Технические характеристика лада гранта: габаритные размеры, вес, двигатель, клиренс, расход топлива

Содержание

Технические характеристики Новая Granta седан

  • Кузов
  • Колесная формула / ведущие...

  • Расположение двигателя

  • Тип кузова / количество...

  • Количество мест

  • Длина / ширина / высота, мм

  • База, мм

  • Колея передних / задних колес,...

  • Дорожный просвет под силовым агрегатом (полная...

  • Объем багажного отделения в пассажирском / грузовом...

  • Двигатель
  • Код двигателя

  • Тип двигателя

  • Система питания

  • Количество, расположение...

  • Рабочий объем, куб. см

  • Максимальная мощность, кВт (л.с.) / об....

  • Максимальный крутящий момент, Нм / об....

  • Рекомендуемое топливо

  • Динамические характеристики
  • Максимальная скорость, км/ч

  • Время разгона 0-100 км/ч, с

  • Расход топлива
  • Городской цикл, л/100 км

  • Загородный цикл, л/100 км

  • Смешанный цикл, л/100 км

  • Масса
  • Снаряженная масса, кг

  • Технически допустимая максимальная масса,...

  • Максимальная масса прицепа без тормозной системы /...

  • Объем топливного бака, л

  • Трансмиссия
  • Тип трансмиссии

  • Передаточное число главной...

  • Подвеска
  • Независимая, типа Макферсон...

  • Задняя

  • Рулевое управление
  • Рулевой механизм

  • Шины
  • Размерность

  • Технические характеристики / LADA Granta Cup / Для кольцевых гонок / Автомобили / TMS Motorsport

    Общая информация

    Модель гоночного а/м219000-027-01
    Модель базового а/м219000-020-00
    НазначениеАвтомобильные кольцевые гонки
    Зачетная группа«Супер-продакшн»
    ОмологацияRAF A 1101
    Тип кузоваседан
    Число мест1
    Снаряженная масса (кг)1030
    Полная с пилотом (кг)Min - 1050, max - 1195

    Модель гоночного а/м: 219000-027-01

    Модель базового а/м: 219000-020-00

    Назначение: Автомобильные кольцевые гонки

    Зачетная группа: «Супер-продакшн»

    Омологация: RAF A 1101

    Тип кузова: седан

    Снаряженная масса (кг): 1030

    Полная с пилотом (кг): Min - 1050, max - 1195

    Габаритные размеры

    Длина, мм4275
    Ширина, мм1810
    Ширина над передней осью1810
    База, мм2555

    Ширина над передней осью: 1810

    Двигатель

    Модель двигателя211262-045-01
    Базовый ДВС21126-081
    Рабочий объём1,6 л (1597 см2), рядный, 4 цилиндра
    Диаметр цилиндра, мм82. 0 мм
    Ход поршня, мм75.6 мм
    Степень сжатия9,1
    Мощность247 лс. при 5700 об/мин.
    Максимальный крутящий момент310 н.м. при 5500-6200 об/мин.
    Максимальные обороты7000 об/мин.
    Топливос октановым числом не менее 100

    Модель двигателя: 211262-045-01

    Базовый ДВС: 21126-081

    Рабочий объём: 1,6 л (1597 см2), рядный, 4 цилиндра

    Диаметр цилиндра, мм: 82.0 мм

    Ход поршня, мм: 75.6 мм

    Степень сжатия: 9,1

    Мощность: 247 лс. при 5700 об/мин.

    Максимальный крутящий момент: 310 н.м. при 5500-6200 об/мин.

    Максимальные обороты: 7000 об/мин.

    Топливо: с октановым числом не менее 100

    Конструктивные особенности

    Поршенькованый из алюминиевого сплава
    Шатунстальной L=128,6 мм, мин. Н-образный
    Контроллер управления ДВСуправления ДВС - «Корвет» производства АБИТ
    Впускной коллекторTMS
    Система охлажденияИнтеркуллер
    Насос масляныйувеличенной производительности
    Картер масляныйстальной сварной
    Шестерни насосастальной
    Воздушный фильтрнулевого сопротивления
    Опоры двигателяжесткие
    Топливный бакоригинальный

    Поршень: кованый из алюминиевого сплава

    Шатун: стальной L=128,6 мм, мин. Н-образный

    Контроллер управления ДВС: управления ДВС - «Корвет» производства АБИТ

    Впускной коллектор: TMS

    Система охлаждения: Интеркуллер

    Насос масляный: увеличенной производительности

    Картер масляный: стальной сварной

    Шестерни насоса: стальной

    Воздушный фильтр: нулевого сопротивления

    Опоры двигателя: жесткие

    Топливный бак: оригинальный

    Трансмиссия

    КПП7796
    Передаточные числаДанные приведены в таблице на фото
    Сцеплениеоднодисковое металлокерамическое диаметра 184 мм
    Привод переключениясеквентальный с системой Power Shift*
    Приводы колесс промежуточным валом и опорой
    Дифференциалсамоблокирующийся

    Передаточные числа: Данные приведены в таблице на фото

    Сцепление: однодисковое металлокерамическое диаметра 184 мм

    Привод переключения: секвентальный с системой Power Shift*

    Приводы колес: с промежуточным валом и опорой

    Дифференциал: самоблокирующийся

    Рулевое управление

    Рулевое управлениес гидроусилителем

    Рулевое управление: с гидроусилителем

    Тормозная система

    Тормозная системаДвухконтурная без системы АБС
    Передний тормоздиск Ø 330х28 мм. вентилируемый плавающий с алюминиевой ступицей, суппорт 4-х поршневой AP
    Задний тормоздиск Ø 260х9,5 мм., суппорт 2-х поршневой AP
    Регулятор тормозных усилийAP Racing

    Тормозная система: Двухконтурная без системы АБС

    Передний тормоз: диск Ø 330х28 мм. вентилируемый плавающий с алюминиевой ступицей, суппорт 4-х поршневой AP

    Задний тормоз: диск Ø 260х9,5 мм., суппорт 2-х поршневой AP

    Регулятор тормозных усилий: AP Racing

    Подвеска

    Подрамниксварной усиленный
    Рычаги передней подвескисварные с регулировкой развала/схождения
    Кулаки передней подвескиоригинальные
    Ступица передних колесстальная 4 шпилек на Ø98 мм
    Рычаги задней подвескис упругой поперечиной с регулировкой развала/схождения
    Стабилизаторыоригинальные регулируемые
    Амортизаторыс регулировкой усилия; по 2-м скоростям сжатия; по 1-ой скорости отбоя
    Пружинысоставные с подпружинником

    Подрамник: сварной усиленный

    Рычаги передней подвески: сварные с регулировкой развала/схождения

    Кулаки передней подвески: оригинальные

    Ступица передних колес: стальная 4 шпилек на Ø98 мм

    Рычаги задней подвески: с упругой поперечиной с регулировкой развала/схождения

    Стабилизаторы: оригинальные регулируемые

    Амортизаторы: с регулировкой усилия; по 2-м скоростям сжатия; по 1-ой скорости отбоя

    Пружины: составные с подпружинником

    Колеса

    Колеса9,0 – 17” кованые из алюминиевого сплава РСD 98 мм.; ЕТ 22 мм
    Шины245-610-17 типа Слик

    Колеса: 9,0 – 17” кованые из алюминиевого сплава РСD 98 мм.; ЕТ 22 мм

    Шины: 245-610-17 типа Слик

    Кузов

    Каркас безопасностивварной из труб стальных 30ХГСА
    ОмологацияRAF
    Вес48 кг

    Каркас безопасности: вварной из труб стальных 30ХГСА

    Омологация: RAF

    Специальное оборудование

    Сиденья омологированные+
    Ремни безопасности 6-ти точечные+
    Опоры сидений металлические омологированные+
    Дополнительные замки капота+
    Система пожаротушения+
    Травмобезопасные накладки на каркас+
    Флокированная панель приборов+ (опционное предложение)
    Защитная сетка на окно водителя+
    Люк в крышу+
    Поликарбонат вместо стекол+
    Приборная панель AIM+

    Сиденья омологированные: +

    Ремни безопасности 6-ти точечные: +

    Опоры сидений металлические омологированные: +

    Дополнительные замки капота: +

    Система пожаротушения: +

    Травмобезопасные накладки на каркас: +

    Флокированная панель приборов: + (опционное предложение)

    Защитная сетка на окно водителя: +

    Поликарбонат вместо стекол: +

    Приборная панель AIM: +

    Технические характеристики Лада Гранта Драйв Актив

    Технические характеристики Лада Гранта Драйв Актив

    150

    ТХ Лада Гранта Драйв Актив: габариты кузова, объём двигателя, расход бензина и другие технические характеристики Lada Granta Drive Active

    485687

    Гарантия лучшей цены

    Автомобили с ПТС в наличии

    Подарок на выбор при покупке

    Конфигуратор

    чёрная пантера

    голубая планета

    только до 12 Апреля

    Кредит от 3 687 Р/мес

    на Granta Drive Active при покупке с сайта

    Ваш персональный менеджер свяжется с вами в течение 5 минут

    Кредит от 1. 9%

    Одобрили 86 719 заявок

    Рассрочка от 0%

    Ответ за 30 мин

    Lada Granta Drive Active


    Технические характеристики
    Характеристика 1.6 MT
    Кратко
    Объем 1.6 л
    Мощность 106 л.с.
    Коробка механика
    Тип двигателя бензин
    Топливо АИ-95
    Привод передний
    Разгон 10. 5 с
    Расход 6.5 л
    Общая информация
    Страна марки Россия
    Класс автомобиля B
    Количество дверей 4
    Количество мест 5
    Размеры, мм
    Длина 4280
    Ширина 1700
    Высота 1450
    Колёсная база 2476
    Клиренс 162
    Ширина передней колеи 1436
    Ширина задней колеи 1414
    Размер колёс 185/55/R15
    Объём и масса
    Объем багажника мин/макс, л 520/815
    Объём топливного бака, л 50
    Снаряженная масса, кг 1075
    Полная масса, кг 1560
    Трансмиссия
    Коробка передач механика
    Количество передач 5
    Тип привода передний
    Подвеска и тормоза
    Тип передней подвески независимая, пружинная
    Тип задней подвески полунезависимая, пружинная
    Передние тормоза дисковые вентилируемые
    Задние тормоза барабанные
    Эксплуатационные показатели
    Максимальная скорость, км/ч 184
    Разгон до 100 км/ч, с 10. 5
    Расход топлива, л город/трасса/смешанный 8.7/5.2/6.5
    Марка топлива АИ-95
    Экологический класс Euro 5
    Двигатель
    Тип двигателя бензин
    Расположение двигателя переднее, поперечное
    Объем двигателя, см³ 1596
    Тип наддува нет
    Максимальная мощность, л. с./кВт при об/мин 106 / 78 при 5800
    Максимальный крутящий момент, Н*м при об/мин 148 при 4200
    Расположение цилиндров рядное
    Количество цилиндров 4
    Число клапанов на цилиндр 4
    Система питания двигателя распределенный впрыск (многоточечный)
    Степень сжатия 11
    Диаметр цилиндра и ход поршня, мм 82 × 75. 6

    Другие автомобили Lada

    KIA

    Lada

    Hyundai

    Renault

    Volkswagen

    Nissan

    Сhangan

    Chery

    Chevrolet

    Datsun

    Faw

    Все о… Лады | Guitar.

    com

    Хотя некоторые гитаристы экспериментировали с безладовыми гитарами, они никогда не прижились так, как безладовые басы. Кажется, мы застряли с проблемами, и для подавляющего большинства из нас это, наверное, к лучшему.

    Лады делят гриф на легко различимые полутоновые интервалы, которые говорят нам, где находятся ноты. Инструменты семейства скрипок (не считая виолончели) имеют безладовые накладки на грифы, поэтому умение и точность очень важны для гармоничной игры.Обратной стороной этого является то, что они обычно берут только одну ноту за раз - как может подтвердить любой, кто пытался научиться играть на скрипке в школе, это и так достаточно сложно ... но представьте, что вы пытаетесь сыграть четырех нотные аккорды в мелодии на виолончели. !

    Учитывая, что работа с аккордами является важным компонентом игры на гитаре, для нас одинаково важны лады. У этого есть недостаток - если вы хотите исследовать микротоны или экзотические восточные гаммы, вы не сможете сделать это на гитаре с традиционным ладом, если только вы не играете слайдом, но это не является серьезной проблемой для большинства.

    У самых ранних гитароподобных инструментов не было ладов, но когда уд превратился в лютню, мастера стали привязывать струны или кишки к шее. Предположительно, они были влажными и сжимались и стягивались по мере высыхания. Игроки чувствовали бы лигатуры спереди и сзади, и с узлами на нижнем крае грифа лучше всего было бы избежать наматывания большого пальца.

    Когда мастера начали вставлять лады на гриф, полоски из кости стали обычным явлением. Кость, возможно, была достаточно прочной для струн, но с появлением струн с проволочной обмоткой металл стал предпочтительным материалом для ладов и с тех пор остается таковым.

    Форма вверх

    Металлические лады самого раннего стиля выглядят совершенно иначе, чем те, которые мы знаем и любим сегодня. Эти ранние типы широко известны как «лады», потому что они представляют собой металлические стержни с плоскими сторонами, которые закруглены сверху и снизу и вдавлены в пазы ладов. То, что вы видите над накладкой грифа, идентично части, встроенной в прорезь, поэтому они прямоугольные в поперечном сечении.

    Для них требуются более широкие прорези, чем для современной ладовой проволоки, поэтому прорези фрезерованы, а не выпиливаются в гриф.Этот тип лада больше всего ассоциируется с винтажной акустикой, и в частности с Martins. Одно время Martin даже изготавливал свой собственный лад, но постепенно отказался от барных ладов в середине 1930-х годов.

    Джон Д'Анджелико, как сообщается, продолжал закупать проволочные лапы у Martin в течение многих лет после того, как компания постепенно отказалась от них в своих гитарах, и сегодня лапы для ручек все еще доступны для реставрационных работ. Есть даже группа акустических музыкантов, которые предпочитают винтажный вид и стиль бара.

    Однако, запатентованный в 1920-х годах Клинтоном Ф. Смитом, «T-образная лада» вскоре стала отраслевым стандартом - и остается таковой по сей день. Буква «Т» обозначает запах, а в поперечном сечении Т-образный лад очень напоминает гриб. Хвостовик намного уже, чем лада планки, и он был спроектирован так, чтобы вставляться в прорези, вырезанные на грифе. Хвостовики удерживают свое положение благодаря фрикционной посадке, чему способствуют зазубрины, которые помогают ему захватывать стороны и не дают ладу выйти из прорези.

    Хвостовики настолько узкие, что было бы почти невозможно скруглить края, если бы часть лада над доской была такой же узкой. Они также перерезали струны и почувствовали себя очень неуютно.

    Вместо этого Смит изобрел более широкую верхнюю часть, названную короной, с плоской поверхностью, прилегающей к накладке грифа, и закругленной верхней частью. Закругление заводной головки делает Т-лады более удобными, чем лады с прямоугольными краями, и обеспечивает более точную интонацию. Это связано с тем, что точка взлета струны находится непосредственно над прорезью, а не на краю стержня со стороны гайки.

    Размер имеет значение

    Хотя сейчас большинство ладов являются Т-образными, не все они созданы равными. Это то, что вам следует учитывать как игроку, но оно абсолютно необходимо для тех, кто занимается ремонтом гитар. Коронки различаются по ширине и высоте, что влияет на ощущение гитары. Некоторые также предлагают изменить тон.

    Высокие коронки создают ощущение зубчатой ​​доски на грифе. Вы действительно можете просунуть пальцы под струны для облегчения бендов и контролируемого вибрато.Недостатком является то, что когда вы скользите вверх и вниз по шее, это может ощущаться как лежачий полицейский под пальцами, а если вы нажимаете слишком сильно, когда вы нервничаете, ноты будут звучать резко.

    Вот почему высокий и широкий может быть предпочтительнее высокого и худого. Более широкие коронки позволяют получить более плавный изгиб, поэтому лады будут казаться мягче, когда ваши пальцы будут двигаться по доске. Это одна из причин, почему так много рок-музыкантов и шредеров предпочитают широкие и высокие лады.

    Традиционно Fender использовал более тонкую проволоку, чем Gibson, и если вы покупаете у поставщика, такого как Allparts UK или Stewart-MacDonald, вы можете прочитать размеры, чтобы определить наилучшее соответствие, если вы делаете винтажную реставрацию или пытаетесь улучшить общее ощущение .Есть также технические аспекты, которые следует учитывать, если вы или ваш мастер заменяете лады. После удаления исходных ладов рекомендуется измерить глубину и ширину лада, чтобы определить, будет ли новая проволока, которую вы хотите использовать, совместима с существующими прорезями для ладов.

    Для этого вам понадобится микрометр или несколько цифровых штангенциркулей. Если выступы слишком узкие, лады не останутся в прорезях, а если они слишком широки для прорезей, вы можете прижать гриф к дуге, что сделает гитару непригодной для игры.Точно так же, если они будут слишком высокими, лады не будут сидеть должным образом, и вы увидите зазоры между короной и накладкой грифа. Конечно, вы можете прорезать прорези для ладов глубже и шире, но этого лучше избегать, если только невозможно найти шнур, который подходит к существующим прорезям.

    Тональные черты

    В 1950-е годы многие джазовые музыканты предпочитали ультранизкие лады. Les Paul Custom того периода продавался как "The Fretless Wonder", и в эпоху безгибных перемоток Gs низкие лады имели смысл.Однако игра на гитаре эволюционировала, и винтажные гитары со сверхнизкими ладами могут создавать трудности для блюзовых и рок-исполнителей. Отношение к оригинальности ладов изменилось в мире винтажа, и в наши дни профессиональный рефрет считается приемлемым - даже желательным - на всех, кроме наиболее исторически значимых и оригинальных образцов.

    Один из многих мифов, связанных со Стиви Рэем Воном, заключается в том, что жирные лады равны жирному тону. Предположительно, он предпочитал массивную струну для ладов - даже с басовыми ладами на шее.Без сомнения, они обеспечили дополнительный контроль и сцепление, когда он согнул эти струны калибра 0,013, но действительно ли лады так сильно влияют на звучание?

    Предположим, что лады выровнены, а все коронки правильно закруглены, площадь физического контакта между струнами и ладами будет одинаковой, независимо от ширины коронки. Это может измениться по мере того, как лады приобретут одежду для игр, потому что более широкая и плоская поверхность может снизить четкость и четкость. Другими словами, гитара может звучать мягче и менее ярко.

    Вы также можете возразить, что жирные лады могут добавить массы и жесткости шее, но мы говорим о прекрасных полях, которые могут быть очевидны только при игре без подключения к сети. Учитывая все обстоятельства, при выборе лада мы бы предположили, что чувство игры и долговечность являются более важными факторами, чем тон.

    Материальные удовольствия

    Хотя иногда также используется латунь, подавляющее большинство гитарных ладов сделано из нейзильбера, также известного как немецкое серебро.Скорее всего, это сбивает с толку, что на самом деле серебро не связано с германским серебром - на самом деле мельхиор представляет собой сплав меди и никеля. Простой.

    Пропорции имеют тенденцию меняться, но большая часть ладовой проволоки содержит около 18 процентов никеля для прочности и 80 процентов меди, чтобы сделать его достаточно гибким и достаточно мягким, чтобы его можно было опиливать, формировать и полировать для использования. Лады Jescar NS, например, содержат только 62% меди, 18% никеля и 20% цинка.

    Некоторым людям не повезло, что они страдают аллергией на никель, поэтому в таких случаях можно использовать лады из нержавеющей стали.Нержавеющая сталь, как известно, плохо подходит для инструментов и требует больших физических усилий для выравнивания, придания формы и полировки. Таким образом, резьба по резьбе из нержавеющей стали обычно обходится дороже.

    С другой стороны, лады из нержавеющей стали обеспечивают супергладкую поверхность для гибки струн и сохраняют свой блеск на неопределенный срок. Сталь к тому же настолько прочная, что вам, возможно, больше никогда не понадобится перезарядка, но занятые игроки могут в конечном итоге тратить намного больше на струны - особенно те, кто использует чистый никель, потому что он мягче стали.Некоторые музыканты также считают, что лады из нержавеющей стали могут добавить яркости тону.

    Золотая проволока EVO

    Jescar - еще один вариант, изготовленный из сплава, специально разработанного для людей с аллергией на никель. Говорят, что она прочнее, чем никель, и очень долговечна, но легче в работе, чем нержавеющая сталь.

    Как и все остальное, лады - дело личного вкуса, но когда вы найдете правильное сочетание размера и материала для вас, это может значительно улучшить ваши впечатления от игры.

    10 фактов о грифе, которые нужно знать

    Вы когда-нибудь чувствовали себя немного не в своей тарелке или просто терялись в определенных частях грифа гитары? Вы точно не одиноки.

    Подумайте вот о чем: стандартно настроенная 6-струнная гитара с 22-ладовой панелью имеет диапазон чуть меньше четырех октав и содержит пять средних до, в то время как полноразмерная фортепианная клавиатура охватывает более семи октав, но имеет только один средний C. Что с этим?!? Это просто природа инструмента.По своей конструкции клавиатура относит любую заданную высоту звука к одной клавише, в то время как гитарный гриф предлагает от одной до пяти различных положений струн и ладов для одной и той же ноты. Эти многократные повторения одной и той же высоты звука предоставляют гитаристам множество вариантов того, где сыграть любую данную ноту, но они также вызывают значительную путаницу у новичков или музыкантов, которые часто чувствуют себя потерянными выше 5-го лада, особенно на внутренних четырех струнах.

    Запоминание адреса (т. Е. Местоположения) каждой записи на грифе может занять годы, но есть способы ускорить процесс.Хотите знать, как найти и удержать ориентацию в любом месте грифа? Во-первых, вам нужно ...

    1. ЗНАТЬ СВОИ ОСНОВЫ

    Давайте начнем с обзора некоторых элементарных музыкальных знаний. Основными единицами измерения в западной музыке являются полутон или полутон, что на гитаре переводится на расстояние в один лад, и целый шаг, или целый тон, который покрывает два лада. Музыкальный алфавит состоит из семи естественных нот: A, B, C, D, E, F и G. Все эти смежные ноты разнесены на целый шаг, за двумя исключениями: B-to-C и E-to. -F, которые являются полушагами.Имея все это в виду, пришло время…

    (Изображение предоставлено в будущем)

    2. КАРТА ТЕРРИТОРИИ

    Сравните гриф гитары с клавиатурой фортепиано, родиной теории музыки, и вы обнаружите, что в то время как клавиатура разделяет естественные и случайные ноты (диез и бемоль - подробнее об этом через минуту) на аккуратные белые и черные клавиши, которые лежат вдоль горизонтальной плоскости и повторяют каждую октаву, гитара не предлагает такой простой способ распознавания нот. Многие традиционные методы для начинающих охватывают ноты до 3-го или 5-го ладов, но выше этого мы, по сути, предоставлены нашим собственным устройствам.Помещенные на полную сетку грифа или матрицу, естественные ноты проявляются, как показано на РИСУНКЕ 1. Конечно, это много нот для запоминания, но первое, что нужно запомнить, это то, что если вы не измените настройки, адрес каждой ноты будет постоянным. Они никуда не денутся. А что насчет всех этих пустых пространств?

    3. ДОБАВЛЕНИЕ СЛУЧАЙНЫХ СЛУЧАЙНЫХ ЦЕЛЕЙ

    Оставшиеся пять тонов в пределах любой октавы (с шагом 12 полутонов) аннотируются случайными или резкими и плоскими символами.Диез (#) поднимает ноту на полтона, а бемоль (b) понижает ее на полтона. Энгармонические ноты возникают, когда две разные случайности используются для обозначения одной и той же высоты звука, то есть A # = Bb, C # = Db, D # = Eb, F # = Gb и G # = Ab. Сетка, показанная на РИСУНКЕ 2, заполняет дыры на РИСУНКЕ 1 всеми недостающими случайностями, завершая «общую картину». Думайте об этом как о своей вселенной. А теперь давайте начнем разбирать этот гигантский кластер *** и выясним, что же здесь происходит на самом деле.

    (Изображение предоставлено в будущем)

    4.ПОВТОРИТЕ СЕБЯ

    РИСУНОК 3 показывает пять средних до гитары на пяти разных струнах. (Факт: стандартная гитарная нотация звучит на октаву ниже, чем написано.) Обратите внимание на то, что ноты на любой паре соседних струн эквидистантны (на расстоянии пяти ладов друг от друга), за исключением второй и третьей струн, где расстояние уменьшается на один лад. Как только вы поймете, что эта взаимосвязь всегда сохраняется независимо от того, с какой ноты вы начинаете, вы можете найти унисоны на более высоких или более низких строках, используя ту же формулу, за исключением крайних низких и высоких регистров, где ноты появляются только один раз.(Лик дня: выберите любую высоту звука, которая появляется четыре раза, и сыграйте ее последовательно на четырех соседних струнах. Повторите много раз в любом направлении как можно быстрее.) Затем мы добавляем несколько октав и…

    5. ВХОДИТЕ В МАТРИЦУ

    Любую ноту можно найти в различных октавах в шести местах между открытой позицией и 12-м ладом. Поскольку гриф повторяется на октаву выше, начиная с 13-го лада, так что делайте любые ноты и формы, которые вы применяете к нему. На РИСУНКЕ 4 мы точно определяем на матрице все C ниже 12-го лада и соединяем их, чтобы сформировать шеститочечный шаблон, который можно перемещать в любое положение на грифе.Подобно созвездию, эта «Большая Медведица» сохраняет свою форму, перемещаясь по разным позициям в матрице нот. По мере того, как «ковш» движется к гайке, любые точки формы, исчезающие ниже открытого положения, снова появляются на октаву выше, ниже 12-го лада. И наоборот, любые точки, которые возвышаются над 12-м ладом, снова появляются, начиная с 1-го лада. Давайте двигаться и…

    6. ПУТЕШЕСТВУЙТЕ ПО ПРОСТРАНСТВАМ

    Видите, как корни на РИСУНКЕ 5 появляются на пятой и третьей нитях? Это потому, что мы сдвинули весь корневой шаблон на одну ссылку вниз и добавили недостающую на одну октаву выше.Это отображает все шесть А между открытой и двенадцатой позициями и создает визуальную вариацию в нашей «Большой Медведице», но все, что мы на самом деле делаем, это запускаем один и тот же шаблон с другой точки отсчета. РИСУНОК 6 перемещает шаблон вниз по другой ссылке, чтобы показать шесть G, а РИСУНОК 7 и 8 продолжают процесс с E и D соответственно, пока мы не вернемся на полный круг к C. Поместите шаблон в любое место на 12-ладовой сетке, чтобы сразу найти все. шесть мест для любой ноты, а затем повторите это, начиная на 12 ладов выше, чтобы охватить весь диапазон гитары.Зачем использовать C, A, G, E и D в качестве ориентиров? Рад, что ты спросил!

    (Изображение предоставлено: Future)

    7. ПОВТОРИТЕ СВОИ КОРНИ

    Наша «Большая Медведица» также предоставляет подвижный шаблон всех корневых местоположений и соединений для пяти основных форм основных аккордов открытой струны - C, A , G, E и D. (Что это за заклинание?) Они определяются и называются по их наименьшим возможным позициям на грифе, и каждая форма использует различную конфигурацию основных нот, что подтверждается освежающими память сетками аккордов на РИСУНКЕ 9. Всегда и без исключения корни этих форм аккордов располагаются следующим образом:

    Форма «C» = корни пятой и второй струн.

    Форма «А» = корни на пятой и третьей струнах.

    Форма «G» = корни на шестой, третьей и первой струнах.

    Форма «E» = корни на шестой, четвертой и первой струнах.

    Форма «D» = корни на четвертой и второй струнах.

    (Я упоминал всегда и без исключения?) Выровняйте их всех по сетке и…

    8.СОЕДИНИТЕ ТОЧКИ

    РИСУНОК 10 показывает, как формы C, A, G, E и D соединяются, чтобы сформировать пять различных голосов C-аккордов между 1-м и 13-м ладами. Это объединяет гриф и показывает, как каждая форма соединяется через одну или две корневые ноты. Спой со мной сейчас: «Форма« C »связана с формой« A », форма« A »связана с формой« G », форма« G »связана с формой« E », форма« E » форма соединена с формой «D», форма «D» соединена с формой «C» »и так далее.Теперь посмотрите глубже и…

    9. СДВИГАЙТЕ ВЗГЛЯД

    Используя разные графические символы для каждого тона аккорда, как на РИСУНКЕ 11, легко увидеть, как эти пять соединяющих форм C-аккорд возникают в открытом положении с круговые корни C, ромбовидные Es и квадратные G происходят одновременно. Потренируйтесь разбивать каждый тон аккорда на отдельный дискретный «диппер» - для Cmaj7 сыграйте все основные тона (Cs), затем все тройки (Es), все пятерки (G) и все семерки (B), чтобы создать уникальные арпеджио.

    10. ИЗМЕНИТЬ КАРТУ

    Наконец, давайте еще раз взглянем на рисунки 1 и 2 с более осознанной точки зрения. На РИСУНКЕ 12 12-ладовый шаблон естественных нот организован в пять различных шаблонов шкалы до-мажор, каждый из которых придерживается основных позиций соответствующей формы аккорда. Весь шаблон можно сдвинуть вверх или вниз для транспонирования всего грифа на любую тональность - на полшага вверх для C # / Db, на целый шаг вверх для D, на полтора шага вверх для D # / Eb, и так далее. Конечно, это все виртуальные точки и маркеры положения, поэтому мы должны научиться визуализировать эти модели по запросу. «Большая Медведица», пять основных форм аккордов и пять основных моделей гаммы (которые также содержат все семь режимов) обеспечивают универсальную точку отсчета, исходящую из любой ноты в любой позиции. Запомните их, и вы больше никогда не почувствуете себя потерянным!

    (Изображение предоставлено в будущем)

    Не волнуйтесь! 10 вещей, которые вы должны знать о ладах

    Не волнуйтесь! 10 вещей, которые вы должны знать о ладах

    Тед Дроздовски

    |

    07.05.2012

    Лады легко принять как должное. Они входят в стандартную комплектацию каждой гитары и не имеют такого «вау» фактора, как инкрустации или рисунки под дерево. Неудивительно, что многие игроки мало обращают на них внимания - пока что-то не пойдет не так.

    Эти банальные полосы из металлической проволоки невероятно важны, когда речь идет о играбельности, атаке, тоне и других факторах. Вот 10 вещей, которые вам нужно знать о ладах:

    • Как работают лады: Фактическое рассмотрение того, что делает каждая часть вашей гитары, а не просто принятие ее присутствия, может привести к ценным открытиям.

    Прижатие струны к ладу уменьшает длину вибрации этой струны до расстояния между точкой давления и бриджем, тем самым контролируя высоту тона. Почти на каждом западном ладовом инструменте расстояние между ладами составляет полутон одинаковой темперации, что обеспечивает легкое получение сильных аккордов и отдельных нот, которые соответствуют обычным ожиданиям нашего полушария в отношении ритмических звуков и мелодий. Понимание достоинств и ограничений, создаваемых порядком ладов, открывает двери для способов избежать их ограничений, таких как сгибание струн, игра на слайде, использование ударных стержней, углубление в расширенную технику или опробование безладовых инструментов.

    • Из чего они сделаны: Лады обычно изготавливаются из никель-серебряного или никелево-стального сплава или, что реже, латуни, медного сплава или нержавеющей стали. Чем тверже и плотнее материал, с нержавеющей сталью наверху и мягким никелем внизу, тем ярче и резче должны звучать ноты, сыгранные на гитаре. Большинство производителей используют никелевые сплавы, потому что металл мягкий и с ним легко работать. К этому моменту уши большинства гитаристов также были развиты до никелевого звука, и большинство покупателей гитар имеют тенденцию не обращать внимания на незнакомое при покупке инструментов.

    • Как проверить лады: Самый простой и быстрый способ убедиться, что лады гитары находятся в хорошей форме, - это посмотреть прямо на гриф гитары, от корпуса до грифа. Если лады находятся на разной высоте (в случае с новыми гитарами виновата неправильная установка) или перекосились, возникают проблемы. Они должны выглядеть одинаково и иметь как можно меньше вмятин или износа.

    • Почему размер имеет значение: Ширина и высота ладов значительно влияют на игровые возможности.Длина ладовой проволоки составляет от 0,078 до 0,110 на макушке или вершине, а высота - от 0,035 до 0,055. Более высокие лады, от 0,45 и выше, как правило, облегчают сгибание струны и дают четкие ноты без особого давления. Последнее делает их идеальными для высокоскоростной игры. Дальнейшей точкой этой концепции является зубчатый гриф, который наиболее заметно использовали Ингви Мальмстин и Джон Маклафлин, игравшие на специально разработанном Gibson J-200 с зубчатыми ладами и дрон-струнами с группой Shakti.

    Некоторые быстрые сборщики предпочитают короткие лады для быстрой работы с грифом.Все дело в вкусе и стиле, хотя гитары с низким ладом также производят более мягкий звук. Gibson Les Paul Custom - классический тому пример.

    Есть также школа исполнителей, которые предпочитают широкие лады, обычно от 0,100 до 0,110, для улучшения интонации. Широкие лады изнашиваются медленнее, чем узкие, поэтому они дольше сохраняют все свои свойства, в том числе способность точно воспроизводить ноты.

    • Как износ влияет на удобство игры: Износ ладов - бороздки на ладах из-за давления на струны, углубления, создаваемые изгибом, снижение общей высоты лада в результате использования - все это может вызвать жужжание в местах расположения ладов. шея.К счастью, эти проблемы обычно можно решить, выровняв и одев лады несколько раз, прежде чем потребуется замена лада, поскольку замена лада является дорогостоящей.

    • Почему концы ладов становятся острыми: Иногда конец лада может стать острым или, точнее, выступать по бокам шеи гитары. Помимо шероховатости на руках, это показатель более сложной проблемы: гриф стал сухим и сморщенным. Это означает, что гитара хранилась в среде с недостаточной влажностью.Более бережное хранение - лучший ответ, но использование лимонного масла на грифе также помогает предотвратить это, увлажняя древесину.

    • Как лады влияют на действие: Обычно это дело вкуса, техники и носки. Некоторым игрокам, которые обнаруживают, что они сталкиваются с сопротивлением при сгибании струн, могут потребоваться лады большего размера. Если ноты звучат шумно или неточно, возможно, виноваты слишком низкие лады. С другой стороны, слишком высокие лады могут помешать правильной интонации.Но повышение уровня гитары может быть более дешевым решением последней проблемы, чем замена лада.

    • Почему лады расшатываются: Износ из-за контакта со струной, сушки грифа и сотрясений в середине концерта или во время транспортировки может привести к расшатыванию ладов. А если переплет теряет влагу, концы ладов могут приподняться или обнажиться. Все это создает проблемы, которые можно ошибочно списать на более типичную проблему износа лапы, но в этих случаях переодевание или замена не всегда являются решением.Если осталось достаточно проволоки для лада, свободный лад можно снова вставить в его прорезь вдоль грифа, и опытный мастер может заполнить промежутки между связкой и концом лада.

    • Как работают веерные лады: Вы, вероятно, видели таких исполнителей, как джазовый виртуоз Чарли Хантер, играющий на инструментах, у которых лады разложены веером вдоль грифа. Цель размещения веерных ладов - придать нижним струнам большую длину, а верхним - меньшей, тем самым обеспечивая более точную настройку и глубокие басы. Раздутые лады могут показаться новинкой , но впервые они появились в 16, -м и -м веке.

    • Не всегда обвиняйте лады: Жужжание не обязательно означает, что у вас проблемы с ладом. Некоторые гитаристы в стремлении к скорости устанавливают мосты для сверхнизких звуков, и это может вызвать у лада жужжание. Для новичков, незнакомых с тем, как точно звучат струны, или для более опытных игроков, впервые изучающих раскрытые и открытые строчки, жужжание также может стать настоящим убийством.Низкие строчки, такие как опущенное D, открытое D и открытое C, могут побудить гитары с нормальным действием к гудению из-за провисания струн, если гитара не настроена должным образом, чтобы приспособиться к таким строчкам.


    Собачьих лет: Интервью с гитаристом Грантом Горди

    В последнее время все наши любимые музыканты, кажется, заняты дуэтом: Крис Элдридж и Джулиан Лейдж; Эрик Скай с мандолинистом Тимом Коннеллом и Грант Горди с Джо К. Уолшем… мы даже слышим, что у Криса Тайла выходит альбом с Брэдом Мельдау.У этого списка нет конца.

    Чтобы добавить к этому списку, Горди только что анонсировал еще один дуэтный проект , альбом с гитаристом Россом Мартином под названием Year of the Dog . С тех пор, как мы получили нашу копию здесь, на FJ , альбом сильно ротации. Это восхитительный альбом из 10 треков с невероятной игрой и одними из лучших акустических технологий, которые мы слышали за последнее время (как они это сделали, вы узнаете ниже). Игра великолепна, а исходный материал варьируется от Баха до мятлика и оригинальных композиций.Мы решили спросить об этом Горди.

    Fretboard Journal: Как появился этот дуэтный проект?

    Грант Горди: Такое ощущение, что работа над ним длилась долго. Когда мне было чуть за двадцать, я жил в Колорадо и постоянно слышал об этом парне, Россе Мартине. Он был первым, кто звонил на все записи и концерты, и когда я услышал его игру, я понял, почему! Я знал, что мне нужно с ним встретиться. Наконец мы встретились на вечеринке в Боулдере - наверное, 12 или 13 лет назад.Был шанс поиграть в джем, и после этого мы решили собираться вместе как можно чаще. Самое забавное с гитаристами - это то, что бывает сложно пересекаться, поскольку обычно на одном концерте нет двух гитаристов! Но мы общались на фестивалях, встречались в наших местах в Денвере, пили много кофе и увлекались. Росс всегда производил на меня впечатление кота, у которого я всегда мог многому научиться. К тому времени, как мы начали играть, его звук был настолько развит, и он функционировал с нюансами динамики и гармонии, что меня просто впечатлило.Это оказало огромное влияние на мою игру и мышление. Он на 12 лет старше меня и примерно на фут выше, поэтому я всегда на него равнялся. Задолго до того, как мы подумали о создании проекта, я думал о том, как он мог бы артикулировать линию или озвучку аккорда или что-то еще, как я поступил бы с любым другим из моих гитарных героев.

    Росс переехал в Бруклин, кажется, около 10 лет назад, а я переехал около четырех. Как странствующие музыканты, мы собрали удивительное количество, за это время мы жили в разных частях страны.К тому времени, как я приехал в Нью-Йорк, мы были готовы превратить его в настоящий проект. Мы обе Собаки по китайскому Зодиаку, разделенные одним 12-летним циклом, поэтому Год Собаки показался нам интересным названием. Помимо астрологической связи, мы также непреднамеренно следовали своим носом по некоторым схожим жизненным траекториям. Мы оба провели 10 лет в Колорадо с пересечением в несколько лет, мы оба отважные гитаристы, которые любят импровизировать и бросают наши сети довольно широко в музыкальный океан.И мы просто полностью любим и так много получаем от совместной игры. Реализация этого проекта имела большой смысл, и время казалось подходящим.

    FJ: Диапазон песен, на которые вы играете каверы на этом альбоме, довольно широк. Как вы определились с этими треками? Развивалась ли концепция этой записи по мере того, как вы попали в студию?

    GG: Вещи действительно развивались по мере того, как мы записывали. Несколько оригинальных произведений были совершенно новыми, когда мы их отслеживали - например, мелодия Росс «Sweep» исполнялась несколько раз на концертах, но аранжировка укрепилась, насколько я помню, когда мы фактически ее записывали, а это не так. По моему опыту, это не редкость в студии.Моя мелодия «Как летит ворона» все еще писалась до тех пор, пока мы не сели ее сокращать. На самом деле ничего не изменилось, хотя некоторые мелодии получились несколько иначе, чем мы ожидали, но в этом суть импровизации.

    Мы не ставили перед собой задачу сделать пластинку, различающуюся по стилю. На самом деле, я даже не помню, чтобы когда-либо думал об этом! Все сводилось к тому, что нам нравится играть, что мы хотели услышать. Мы действительно хотели достичь того, что казалось балансом настроений и текстур, и я думаю, что нам это удалось.Мы также попытались сбалансировать, кто на какой мелодии произносит мелодию. Крутая вещь в двух гитарах заключается в том, что существует так много возможностей для текстуры - это не должно быть просто: «Ты соло, я буду играть ... Хорошо, теперь я буду соло, пока ты будешь играть!» Мы всегда изучаем этот аспект.

    FJ: Вы записали это в Колорадо… не могли бы вы описать настройку студии?

    Мы записывались в Swingfingers Studio недалеко от Форт-Коллинза, штат Колорадо. Им управляет наш хороший друг Аарон Янгберг, который является настоящим приверженцем музыкальной сцены Колорадо, а также отличным звукоинженером и исполнителем на банджо.Это разбивка Аарона установки записи…

    Для меня: установка «разнесенная пара», но мы использовали более двух микрофонов, поэтому называть разнесенную пару не совсем правильно. Шейные микрофоны на 12-м ладу - это Royer 122 в предусилителе Forssell SMP2 и винтажный Neumann KM84 в предусилителе Mercury V72. В качестве мостового микрофона мы использовали Flea C12 в предусилителе Forssell SMP2. В качестве микрофона на правом плече я использовал винтажный Neumann U87 в предусилителе Forssell SMP2.

    Росс также использовал расстановку «разнесенных пар». Его микрофон на 12-м ладу был винтажным Neumann KM54 в предусилителе Chandler Limited TG2; на мосту у него был винтажный Neumann M49 в предусилителе Chandler Limited TG2.Его микрофон на правом плече представлял собой Flea U47 в предусилителе Grace V3.

    Комнатный микрофон представлял собой AKG 414 B-ULS (всенаправленный) в предусилителе Forssell SMP2.

    FJ: Сколько микрофонов! Я вижу, вы также играли на нескольких разных гитарах, включая Martin 000-18 40-х годов, Martin D-28 1975 года и Collings D-1 1998 года. Здесь мы расскажем о мыслительном процессе: почему вы выбрали Martin вместо Collings на данном треке или наоборот?

    Г.Г .: Это был интересный процесс.В последнее время я в основном по умолчанию использовал '44 ooo-18, просто потому, что я очень люблю эту гитару. Он может справиться с чем угодно (на самом деле, со всей пластинкой Mr. Sun, The People Need Light , я играл ооо), но он особенно востребован в мелодиях, где я хочу более теплый, более среднечастотный звук; Мне нравится, как это звучит в балладах и во всем, что связано с пространством, где вы можете позволить нотам немного вздохнуть. Я играл на своем Martin D-28 (который ближе всего к Россу Коллингс D2-H) на «Snowflake Reel / Bright Size Life», потому что есть гармоничная мелодия, которую мы играем вместе на «Snowflake», и мы хотели, чтобы гитары из розового дерева действительно смешались. для этого сокращения.

    Точно так же и с «Dear Old Dixie» - на этом треке играет так много ансамблевой мелодии, и мы от всего сердца подошли к звуку двух дредноутов для этого, на котором я играл свой Collings D1. D1 также настроен на более низкий строй, который мне очень нужен для такого быстрого темпа! Некоторые из этих строк довольно хитрые. Я считаю, что это было возвращение к ooo-18 со мной до конца записи.

    FJ: Между вашей работой с Джо К.Уолш и это, вы были в большом дуэте ... Чем Росс отличается от Джо в качестве партнера?

    GG: Для меня дуэт всегда был важен. Мой отец и я много играли вместе, когда я был моложе - он отличный гитарист, - поэтому я много раз тренировался в диалогах подобного рода. Это совершенно другой вид коллективной игры с совершенно другим набором обязанностей и переменных, чем у всей группы. Джо К. Уолш, один из лучших исполнителей на мандолине, которого я когда-либо слышал, был музыкальным братом уже много лет, и мы вместе играли во множестве групповых сценариев, но, разобравшись вдвоем, только мы двое. это уникальная вещь.У Джо такой разговорный стиль игры, и его чувство ритма такое возбуждающее, но при этом остающееся чувствительным. Это трудный баланс, но он его соблюдает. В более общем плане, игра в дуэте мандолина / гитара даст вам определенные руководящие принципы. Из-за диапазонов и тембров этих двух инструментов мы стараемся немного подумать о том, как лучше всего поддерживать друг друга и лучше всего поддерживать то, что происходит в музыкальный момент. Но роли несколько более определены, и есть немного больше шаблона, связанного с мятликом.

    С двумя гитарами регистр, с которым вам нужно работать, больше, поэтому доступна оркестровая опция, и мы можем переключаться между разными типами ролей - один из нас может быть басистом, или пианистом, или мы можем просто сделайте один большой аккорд, чтобы вы даже не могли сказать, кто что делает. Мощная штука!

    И хотя мы оба одержимы идеей, мы не ставили перед собой задачу установить «рекордный рекорд». Прецедент гитарного дуэта существует во многих музыкальных жанрах, поэтому кажется, что мы ограничены только нашими творческими ограничениями.Опыт Росса в джазовой и импровизированной музыке и моя любовь к множеству разных видов гармонии в сочетании с нашим взаимным интересом к текстурным возможностям, доступным для двух гитар, дает нам естественный толчок к тому, чтобы максимально расширить наши вкусы.

    FJ: Есть ли планы записать дуэт с Джо К. Уолшем?

    GG: Мы об этом говорили! Пока еще ничего не оформлено, но, скорее всего, в следующем году.

    FJ: Последний вопрос: какие записи из ваших любимых дуэтов, по вашему мнению, должен проверить каждый гитарист (или не гитарист)?

    GG: Вот несколько фаворитов на все времена…

    1. Bill Evans / Jim Hall, Undercurrent
    2. Рон Майлз / Билл Фризелл, Heaven
    3. Чарли Хейден / Кейт Джарретт, Жасмин
    4. Дэвид Грисман / Тони Райс, Tone Poems (я носил это на кассете, когда был подростком)
    5. Чарли Хейден / Хэнк Джонс, Steal Away
    6. Серхио и Одаир Асад, Латиноамериканская музыка для двух гитар

    Закажите Год Собаки в Bandcamp по этой ссылке.Фото Джастина Камерера.

    Введение в технологию флуоресцентного резонансного переноса энергии (FRET) и ее применение в биологических науках

    Автор : Пол Хелд, доктор философии, отдел приложений, BioTek Instruments

    Флуоресцентный резонансный перенос энергии (FRET) - физическое явление, впервые описанное более 50 лет назад, которое сегодня все чаще используется в биомедицинских исследованиях и открытии лекарств.FRET основан на зависящей от расстояния передаче энергии от молекулы-донора к молекуле-акцептору. Из-за своей чувствительности к расстоянию FRET использовался для исследования молекулярных взаимодействий. FRET - это безызлучательная передача энергии от молекулы-донора к молекуле-акцептору. Молекула-донор - это краситель или хромофор, который первоначально поглощает энергию, а акцептор - хромофор, которому впоследствии передается энергия. Это резонансное взаимодействие происходит на расстояниях, превышающих межатомные расстояния, без преобразования в тепловую энергию и без каких-либо столкновений молекул.Передача энергии приводит к уменьшению интенсивности флуоресценции донора и времени жизни возбужденного состояния, а также к увеличению интенсивности излучения акцептора. Пару молекул, которые взаимодействуют таким образом, что возникает FRET, часто называют парой донор / акцептор.

    Несмотря на то, что на FRET влияет множество факторов, основных условий, которые должны быть соблюдены для возникновения FRET, относительно немного. Молекулы донора и акцептора должны находиться в непосредственной близости друг от друга (обычно 10–100 Å).Спектр поглощения или возбуждения акцептора должен перекрывать спектр излучения флуоресценции донора (рис. 1). Степень их перекрытия называется спектральным интегралом перекрытия (J). Ориентации диполей донорного и акцепторного переходов должны быть примерно параллельны. Если предположить, что донорно-акцепторные пары совместимы, наиболее важным элементом, необходимым для возникновения FRET, является близость пар. Фёрстер продемонстрировал, что эффективность процесса (E) зависит от обратного шестого расстояния между донором и акцептором (см. Уравнение 1).[1]

    Уравнение 1. E = Ro 6 / (Ro 6 + r 6 )

    Где Ro - расстояние Ферстера, на котором передается половина энергии, а r - фактическое расстояние между донором и акцептором. Расстояние, на котором передача энергии эффективна на 50%, называется радиусом Ферстера (Ro). Величина Ro зависит от спектральных свойств донора и акцептора. Расстояние Ферстера от 20 до 90 Å наиболее полезно для изучения биологических макромолекул.Эти расстояния сопоставимы с диаметрами многих белков, толщиной биологических мембран и расстояниями между сайтами на мультисубъединичных белках. Любой процесс, который влияет на скорость передачи энергии, позволяет количественно оценить процесс. В результате FRET часто называют спектроскопической линейкой. Обратите внимание, что расстояние Ферстера (Ro) зависит от ряда факторов, включая квантовый выход флуоресценции донора в отсутствие акцептора (fd), показатель преломления раствора (n), дипольную угловую ориентацию каждой молекулы. (k2) и спектральный интеграл перекрытия донора и акцептора (J).См. Уравнение 2.

    Уравнение 2. Ro = 9,78 x 10 3 (n -4 * fd * k 2 * J) 1/6 Å

    Рис. 1. Схематическое изображение интеграла перекрытия спектров

    В качестве примера влияния расстояния на эффективность передачи энергии можно использовать некоторые произвольные числа для расстояния Ферстера (Ro) и фактического расстояния (r). Если Ro произвольно задан равным 1 (Ro = 1), и расстояние между донором и акцептором также равно 1, тогда r = Ro, и уравнение эффективности будет E = 1 6 / (1 6 + 1 6 ), что равно 0.5 (т.е. 50%). Эта половина максимального значения и есть то, что определяется как расстояние Фёрстера. Если расстояние в 10 раз меньше (например, r = 0,1Ro), то E = 1 6 / (1 6 + 0,1 6 ) = 0,999999, что значительно эффективнее. Однако, если расстояние между донором и акцептором на 10 раз больше (т.е. r = 10Ro), то E = 1 6 / (1 6 + 10 6 ) = 0,0000001. Эта чрезвычайная чувствительность к расстоянию - это то, что позволяет использовать FRET для экспериментов с приближением.

    Обычно донорная и акцепторная части различаются, и в этом случае FRET можно обнаружить по появлению флуоресценции акцептора или по тушению донорной флуоресценции. Зонд-донор всегда представляет собой флуоресцентную молекулу. Обратите внимание, что люминесцентные молекулы ведут себя как флуоресцентные молекулы в отношении своего излучения. При соответствующем возбуждении его электроны перескакивают из основного состояния (So) на более высокий колебательный уровень. Очень быстро (в течение пикосекунд) эти электроны распадаются на самые низкие колебательные уровни (S1) и, в конечном итоге, распадаются (в течение наносекунд) обратно в состояние So, и излучается фотон света.Когда выполняются условия для возникновения FRET, затухание флуоресценции донора и передача энергии акцептору будут конкурировать за спад энергии возбуждения. При резонансной передаче энергии фотон НЕ излучается, а энергия передается молекуле-акцептору, электроны которой, в свою очередь, возбуждаются, как описано для молекулы-донора. При последующем возврате в основное состояние излучается фотон (рис. 2).

    Рис. 2. Схематическое изображение состояний колебательной энергии электрона, возникающих во время FRET.

    Измерение

    Обнаружение и количественное определение FRET, безусловно, может быть выполнено различными способами. Поскольку FRET может приводить как к уменьшению флуоресценции молекулы донора, так и к увеличению флуоресценции акцептора, может быть выполнено определение метрики соотношения двух сигналов. Преимущество этого метода заключается в том, что измерение взаимодействия не зависит от абсолютной концентрации датчика.Поскольку не все акцепторные части являются флуоресцентными, их можно использовать в качестве средств для гашения флуоресценции. В этих случаях те взаимодействия, которые приводят к тому, что флуоресцентная донорная молекула приближается к такой молекуле, могут привести к потере сигнала. И наоборот, реакции, которые устраняют близость флуоресцентного донора и тушителя, могут привести к увеличению флуоресценции. Одним из таких примеров могут быть анализы протеазы. Эти анализы обычно включают флуоресцентный фрагмент на одном конце и гасящую молекулу на другом конце, разделенные пептидом, содержащим последовательность расщепления протеазой.

    Некоторые примеры

    Генетически кодируемые флуоресцентные красители, такие как зеленый флуоресцентный белок (GFP) и родственные молекулы синего, голубого, желтого и красного цветов, обеспечивают способность выполнять FRET in vitro, особенно в живых клетках [2]. Эти белки образуют пары FRET друг с другом, а также с обычными красителями. Они могут быть присоединены к другим белкам генетически или ковалентно, но при этом сохраняют свою флуоресцентную способность. Эти красители могут быть генетическими элементами, которые могут быть связаны с другими генами с образованием химерных белков.Эти химерные белки содержат GFP (или связанный с ним флуоресцентный белковый элемент) и предполагаемый связывающий домен. С различными химерными белками (один донор и один акцептор) можно исследовать белок-белковые взаимодействия. Только когда пары донор / акцептор взаимодействуют посредством белок-белковых взаимодействий, результатом будет FRET. (Рисунок 3)

    Рис. 3. Схематическое изображение взаимодействия двух различных флуоресцентных белковых химер. Белок-белковые взаимодействия между белками, помеченными A и B, приводят к тому, что синий флуоресцентный белок и зеленый флуоресцентный белок находятся на достаточно близком расстоянии, чтобы позволить FRET возникать.В этом примере возбуждение синего флуоресцентного белка приводит к испусканию флуоресценции зеленым флуоресцентным белком.

    Органические цианиновые красители Cy3, Cy5, Cy5.5 и Cy7, которые излучают в красном диапазоне (> 550 нм), обладают рядом преимуществ. Их диапазон излучения таков, что часто снижается фоновая флуоресценция. Кроме того, большие расстояния (> 100 Å) могут быть измерены в результате высоких коэффициентов экстинкции и хороших квантовых выходов. Даже донорно-акцепторные пары с разделенными спектрами излучения (т.е. низкий интеграл перекрытия) приводят к приемлемым расстояниям Фёрстера. Например, Cy3, который излучает максимум на 570 нм, и Cy5, который излучает на 670 нм, имеют расстояние Ферстера> 50 Å. Большое расстояние между парами позволяет измерять излучение акцептора в результате FRET без помех от излучения донора. Кроме того, эти молекулы могут быть напрямую связаны с определенными участками в синтетически полученных нуклеиновых кислотах, что позволяет использовать FRET для оценки отжига нуклеиновых кислот.

    Рисунок 4.Схематическое изображение FRET, возникающего между флуоресцентными фрагментами Cy3 и Cy5 при отжиге меченых олигонуклеотидов.

    В примере, изображенном на фиг. 4, два комплементарных олигонуклеотида РНК помечены Cy3 и Cy5 соответственно. Когда эти меченые молекулы не отжигаются (рис. 4A), возбуждение РНК-олигонуклеотида, меченного Cy3, светом с длиной волны 540 нм приводит только к испусканию света Cy3 с длиной волны 590 нм, в то время как комплементарная РНК-олиго, меченная Cy5, не излучает любой свет с длиной волны 590 нм или его истинная длина волны излучения 680 нм.Однако, когда двум олигонуклеотидам позволяют отжигаться, непосредственная близость молекул позволяет происходить переносу FRET. Это приводит к испусканию света с длиной волны 680 нм, когда отожженная молекула возбуждается светом с длиной волны 540 нм. Обратите внимание, что не все излучение Cy3 на длине волны 590 нм теряется, но значительная его часть теряется.

    Рис. 5. Принципиальная диаграмма активности FRET, используемой ВСП

    Зонды с датчиками напряжения

    (VSP) - это технология анализа на основе флуоресцентного резонансного переноса энергии (FRET), используемая для обнаружения лекарств с высокопроизводительным ионным каналом.Донор FRET представляет собой связанный с мембраной кумарин-фосфолипид (CC2-DMPE), который связывается только с внешней стороной клеточной мембраны. Акцептор FRET представляет собой мобильный, отрицательно заряженный, гидрофобный оксонол [DiSBAC 2 (3) или DiSBAC 4 (3)], который будет связываться с любой стороной плазматической мембраны в ответ на изменения мембранного потенциала (рис. 5). В ВСП используется зависимость от расстояния. FRET может иметь место только тогда, когда акцептор DISBAC 2 (3) расположен на внешней стороне клеточной мембраны.Покоящиеся клетки обладают относительно отрицательным потенциалом, поэтому два зонда связываются с внешней стороной клеточной мембраны, что приводит к эффективному FRET. Возбуждение донорного зонда CC2-DMPE (при ~ 400 нм) генерирует сильный красный сигнал флуоресценции (при ~ 590 нм) от зонда-акцептора оксонола. Когда мембранный потенциал становится более положительным, как это происходит при деполяризации клеток, оксонольный зонд быстро перемещается (в субсекундном временном масштабе) на другую сторону мембраны (рис. 5). Таким образом, каждый оксонольный зонд «чувствует» и реагирует на изменения напряжения в ячейке.Эта транслокация разделяет пару FRET, поэтому возбуждение донорного зонда CC2-DMPE теперь генерирует сильный синий сигнал флуоресценции (при ~ 460 нм) от зонда CC2-DMPE. Ожидается, что деполяризация клетки, которая заставляет DISBAC 2 (3) перемещаться на внутреннюю сторону мембраны, приведет к снижению активности FRET.

    Соединения лантанидов, такие как европий и тербий, эффективно используются в качестве доноров в реакциях FRET. Эти соединения обеспечивают очень хорошее соотношение сигнал / шум в результате их длительного периода полураспада флуоресценции и спектральных характеристик.Эмиссия этих соединений имеет резко пиковый профиль с большим стоксовским сдвигом от возбуждения. Кроме того, длительный период полураспада флуоресценции позволяет начать измерение после прекращения возбуждающего света. Задержка между возбуждением и измерением (диапазон мсек) позволяет рассеяться фоновой флуоресценции от молекулы органического акцептора с периодом полураспада в наносекундном диапазоне. Таким образом, при соответствующей задержке измеряется только донорно-акцепторная эмиссия.

    Донорная молекула не всегда должна включать флуоресцентное соединение.Люминесцентные молекулы излучают фотоны очень похоже на флуоресценцию. Основное различие состоит в том, что электронное возбуждение не является результатом поглощения фотона, а, скорее, высвобождением химической энергии, содержащейся в молекуле. Когда возбужденные электроны возвращаются к своему основному состоянию, энергия может быть высвобождена в виде фотона света или передана через RET молекуле-акцептору, если условия верны. Хотя количество молекул, которые можно использовать, более ограничено, эта технология имеет то преимущество, что отсутствует внешнее возбуждение молекулы акцептора.

    Проблемы

    При разработке экспериментов FRET необходимо учитывать ряд вопросов. Самая очевидная проблема - это близость. В зависимости от схемы анализа, непосредственная близость будет либо установлена, либо устранена во время анализа, что приведет к изменению сигнала, который можно измерить. Необходимо выбрать подходящие пары донор / акцептор. Пары должны иметь достаточное спектральное перекрытие для эффективной передачи энергии, но при этом иметь достаточную разницу в спектрах, чтобы их можно было отличить друг от друга.Выбор фильтров для выбора длины волны флуоресценции также имеет решающее значение для успеха или неудачи экспериментального обнаружения FRET. Фильтр возбуждения для донора должен иметь возможность избирательно возбуждать молекулу донора, сводя к минимуму прямое возбуждение молекулы акцептора. Загрязняющее прямое возбуждение акцепторной молекулы может быть учтено с помощью соответствующих контролей, но большие количества затрудняют интерпретацию данных. Как показано на рисунке 1, фильтры, используемые для возбуждения Cy3, минимизировали возбуждение Cy5, обеспечивая при этом достаточный сигнал возбуждения для Cy3.

    Еще одна важная проблема, связанная с обнаружением FRET, связана с концентрацией аналита. Только те молекулы, которые взаимодействуют друг с другом, приведут к FRET. Если присутствуют большие количества донорных и акцепторных молекул, но они не взаимодействуют, количество происходящего FRET будет довольно низким. В этом примере, хотя донорные и акцепторные молекулы могут быть очень легко обнаружены по отдельности, фактического количества активности FRET может быть недостаточно для обнаружения. Что касается FRET, фактически измеряемым «аналитом» являются пары донор / акцептор, а не отдельные компоненты.Кроме того, как донорные, так и акцепторные молекулы должны иметь достаточную концентрацию для того, чтобы FRET имел место. Большинство связывающих событий - это динамический процесс, который достигает устойчивого состояния. Если одного из компонентов реакции не хватает, то общее связанное количество будет естественно низким. Например, временные трансфекции с двумя разными генетическими элементами, которые приводят к тому, что один из элементов не эффективно транслируется в белок, приведут к низким уровням FRET. Клеточная локализация также может иметь значение.Если одна молекула находится в цитоплазме, а другая - в ядре, взаимодействия друг с другом не будет, несмотря на достаточное количество каждой из них.

    Приложения FRET

    • Структура и конформация белков [3]
    • Пространственное распределение и сборка белков [4]
    • Взаимодействия рецептор / лиганд [5]
    • Иммуноанализ [6]
    • Структура и конформация нуклеиновых кислот [7]
    • ПЦР в реальном времени и определение SNP [8,9]
    • Гибридизация нуклеиновых кислот [10]
    • Распределение и транспорт липидов [11]
    • Анализы слияния мембран [12]
    • Определение потенциала мембраны [13, 14]
    • Анализы флуорогенных протеаз [15]
    • Индикаторы циклического AMP [16]

    Узнать больше о Synergy HTX
    Многорежимный считыватель

    Список литературы

    1. Фёрстер, Т.(1948) Межмолекулярная миграция энергии и флуоресценция Ann. Phys 2: 55-75.
    2. Tsien, R. (1998) Ann. Обзор Biochem, 67: 509-544
    3. Jonsson T, Waldburger CD, Sauer RT, (1996) Нелинейные отношения свободной энергии в разворачивании репрессора дуги подразумевают существование нестабильных, нативных промежуточных продуктов сворачивания. ". Biochemistry 35: 4795-4802.
    4. Watson BS, Hazlett TL, Eccleston JF, Davis C, Jameson DM, Johnson AE. (1995) Расположение макромолекул в аминоацил-тРНК.фактор элонгации Tu.GTP тройной комплекс. Исследование передачи энергии флуоресценции. Биохимия 34: 7904-7912
    5. Berger W, Prinz H, Striessnig J, Kang HC, Haugland R, Glossmann H. (1994) Сложный молекулярный механизм связывания дигидропиридина с Ca (2 +) - каналами L-типа, выявленный с помощью резонансной передачи энергии флуоресценции. Биохимия 33: 1875-11883.
    6. Ханна П.Л., Ульман Э.Ф. (1980) 4 ', 5'-Диметокси-6-карбоксифлуоресцеин: новый диполь-дипольный акцептор переноса энергии флуоресценции, пригодный для флуоресцентных иммуноанализов.Анальная биохимия 108: 156-161.
    7. Клегг Р.М., Мурчи А.И., Лилли Д.М. (1994) Структура раствора четырехстороннего соединения ДНК в условиях с низким содержанием соли: анализ флуоресцентного резонансного переноса энергии. Biophys J 66: 99-109.
    8. Ли Л.Г., Ливак К.Дж., Мулла Б., Грэм Р.Дж., Винаяк Р.С., Вуденберг TM. (1999) Семицветное, однородное обнаружение шести продуктов ПЦР. "Biotechniques 27: 342-349.
    9. Мякишев М.В., Хрипин Ю., Ху С., Хамер Д.Х. 2001) Высокопроизводительное генотипирование SNP с помощью аллель-специфической ПЦР с универсальными праймерами, меченными переносом энергии.Genome Res 11: 163-169.
    10. Parkhurst KM, Parkhurst LJ. (1995) Кинетические исследования резонансного переноса энергии флуоресценции с использованием олигонуклеотида с двойной меткой: гибридизация с олигонуклеотидным комплементом и одноцепочечной ДНК. Биохимия 34: 285-292.
    11. Николс JW, Пагано RE. (1983) Анализ резонансной передачи энергии белково-опосредованного переноса липидов между везикулами. J Biol Chem 258: 5368-5371.
    12. Uster PS (1993) Микроскопия резонансного переноса энергии in situ: мониторинг слияния мембран в живых клетках.Методы Энзимол. 221: 239-246.
    13. Hoffman, R. и Held, P. Примечание по применению BioTek.
    14. Gonzalez JE, Tsien RY. (1995) Измерение напряжения путем резонансного переноса энергии флуоресценции в отдельных клетках. Biophys J 69: 1272-1280.
    15. Matayoshi ED, Wang GT, Krafft GA, Erickson J. (1990) Новые флуорогенные субстраты для анализа ретровирусных протеаз с помощью резонансной передачи энергии. "Science 247, 954-958.
    16. . Адамс С.Р. и др. (1993) Оптические зонды для циклического AMP, флуоресцентные и люминесцентные зонды для определения биологической активности, Mason W.T., Ed.С. 133-149.

    Свойства обычных тропических пород древесины для грифа струнных инструментов | Journal of Wood Science

    Анализ микроструктуры древесины

    Анатомическая структура древесины формируется во время роста дерева и в основном зависит от условий местности. Как правило, это можно контролировать только путем выращивания леса. После образования изменить микроструктуру с помощью методов улучшения непросто.Анатомическая структура трех ценных пород дерева имеет общие черты, которые обеспечивают научную основу для поиска наилучшего заменителя дерева для грифа.

    Все выбранные породы представляют собой диффузно-пористую древесину. Как показано в Таблице 1, индийский палисандр имеет наибольший диаметр сосуда. Три дерева грифа имеют меньшее количество сосудов, чем клен (Таблица 1), и имеют темную смолу в порах (Рис. 2). Эбеновое дерево, индийский палисандр и африканское черное дерево имеют немного более толстые стенки ячеек волокна и меньший диаметр просвета волокна по сравнению с кленом.В таблице 2 и на рис. 3 приведены характеристики лучей из четырех пород древесины. Многоярусные и мелкие лучи наблюдались во всех лесах. У черного дерева была самая высокая средняя высота луча (330,4 мкм), в то время как высота луча клена сильно варьировала (25,8–656,1 мкм). Средняя ширина луча в трех деревянных панелях грифа составляла ~ 25 мкм. Доля лучей для черного дерева, индийского палисандра, африканского черного дерева и клена составляла 14, 6, 5 и 7 соответственно, причем наибольшее соотношение наблюдалось в черном дереве. Африканское черное дерево отличалось от других пород, особенно большим количеством лучей на квадратный миллиметр, в то время как клен имел наименьшее количество.Из-за потенциальной корреляции между анатомическими свойствами древесины и ее физическими, механическими и акустическими вибрационными свойствами, анализ анатомических свойств древесины обеспечивает теоретическую основу для выбора древесных материалов в музыкальных инструментах [22, 38, 39].

    Таблица 1 Характеристики сосуда из дерева и волокна Рис. 2

    Поперечные сечения различных пород дерева: a черное дерево; b палисандр индийский; c Черное дерево африканское; d клен.Шкала 200 мкм

    Таблица 2 Характеристики лучей древесины Рис. 3

    Касательные сечения различных пород дерева: a эбеновое дерево; b палисандр индийский; c Черное дерево африканское; d клен. Шкала 100 мкм

    Физико-механические свойства

    Различные типы музыкальных инструментов и их компоненты имеют разные требования к плотности древесины. Для деки струнных инструментов, когда плотность древесины находится в диапазоне 0.4–0,5 г / см 3 , его динамический модуль упругости будет больше, значение тангенса угла потерь будет меньше, его эффективность акустической вибрации будет выше, а звук инструмента будет громче и четче [20, 40] . Щиток и нервюры струнных инструментов часто изготавливаются из клена средней плотности с плотностью воздушной сушки 0,69 г / см 3 . Напротив, плотность черного дерева, индийского палисандра и африканского черного дерева, используемых для накладки грифа, намного выше (1,21, 0,81 и 1,36 г / см 3 соответственно).Как правило, древесина, используемая для изготовления грифа, должна иметь плотность более 0,80 г / см 3 для достижения высокой твердости и высокой износостойкости.

    Дерево по своей природе гигроскопично, и это свойство изменяется в зависимости от влажности окружающей среды. Поэтому стабильность размеров древесины, используемой в струнных инструментах, очень важна [41]. Влагосодержание древесины также влияет на ее физические, механические и акустические вибрационные характеристики. При очень высоком содержании влаги динамический модуль упругости древесины будет уменьшаться, а ее тангенс угла потерь увеличится.Это создает внутренние напряжения из-за изменения громкости, что влияет на качество звука инструмента, и эффект звучания становится нестабильным. И наоборот, древесина с лучшей стабильностью размеров приводит к более стабильному общему звуковому эффекту инструмента [42].

    Здесь мы измерили объемный коэффициент набухания (VSW), тангенциальный линейный коэффициент набухания (TLSW) и радиальный линейный коэффициент набухания (RLSW) четырех древесных пород, от состояния сушки в печи до состояния сушки на воздухе и из печи -сухое до водонасыщенного состояния.Результаты, показанные на рис. 4, позволяют предположить, что четыре типа древесины имеют значительные различия в их антигигроскопической способности. На рис. 4а показана скорость изменения размеров древесины при температуре 20 ± 1 ° C и относительной влажности 65 ± 2%. Значения VSW влагопоглощения черного дерева, индийского палисандра, африканского черного дерева и клена составили 4,64, 4,25, 0,37 и 4,72%; значения TLSW были 2,56, 1,97, 0,16 и 2,7 4%; и значения RLSW составляли 1,81, 1,88, 0,03 и 1,74% соответственно. На рис. 4b показана скорость изменения размеров древесины, когда она насыщена деионизированной водой.Значения водопоглощения ВМЗ составили 15,12, 12,65, 6,43 и 17,04%; значения TLSW были 8,59, 6,32, 3,22 и 10,41%; и значения RLSW составляли 5,44, 5,14, 2,87 и 5,26% соответственно. Африканское черное дерево имело наименьший коэффициент набухания, что означало, что оно имело наименьшее изменение размеров и максимальную стабильность размеров как в среде с высокой влажностью, так и при погружении в воду. Напомним, что плотность африканского черного дерева высока, с толстыми клеточными стенками волокон, небольшими полостями, наименьшим диаметром сосудов и большим количеством камеди в порах.В результате он имеет меньшую емкость для хранения воды. По сравнению с древесиной грифа клен имеет более высокий коэффициент набухания, поэтому его размерная стабильность оставляет желать лучшего.

    Рис. 4

    Эффективность набухания древесины. RLSW коэффициент радиального линейного набухания, TLSW тангенциальный линейный коэффициент набухания, VSW объемный коэффициент набухания

    На рис. и 20 дней, пока древесина не пропитается.Поглощение воды можно оценить как клен> черное дерево> индийский палисандр> африканское черное дерево, и эта тенденция согласуется с коэффициентами набухания древесины, показанными на рис. 4. Клен показал прибавку в весе ~ 105% после замачивания в воде в течение 20 дней, в то время как прирост древесины грифа составлял одну треть или меньше этого значения. В течение первых 2 дней замачивания водопоглощение клена резко увеличивалось с увеличением времени замачивания. Как упоминалось ранее, клен имеет низкую плотность, а его многочисленные сосуды поперечного сечения способствуют переносу влаги.В результате он быстро впитывал воду. Водопоглощение африканского черного дерева было ниже, что в основном связано с его высокой плотностью, меньшим количеством пор на квадратную площадь и тем фактом, что большинство пор содержат камедь. Коэффициенты набухания из-за влагопоглощения и водопоглощения у древесины грифовой доски ниже, чем у клена.

    Рис. 5

    Во время процессов защипывания и вибрации струны прикладывают натяжение к шейке струнного инструмента, делая последнюю склонной к деформации изгиба и скручивания.В результате гриф может упасть с шеи. Чем выше статическая прочность на изгиб и жесткость материала грифа, тем лучше способность грифа противостоять деформации изгиба и скручивания [20]. И наоборот, грифы из дерева с меньшими значениями MOR и MOE будут испытывать большую деформацию изгиба. Значения MOE и MOR были самыми высокими для африканского черного дерева (17,9 ГПа и 190,8 МПа соответственно), самыми низкими для индийского палисандра, а значения для черного дерева и клена были аналогичными.

    Древесина с более высокой прочностью на изгиб и модулем упругости может улучшить характеристики музыкальных инструментов. Прочность на ударный изгиб черного дерева, индийского палисандра, африканского черного дерева и клена приведена в таблице 3. Это значение было наименьшим для черного дерева, а для африканского черного дерева было больше. Древесина с более низкой ударной вязкостью имеет тенденцию быть хрупкой и уязвимой для хрупких повреждений, что влияет на эстетику инструмента.

    Таблица 3 Механические свойства древесины

    Поскольку гриф вступает в контакт с вибрирующими струнами и пальцами во время игры, древесина с превосходной износостойкостью может обеспечить точное и последовательное расположение нот на грифе [12].Csanády et al. классифицировал износостойкость (сопротивление истиранию) древесины на три класса [24]: удовлетворительная (150–220 мг / 100 r ), хорошая (80–150 мг / 100 r ) и очень хорошая (<80 мг / 100 r ). Устойчивость к истиранию черного дерева, индийского палисандра, африканского черного дерева и клена составляла 113, 101, 87 и 97 мг / 100 r соответственно. В то время как африканское черное дерево имело лучшую износостойкость, а черное дерево - худшее, все четыре вида древесины попадают в категорию «хороших» в соответствии с приведенной выше классификацией [43].

    Древесина, используемая для изготовления грифов, должна иметь соответствующую плотность и твердость, прежде чем можно будет оценить другие показатели эффективности. Когда на инструменте играют, гриф должен эффективно противостоять натяжению струн и сжимающей силе пальцев игрока, сводя к минимуму деформацию и образование ямок на поверхности. Жесткость грифа позволяет изменять основную резонансную частоту деки в небольшом диапазоне. При уменьшении основной резонансной частоты всего на 10 Гц можно заметить разницу между инструментами высшего и второго уровня [13, 44].Грифы, сделанные из очень мягкой древесины, делают гриф менее жестким и уменьшают основную резонансную частоту, делая выразительность инструмента слабой и неравномерной. И наоборот, более твердый материал грифа может помочь подавить сдвиг основной резонансной частоты и улучшить амплитуду вибрации деки, так что выразительность инструмента станет более выразительной и однородной. С точки зрения передачи вибрации через гриф, если гриф рассматривается как низкочастотный канал, гриф действует как высокочастотный канал, расширяя общую полосу проводимости грифа.Гриф приклеивается к грифу в основном за счет сжимающего усилия, при котором хорошая проводимость для высокочастотных звуковых волн может быть достигнута только при высокой жесткости. При этом материал шейки должен иметь значительную, но не чрезмерную твердость.

    В этом исследовании сравнивалась микроскопическая и макроскопическая твердость четырех видов древесины и обсуждались соответствующие требования к выбору древесины грифа. На рис. 6 представлена ​​диаграмма нанотвердости стенок ячеек. Наноиндентирование проводили как на слое вторичной клеточной стенки S 2 , так и на средней ламелле образцов древесины [34].Твердость клеточной стенки черного дерева, индийского палисандра и африканского черного дерева составляла 0,564, 0,469 и 0,500 ГПа соответственно, а у клена была значительно ниже (0,413 ГПа).

    Фиг.6

    Твердость древесины при наноиндентировании. Нижняя горизонтальная линия перевернутой буквы Т - минимум; верхняя горизонтальная линия буквы Т максимальная; нижний край большого квадрата представляет 1-й квартиль; верхний край большого квадрата представляет 3-й квартиль; горизонтальная линия внутри большого квадрата представляет собой медианное значение; квадратики - средние значения; знак * за рамкой указывает на отклонение от нормы.

    На рис. 7 дополнительно сравнивается твердость трех разных сечений каждой древесины: поперечного сечения, тангенциального сечения и радиального сечения.Во всех образцах, за исключением африканского черного дерева, твердость оценивается как поперечное> тангенциальное> радиальное сечение. Таким образом, для грифа в основном используется плоско-распиленная доска. Африканское черное дерево имеет самую высокую твердость - 15,5, 18,7 и 16,5 кН соответственно. На втором месте по твердости находится черное дерево (14,3, 12,2 и 10,5 кН соответственно), а для индийского палисандра эти значения составляют 9,1, 6,6 и 6,8 кН. Значения твердости тангенциального и радиального сечений черного дерева и африканского черного дерева были одинаковыми и составляли около 1.В 5 раз больше, чем индийский палисандр. Для сравнения, клен имел самую низкую твердость во всех трех сечениях (7,6, 4,7 и 3,4 кН соответственно). Опять же, превосходная твердость трех видов древесины грифа может быть объяснена их высокой плотностью, меньшим количеством отверстий для труб на площади и более крупными волокнистыми стенками. В струнных инструментах клен в основном используется для спинки и реберной доски, которые предъявляют более низкие требования к твердости древесины. В целом древесина, используемая для грифа, должна иметь твердость в поперечном сечении более 9,0 кН и более 6 кН.0 кН в тангенциальном и радиальном сечениях.

    Фиг.7

    Твердость древесины. E обозначает черное дерево, R индийское розовое дерево, B африканское черное дерево и M клен. Знак * за пределами поля указывает на выброс. Когда ожидаемые данные группы были рассчитаны, выброс был удален

    С точки зрения физических и механических свойств, плотность древесины, содержание влаги, гигроскопичность, стабильность размеров, твердость, модуль разрыва и износостойкость являются важными критериями для определения выбор дерева грифа.В этой статье эти характеристики были измерены на трех типах обычно используемой древесины грифа и сравнивались с характеристиками клена. Такая информация поможет функциональному усовершенствованию быстрорастущей древесины, чтобы заменить традиционную древесину грифа.

    Цвет дерева

    Гриф струнных инструментов обычно бывает черного или темно-коричневого цвета в соответствии с традиционными эстетическими требованиями; в то время как дека, задник и нервюры в основном выполнены из ели и клена бежевого или светло-желтого цвета.Цвет сердцевины черного дерева и африканского черного дерева - угольно-черный или темно-коричневый и однородный (рис. 8). Для сравнения, индийский палисандр может выглядеть коричнево-черным, пурпурно-коричневым или темно-пурпурно-красным.

    Рис. 8

    Фотографии, показывающие внешний вид отдельных видов. a Ebony; b палисандр индийский; c Черное дерево африканское; d клен

    По сравнению с субъективным наблюдением человека, цвет образцов древесины можно объективно оценить с помощью колориметрии [20].Здесь цвет поверхности древесины был охарактеризован колориметром и выражен в пространстве цветности ( L * , a * , b * ). L * - это яркость, a * - красно-зеленый индекс и b * - желто-синий индекс [45].

    Согласно рис. 9, значение яркости L * традиционной древесины грифа было относительно низким в диапазоне 20–30 (для черного дерева, индийского палисандра и африканского черного дерева - 20,86, 29.17 и 21,89 соответственно). Напротив, значение L * для клена было примерно в три раза выше (69,69). Значения a * для черного дерева, индийского палисандра, африканского черного дерева и клена составили 0,72, 6,27, 1,46 и 5,74 соответственно. Значения b * также были положительными, что указывало на то, что цвета древесины были более желтыми, чем синими. Неудивительно, что у клена было относительно большое значение b * , равное 14,26, в то время как у черного дерева, индийского палисандра и африканского черного дерева было 0.92, 5.58 и 1.28 соответственно.

    Рис.9

    Колориметрические параметры ( L * (яркость), a * (пара красного / зеленого цветов) и b * (пара желтого / синего цветов)) четырех пород древесины

    Принимая во внимание измеренные значения L * , a * и b * для черного дерева, индийского палисандра и африканского черного дерева, мы определили, что их подходящие заменители должны иметь значение L * ниже 30 и b. * значение меньше 6.0. Эти критерии полезны для решения, какой потенциальный заменитель (натуральное дерево или после модификации) лучше соответствует цвету трех видов древесины грифа.

    Характеристика спектрально разнообразного набора флуоресцентных белков в качестве акцепторов FRET для mTurquoise2

  • 1.

    Чудаков, Д. М., Мац, М. В., Лукьянов, С. и Лукьянов, К. А. Флуоресцентные белки и их применение в визуализации живых клеток и тканей. Physiol Rev 90 , 1103–1163 (2010).

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 2.

    Цзянь Р. Ю. Зеленый флуоресцентный. Белки 67 , 509–44 (1998).

    CAS Google Scholar

  • 3.

    Мияваки А. и Ниино Ю. Молекулярные шпионы для биоимиджинга - флуоресцентные белковые зонды. Мол. Ячейка 58 , 632–643 (2015).

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 4.

    Чудаков, Д. М., Лукьянов, С., Лукьянов, К. А. Флуоресцентные белки как инструментарий для визуализации in vivo . Trends Biotechnol 23 , 605–613 (2005).

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 5.

    Gadella, T. W. J. Jr., Van der Krogt, G.N. & Bisseling, T. Микроскопия FRET на основе GFP в живых растительных клетках. Trends Plant Sci. 4 , 287–291 (1999).

    Артикул PubMed Google Scholar

  • 6.

    Мияваки, А. Разработка зондов для клеточных функций с использованием флуоресцентных белков и флуоресцентного резонансного переноса энергии. Annu. Rev. Biochem. 80 , 357–73 (2011).

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 7.

    Поллок Б. А. и Хайм Р. Использование GFP в приложениях на основе FRET. Trends Cell Biol. 9 , 57–60 (1999).

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 8.

    Пистон, Д. В. и Кремерс, Г. Дж. Флуоресцентный белок FRET: хорошее, плохое и уродливое. Trends Biochem. Sci. 32 , 407–14 (2007).

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 9.

    Jares-Erijman, E. A. & Jovin, T. M. FRET imaging. Nat Biotechnol 21 , 1387–1395 (2003).

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 10.

    Пьетрашевска-Богель, А.& Gadella, T. W. J. Jr. микроскопия FRET: от принципа к рутинной технологии в клеточной биологии. J. Microsc. 241 , 111–8 (2011).

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 11.

    Ву, П. Г. и Бранд, Л. Резонансная передача энергии: методы и приложения. Анал. Biochem. 218 , 1–13 (1994).

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 12.

    Хамерс, Д., ван В. Вейдер, Л., Борст, Дж. У. и Годхарт, Дж. Разработка биосенсоров FRET для систем млекопитающих и растений. Протоплазма 251 , 333–47 (2014).

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 13.

    Mehta, S. & Zhang, J. Репортаж с мест: генетически кодируемые флуоресцентные репортеры раскрывают динамику передачи сигналов в живых биологических системах. Annu. Rev. Biochem. 80 , 375–401 (2011).

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 14.

    Окумото, С., Джонс, А. и Фроммер, В. Б. Количественная визуализация с помощью флуоресцентных биосенсоров. Annu. Rev. Plant Biol. 63 , 663–706 (2012).

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 15.

    Goedhart, J., Vermeer, J. E., Adjobo-Hermans, M. J., van Weeren, L. & Gadella, T. W. J. Jr. Чувствительное обнаружение гомодимеров p65 с использованием пар FRET на основе красного смещения и флуоресцентных белков. PLoS One 02 , e1011 (2007).

    ADS Статья Google Scholar

  • 16.

    Ван дер Крогт, Г. Н. М., Огинк, Дж., Понсиоен, Б. и Ялинк, К. Сравнение донорно-акцепторных пар для генетически кодированных сенсоров FRET: применение к сенсору цАМФ Epac в качестве примера. PLoS One 3 , e1916 (2008).

    ADS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 17.

    Скотт Б. Л. и Хоппе А. Д. Оптимизация трио флуоресцентных белков для 3-сторонней визуализации FRET взаимодействий белков в живых клетках. Sci. Реп. 5 , 10270 (2015).

    ADS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 18.

    Кремерс, Дж. Дж., Годхарт, Дж., Ван Мюнстер, Э. Б. и Гаделла, Т. В. Дж. Мл. Циановые и желтые суперфлуоресцентные белки с улучшенной яркостью, сворачиванием белков и радиусом Фёрстера FRET. Биохимия 45 , 6570–80 (2006).

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 19.

    Кубитт, А. Б., Вулленвебер, Л. А. и Хейм, Р. Понимание структурно-функциональных взаимосвязей в зеленом флуоресцентном белке Aequorea victoria. Methods Cell Biol. 58 , 19–30 (1998).

    Артикул Google Scholar

  • 20.

    Симеринг, К. Р., Голбик, Р., Север, Р., Хазелофф, Дж. Мутации, которые подавляют термочувствительность зеленого флуоресцентного белка. Curr. Биол. 6 , 1653–1663 (1996).

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 21.

    Фукуда, Х., Араи, М. и Кувадзима, К. Сворачивание зеленого флуоресцентного белка и мутант Cycle3. Биохимия 39 , 12025–12032 (2000).

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 22.

    Паттерсон, Г. Х., Кнобель, С. М., Шариф, В. Д., Каин, С. Р. и Пистон, Д. В. Использование зеленого флуоресцентного белка и его мутантов в количественной флуоресцентной микроскопии. Biophys. J. 73 , 2782–90 (1997).

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 23.

    Кормак Б.П., Вальдивиа Р. Х. и Фалькоу С. Оптимизированные для FACS мутанты зеленого флуоресцентного белка (GFP). Джин 173 , 33–38 (1996).

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 24.

    Nagai, T. et al. . Вариант желтого флуоресцентного белка с быстрым и эффективным созреванием для клеточно-биологических применений. Нат. Biotechnol. 20 , 87–90 (2002).

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 25.

    Вахтер Р. М., Уоткинс Дж. Л. и Ким Х. Механическое разнообразие приобретения красной флуоресценции GFP-подобными белками. Биохимия 49 , 7417–27 (2010).

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 26.

    Мияваки А., Щербакова Д. М. и Верхуша В. В. Красные флуоресцентные белки: образование хромофоров и клеточные применения. Curr. Opin. Struct. Биол. 22 , 679–688 (2012).

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 27.

    Грисбек О., Бэрд Г. С., Кэмпбелл Р. Э., Захариас Д. А. и Циен Р. Ю. Снижение чувствительности желтого флуоресцентного белка к окружающей среде. Механизм и приложения. J. Biol. Chem. 276 , 29188–94 (2001).

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 28.

    Rekas, A., Alattia, J.-R., Nagai, T., Miyawaki, A. & Ikura, M. Кристаллическая структура венеры, желтый флуоресцентный белок с улучшенным созреванием и пониженной чувствительностью к окружающей среде. J. Biol. Chem. 277 , 50573–8 (2002).

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 29.

    Верхуша В.В., Лукьянов К.А. Молекулярные свойства и применение флуоресцентных белков и хромопротеинов Anthozoa. Нат. Biotechnol. 22 , 289–96 (2004).

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 30.

    Бэрд, Г. С., Захариас, Д. А. и Циен, Р. Ю. Биохимия, мутагенез и олигомеризация DsRed, красного флуоресцентного белка кораллов. Proc. Natl. Акад. Sci. США 97 , 11984–9 (2000).

    ADS CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 31.

    Захариас Д. А. Разделение липид-модифицированных мономерных GFP на мембранные микродомены живых клеток. Наука (80-.). 296 , 913–916 (2002).

    ADS CAS Статья Google Scholar

  • 32.

    Винкенборг, Дж. Л., Эверс, Т. Х., Реулен, С. Ва, Мейер, Э. У. и Мерккс, М. Повышенная чувствительность датчиков протеазы на основе FRET путем изменения интерфейса димеризации GFP. Chembiochem 8 , 1119–21 (2007).

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 33.

    Линденбург, Л. Х. и др. . Количественная оценка липкости: термодинамическая характеристика взаимодействий внутримолекулярных доменов для руководства при проектировании датчиков резонансной передачи энергии Фёрстера. Биохимия 53 , 6370–81 (2014).

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 34.

    Нгуен, А. В. и Догерти, П. С. Эволюционная оптимизация флуоресцентных белков для внутриклеточного FRET. Нат. Biotechnol. 23 , 355–60 (2005).

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 35.

    Кэмпбелл Р.Э. и др. . Мономерный красный флуоресцентный белок. Proc. Natl. Акад. Sci. США 99 , 7877–82 (2002).

    ADS CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 36.

    Биндельс, Д. С. и др. . mScarlet: яркий мономерный красный флуоресцентный белок для визуализации клеток. Нат. Методы 14 (2016). С. 53–56.

    Артикул PubMed Google Scholar

  • 37.

    Pédelacq, J.-D., Cabantous, S., Tran, T., Terwilliger, T.C. & Waldo, G.S. Разработка и характеристика зеленого флуоресцентного белка суперпакета. Нат. Biotechnol. 24 , 79–88 (2006).

    Артикул PubMed Google Scholar

  • 38.

    Costantini, L. M., Fossati, M., Francolini, M. & Snapp, E. L. Оценка тенденции флуоресцентных белков к олигомеризации в физиологических условиях. Трафик 13 , 643–649 (2012).

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 39.

    Костантини, Л. М. и др. . Палитра флуоресцентных белков, оптимизированная для различных клеточных сред. Нат. Commun. 6 , 7670 (2015).

    Артикул PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 40.

    Крэнфилл, П. Дж. и др. . Количественная оценка флуоресцентных белков. Нат. Методы 13 , 557–562 (2016).

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 41.

    Ван Манстер, Э. Б., Кремерс, Г. Дж., Аджобо-Херманс, М. Дж. У. и Гаделла, Т. У. Дж. Младший. Измерение резонансного переноса энергии флуоресценции (FRET) путем постепенного фотообесцвечивания акцепторов. J. Microsc. 218 , 253–262 (2005).

    MathSciNet Статья PubMed Google Scholar

  • 42.

    Goedhart, J. et al. . Структурно-управляемая эволюция голубых флуоресцентных белков в направлении квантового выхода 93%. Нат. Commun. 3 , 751 (2012).

    Артикул PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 43.

    Shaner, N.C. et al. . Повышение фотостабильности ярких мономерных оранжевых и красных флуоресцентных белков. Нат. Методы 5 , 545–551 (2008).

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 44.

    Коди, К. В., Прашер, Д. К., Вестлер, В. М., Прендергаст, Ф. Г. и Уорд, В. В. Химическая структура гексапептидного хромофора зеленого флуоресцентного белка Aequorea. Биохимия 32 , 1212–1218 (1993).

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 45.

    Swaminathan, R., Hoang, C.P., Verkman, A.S. Восстановление после фотообесцвечивания и распад анизотропии зеленого флуоресцентного белка GFP-S65T в растворе и клетках: вязкость цитоплазмы, измеренная с помощью трансляционной и вращательной диффузии зеленого флуоресцентного белка. Biophys. J. 72 , 1900–7 (1997).

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 46.

    Cubitt, A.Б. и др. . Понимание, улучшение и использование зеленых флуоресцентных белков. Trends Biochem. Sci. 20 , 448–455 (1995).

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 47.

    Гринбаум Л., Ротманн С. и Лави Р. Фотообесцвечивание зеленого флуоресцентного белка: модель повреждения белков эндогенным и экзогенным синглетным кислородом. Biol. Chem. 381 , 1251–1258 (2000).

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 48.

    Нагаи, Т., Ямада, С., Томинага, Т., Итикава, М. и Мияваки, А. Расширенный динамический диапазон флуоресцентных индикаторов для Са (2+) за счет циркулярно пермутированных желтых флуоресцентных белков. Proc. Natl. Акад. Sci. США 101 , 10554–9 (2004).

    ADS CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 49.

    Adjobo-Hermans, M. J. et al. . Визуализация в реальном времени активации гетеротримерного G-белка Gq в живых клетках. BMC Biol. 9 , 32 (2011).

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 50.

    Klarenbeek, J., Goedhart, J., van Batenburg, A., Groenewald, D. & Jalink, K. Датчики FRET четвертого поколения на основе epac для cAMP обладают исключительной яркостью, фотостабильностью и динамическим диапазоном: характеристика специализированных датчиков для FLIM, для ратиометрии и с высоким сродством. PLoS One 10 , e0122513 (2015).

    Артикул PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 51.

    Фриц Р. Д. и др. . Универсальный набор инструментов для создания чувствительных биосенсоров FRET для визуализации сигналов во времени и пространстве. Sci. Сигнал. 6 , RS12 (2013).

    Артикул PubMed Google Scholar

  • 52.

    Komatsu, N. и др. . Разработка оптимизированной основы биосенсоров FRET для киназ и GTPases. Мол. Биол. Ячейка 22 , 4647–56 (2011).

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 53.

    Шимозоно С. и Мияваки А. Разработка конструкций FRET с использованием CFP и YFP. Methods Cell Biol. 85 , 381–93 (2008).

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 54.

    Peroza, E. A., Boumezbeur, A.-H. И Замбони, Н. Быстрая, рандомизированная разработка генетически кодируемых сенсоров FRET для малых молекул. Аналитик 140 , 4540–8 (2015).

    ADS CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 55.

    Шифферер, М.И Грисбек, О. Динамический репортер FRET экспрессии генов, улучшенный функциональным скринингом. J. Am. Chem. Soc. 134 , 15185–15188 (2012).

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 56.

    Ohta, Y. et al. . Нетривиальный эффект цветообмена пары донор / акцептор в разработке индикаторов на основе резонансного переноса энергии Фёрстера (FRET). ACS Chem. Биол. 11 , 1816–22 (2016).

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 57.

    Goedhart, J., Hink, M. A. & Jalink, K. Введение в методы флуоресцентной визуализации, ориентированные на применение биосенсоров. Методы молекулярной биологии 1071 , 17–28 (2014).

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 58.

    ван Унен, Дж. и др. . Количественный одноклеточный анализ сигнальных путей, активируемых непосредственно после подтипов гистаминовых рецепторов. Мол. Pharmacol. 90 (2016). С. 162–176.

    Артикул PubMed Google Scholar

  • 59.

    Богданов А.М. и др. . Включение и выключение фотоиндуцированного переноса электронов в флуоресцентных белках с помощью π-стекирования, связывания галогенидов и мутаций Tyr145. J. Am. Chem. Soc. 138 , 4807–17 (2016).

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 60.

    Goedhart, J. et al. . Количественная совместная экспрессия белков на уровне отдельной клетки - применение к мультимерному датчику FRET. PLoS One 6 , e27321 (2011).

    ADS CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 61.

    Raspe, M. и др. . siFLIM: FLIM с одним изображением в частотной области предоставляет быстрые и эффективные по фотонам данные о сроке службы. Нат. Методы 13 , 501–4 (2016).

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 62.

    Баджар Б. Т. и др. . Повышение яркости и фотостабильности зеленых и красных флуоресцентных белков для визуализации живых клеток и отчетов FRET. Sci. Реп. 6 , 20889 (2016).

    ADS CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 63.

    Shaner, N.C. et al. . Яркий мономерный зеленый флуоресцентный белок, полученный из Branchiostoma lanceolatum. Нат. Методы 10 , 407–409 (2013).

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 64.

    Thestrup, T. и др. . Оптимизированные ратиометрические датчики кальция для функциональной in vivo визуализации нейронов и Т-лимфоцитов. Нат. Методы 11 (2014), 175–82.

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 65.

    Shaner, N.C. et al. . Улучшенные мономерные красные, оранжевые и желтые флуоресцентные белки, полученные из Discosoma sp. красный флуоресцентный белок. Нат. Biotechnol. 22 , 1567–1572 (2004).

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 66.

    Шимозоно, С. и др. . Конкатенация голубых и желтых флуоресцентных белков для эффективной резонансной передачи энергии. Биохимия 45 , 6267–6271 (2006).

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 67.

    Оуян, М. и др. . Одновременная визуализация протуморигенных активностей Src и MT1-MMP с резонансным переносом энергии флуоресценции. Cancer Res. 70 , 2204–2212 (2010).

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 68.

    Sun, Y. et al. . Характеристика оранжевого акцепторного флуоресцентного белка для сенсибилизированной спектральной флуоресцентной резонансной микроскопии с переносом энергии с использованием лазера белого света. J. Biomed. Опт. 14 , 54009 (2009).

    Артикул Google Scholar

  • 69.

    Цуцуи, Х., Карасава, С., Окамура, Ю. и Мияваки, А. Улучшение измерений мембранного напряжения с использованием FRET с новыми флуоресцентными белками. Нат. Методы 5 , 683–5 (2008).

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 70.

    Муракоши, Х., Ли, С. Дж. И Ясуда, Р. Высокочувствительная и количественная визуализация FRET-FLIM отдельных дендритных шипов с использованием улучшенного безызлучательного YFP. Brain Cell Biol. 36 , 31–42 (2008).

    Артикул PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 71.

    Щербо Д. и др. . Ярко-красные флуоресцентные метки для визуализации белков в живых тканях. Biochem.J. 418 , 567–574 (2009).

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 72.

    Ким, Дж. Х. и др. . Высокая эффективность расщепления пептида 2А, полученного из тешовируса-1 свиньи, в линиях клеток человека, рыбок данио и мышей. PLoS One 6 , 1–8 (2011).

    Google Scholar

  • 73.

    Goedhart, J. & Gadella, T. W. J. Jr. Анализ отжига олигонуклеотидов с помощью электрофореза в агарозных гелях с использованием проводящей среды бората натрия. Анал. Biochem. 343 , 186–187 (2005).

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 74.

    van Unen, J. et al. . Ограниченная плазматической мембраной активность RhoGEF достаточна для RhoA-опосредованной полимеризации актина. Sci. Реп. 5 , 14693 (2015).

    ADS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 75.

    Перц, О., Ходжсон, Л., Клемке, Р. Л., Хан, К. М. Пространственно-временная динамика активности RhoA в мигрирующих клетках. Природа 440 , 1069–72 (2006).

    ADS CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 76.

    Хортон, Р. М., Хант, Х. Д., Хо, С. Н., Пуллен, Дж. К. и Пиз, Л. Р. Разработка гибридных генов без использования рестрикционных ферментов: сплайсинг генов путем перекрывания последовательностей удлинения; частота ошибок; экзон; интрон; мозаичный гибридный белок; гены гистосовместимости мышей. 77 , 61–68 (1989).

  • 77.

    Хекман, К.Л. и Пиз, Л.Р. Сплайсинг генов и мутагенез посредством ПЦР-управляемого удлинения перекрывания. Нат. Protoc. 2 , 924–32 (2007).

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 78.

    Биндельс, Д. С. и др. . В Флуоресцентная спектроскопия и микроскопия: методы и протоколы (редакторы Энгельборгс, Ю. и Виссер, Дж. У. Г. А.) 371–417 (Humana Press, 2014). https://doi.org/10.1007/978-1-62703-649-8_16.

  • 79.

    Кремерс, Дж. Дж., Годхарт, Дж., Ван Ден Хевел, Д. Дж., Герритсен, Х. С. и Гаделла-младший, Т. В. Дж. Улучшенные зеленые и синие флуоресцентные белки для экспрессии в клетках бактерий и млекопитающих. Биохимия 46 , 3775–3783 (2007).

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 80.

    Ван Манстер, Э. Б. и Гаделла, Т. У. Дж. Мл. PhiFLIM: новый метод, позволяющий избежать наложения спектров в микроскопии с визуализацией времени жизни флуоресценции в частотной области. J. Microsc. 213 , 29–38 (2004).

    MathSciNet Статья PubMed Google Scholar

  • 81.

    van Munster, E. B. и Gadella, T. W. Jr. Подавление артефактов, вызванных фотообесцвечиванием, в FLIM частотной области путем изменения порядка записи. Cytom. A 58 , 185–194 (2004).

    Артикул Google Scholar

  • 82.

    Ван Манстер, Э. Б. и Гаделла, Т. У. Дж. Младший, флуоресцентная микроскопия с визуализацией на протяжении всей жизни (FLIM). Достижения в области биохимической инженерии / биотехнологии 95 , 143–175 (2005).

    Артикул PubMed Google Scholar

  • 83.

    Vermeer, J. E. M., Van Munster, E. B., Vischer, N. O. & Gadella, T. W. J. Jr. Зондирование микродоменов плазматической мембраны в протопластах коровьего гороха с использованием липидированных GFP-слитых белков и многомодовой микроскопии FRET. J. Microsc. 214 , 190–200 (2004).

    MathSciNet CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 84.

    Wlodarczyk, J. et al. . Анализ сигналов FRET при наличии свободных доноров и акцепторов.

  • Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *