы подсчитали количество коактивных ячеек в каждом временном окне, и это определило распределение ожидаемых количеств коактивных ячеек из-за случайной активности.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *